異型淋巴細(xì)胞精選(九篇)
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第1篇：異型淋巴細(xì)胞范文
【關(guān)鍵詞】
傳單患者；EB病毒DNA；異型淋巴細(xì)胞；相關(guān)性
作者單位：563000遵義市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科
皰疹病毒是一較大的囊膜的雙鏈DNA病毒，分為A群和B群兩個(gè)亞群。凡在體外培養(yǎng)時(shí)，容易從細(xì)胞內(nèi)釋放營養(yǎng)液中的病毒為A群；病毒同細(xì)胞緊密結(jié)合，很難釋放到營養(yǎng)液中的為B群?；蚪M結(jié)構(gòu)由末端重復(fù)序列和內(nèi)部重復(fù)序列組成，皰疹病毒基因可以整合于細(xì)胞的基因內(nèi)，成為細(xì)胞DNA的一部分，形成長(zhǎng)期潛伏感染狀態(tài)，皰疹病毒潛伏感染與腫瘤發(fā)生有關(guān)，尤其與鼻咽癌密切相關(guān)，EB病毒屬皰疹病毒4型，EB病毒感染可引起傳染性單核細(xì)胞增多癥、鼻咽癌、兒童淋巴瘤。傳染性單核細(xì)胞增多癥是我國常見的幼兒傳染病，人群普遍易感，是由EB病毒引起的急性傳染病，EB病毒是一種嗜淋巴細(xì)胞病毒，70%淋巴細(xì)胞細(xì)胞增多，而且異型淋巴細(xì)胞明顯增多[1]，傳單患者大部分鼻咽部含有EB病毒。
1資料與方法
11一般資料
所有標(biāo)本均來自本院確診的病房患者和部分門診患者，由護(hù)理人員抽取患者靜脈血2～3 ml注入EDTAK2抗凝管中送檢， 用水平離心機(jī)1500r/min離心10 min編號(hào)待測(cè)。男性30人，女性18人；年齡最小6月，最大13歲，平均年齡41歲，且均為臨床上最后確診為傳染性單核細(xì)胞增多癥48例，其中EB病毒DNA定量拷貝數(shù)>10×103（陽性）40例，異淋巴細(xì)胞>4%（陽性）22例。
12異淋巴細(xì)胞檢測(cè)儀器、試劑及方法
異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)EDTAK2抗凝全血用SYSMEX2100血流流水線上自動(dòng)推片機(jī)進(jìn)行推片，自動(dòng)瑞士染液染色的血片，由經(jīng)驗(yàn)豐富的血液工作人員兩人共閱片求出的均值作為最后異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)值（>4%為陽性）。
13EB病毒DNA定量檢測(cè)儀器、試劑及方法
使用羅氏（LightCycler480）480PCR擴(kuò)增分析儀，采用中山大學(xué)達(dá)安基因試劑盒進(jìn)行定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)，方法為實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)進(jìn)行定量檢測(cè)。質(zhì)量控制：查看陰性，陽性及標(biāo)準(zhǔn)定值是否吻合決定此次檢測(cè)情況。陰性質(zhì)控品：增長(zhǎng)曲線不呈“3”型曲線或Ct=30，陽性質(zhì)控品：增長(zhǎng)曲線呈“3”型線，且強(qiáng)陽性質(zhì)控品定量參值在10×106～20×108范圍，臨界陽性質(zhì)控品參考值在20×102～20×104IU/ml范圍（參考值為儀器自動(dòng)分析計(jì)算出的數(shù)值）。陽性定量參考品：全部陽性，且線性相關(guān)系數(shù)097≤∣r∣≤1。測(cè)定結(jié)果有效必須具備以上質(zhì)控條件同時(shí)滿足，否則結(jié)果無效，需重做實(shí)驗(yàn)。檢測(cè)EB病毒DNA靈敏檢測(cè)范圍在102～107拷貝/ml之間。
14操作步驟
141異型淋巴細(xì)胞檢測(cè)EDTAK2抗凝全血充分混勻20次后，用SYSMEX2100血液流水線上自動(dòng)推片機(jī)進(jìn)行推片，自動(dòng)瑞氏染液染色的血片，由經(jīng)驗(yàn)豐富的血液工作人員兩人共閱血片的體尾部細(xì)胞分布均勻的部位，求出的均值作為最后異型淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)值（>4%為陽性）。
142EB病毒DNA的定量測(cè)定
1421DNA提?。?biāo)本處理區(qū)）①取15 ml滅菌離心管編號(hào)（與標(biāo)本同號(hào)）。②取50 μl DNA提取液于15 ml滅菌離心管中， 細(xì)心提取血清與血細(xì)胞交界處的白細(xì)胞層，盡量吸完放入滅菌離心管中，充分吹打混勻約靜置5 min。③振蕩器劇烈振蕩混勻5～10 s，置（100±1）℃恒溫金屬浴中孵育（10±1） min，12000r/min離心5 min備用。
1422試劑準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備區(qū)）①從冰箱中取出EB病毒DNA檢測(cè)試劑，室溫解凍，取02 ml樣品擴(kuò)增八連管，按比例加入EB病毒DNAPCR反應(yīng)液40 μl+Taq酶3 μl/人份至八連管中。②將加好試劑的擴(kuò)增八連管放入試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本處理區(qū)之間的傳遞窗中。③加樣：在標(biāo)本處理區(qū)從傳遞窗中取出加好試劑的八連管于生物安全柜中加樣，分別依次加入處理好的標(biāo)本上清液2 μl，陰性質(zhì)控品、臨界陽性質(zhì)控品和強(qiáng)陽性質(zhì)控品后，蓋上密封條密閉，8000 r/min離心數(shù)秒。④將處理好的樣本放入標(biāo)本處理區(qū)和擴(kuò)增區(qū)之間的傳遞窗中，準(zhǔn)備擴(kuò)增。
1423樣品擴(kuò)增（PCR擴(kuò)增區(qū)）①打開擴(kuò)增區(qū)電腦及LightCycler480主機(jī)，查看反應(yīng)條件是否吻合，否則重新設(shè)置。②從傳遞窗中取出準(zhǔn)備好的樣品擴(kuò)增管，放入LightCycler480主機(jī)儀器擴(kuò)增板內(nèi)，再放進(jìn)LightCycler480主機(jī)進(jìn)行擴(kuò)增。
2結(jié)果
21異型淋巴細(xì)胞>4%（陽性組）的22例，EB病毒DNA檢測(cè)值>10×103（陽性組）標(biāo)本40例，見表1。
22結(jié)果發(fā)現(xiàn)在臨床確診的傳染性單核細(xì)胞增多癥48例患者中，EB病毒DNA定量核酸檢測(cè)陽性達(dá)833%，由于核酸檢測(cè)速度快，使用EDTAK2抗凝全血采樣方便，對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥患者有非常高的早期診斷價(jià)值，EDTAK2抗凝全血涂片查異型淋巴細(xì)胞對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷陽性率也高達(dá)458%（高于文獻(xiàn)2所述[2]），此次研究發(fā)現(xiàn)EB病毒DNA定量核酸檢測(cè)明顯高于血涂片查異型淋巴細(xì)胞對(duì)傳染性單核細(xì)胞增多癥，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
23統(tǒng)計(jì)方法處理t檢驗(yàn)。
3討論
EB病毒感染引起的傳染病，人員普遍易感，EB病毒（EBV）幾乎與所有鼻咽癌有關(guān)； EB病毒（EBV）對(duì)診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥至關(guān)重要；EB病毒（EBV）還同Burkitt淋巴瘤、免疫損傷性患者的淋巴瘤有關(guān)； EB病毒（EBV）同時(shí)也可能與何杰金氏?。℉odgkinsdisease）、慢性疲勞綜合征、移植后淋巴組織增生癥等有關(guān)；檢測(cè)EBV病毒的PCR（EBVDNA），PCR熒光定量技術(shù)可從少量標(biāo)本中擴(kuò)增檢測(cè)出所需DNA，適用于多種不同標(biāo)本的檢測(cè)。為臨床檢測(cè)、普查EBV提供快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)手段。
本次檢測(cè)的均為臨床確診的傳染性單核細(xì)胞增多癥患者，傳染性單核細(xì)胞增多癥是由EB病毒感染引起的傳染病，人員普遍易感。EB病毒（EBV）核酸檢測(cè)對(duì)診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥至關(guān)重要， 本次是EDTAK2抗凝全血提白細(xì)胞層檢測(cè)核酸檢測(cè)，陽性率高達(dá)833%高于文獻(xiàn)3中所述[3]，而且具有采樣方便，檢測(cè)時(shí)間快；可能陽性率更高，非常高的早期診斷價(jià)值診斷價(jià)值。此次實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沒有取鼻咽部分泌物進(jìn)行核酸檢測(cè)，傳染性單核細(xì)胞增多癥患者大部分鼻咽部含有EB病毒，采樣更方便，可能陽性率更高。
EB病毒是一種嗜淋巴細(xì)胞病毒，70%傳染性單核細(xì)胞增多癥患者淋巴細(xì)胞細(xì)胞增多，而且異型淋巴細(xì)胞也明顯增多，可見異型淋巴細(xì)胞也是實(shí)驗(yàn)室輔助診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥的重要方法，陽性率458%高于文獻(xiàn)4中所述[4]。雖然不如核酸檢測(cè)陽性率的臨床意義大。但是對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求不高，適合于各級(jí)實(shí)驗(yàn)室，更適合于不具備條件開展PCR核酸檢測(cè)的醫(yī)院輔助診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥。
參考文獻(xiàn)
[1]陳尚明，黃海英.小兒傳染性單核細(xì)胞增多癥72例臨床分析南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，29（4）：305-307.
[2]陸丹，胡興文，曾菊.兒童EB病毒感染與異型淋巴細(xì)胞相關(guān)性分析，中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2009，13（12）：1732-1734.
第2篇：異型淋巴細(xì)胞范文
【關(guān)鍵詞】 透明細(xì)胞肉瘤；淋巴結(jié)；轉(zhuǎn)移性；臨床病理
Analysis of clinical pathology on two patients with metastatic clear cell sarcoma of lymph node
【Abstract】 Objective To investigate points on clinical and pathological features, diagnosis, differential diagnosis of metastatic clear cell sarcoma of lymph node. Methods Observing clinical features of two patients pathologically diagnosed metastatic clear cell sarcoma of lymph node, and analyzing the results of histology and immunohistochemistry from tumor tissue. ResultsThe inguinal lymph nodes metastatic tumor was positive in two patients. Tumor tissue that was separated nest and bundle of varying sizes by fibrous tissue consisted of polygonal cells with rich and transparent cytoplasm or spindle cells. There were some multinucleated giant cells, hemorrhage and necrosis in tissue. Retrospective history, two patients underwent the lateral malleolus or above the knee tumor resection ever before one to one and half year. Both the groin mass were found six months ago. Vimentin, S-100, HMB-45 and Melan-A of tumor cells all were positive by immunohistochemical stain. ConclusionIt is difficult to diagnose for metastatic clear cell sarcoma of lymph node. We should review history and focus on morphology with HE stain. Immunohistochemistry also is helpful.
【Key words】 Clear cell sarcoma； Lymph node； Metastatic； Clinical pathology
透明細(xì)胞肉瘤(CCS)是一種具有色素細(xì)胞分化的軟組織肉瘤，好發(fā)于四肢末端，常與肌腱、腱膜有關(guān)，組織來源尚未確定。CCS較少見，約占軟組織肉瘤的1%，可發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。我們總結(jié)2例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性的透明細(xì)胞肉瘤，結(jié)合文獻(xiàn)予以討論。
1 材料與方法
收集珠海中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院病理科淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性CCS2例?；颊呔鶠榕裕焕?6歲，左側(cè)腹股溝腫物；一例38歲，左大腿腫物。2例均行腫物切除術(shù)。標(biāo)本經(jīng)10%中爾馬林固定，沿腫物的最大徑剖開，腫物實(shí)質(zhì)取2~4個(gè)組織塊，經(jīng)脫水透明浸蠟，石蠟包埋，4~5 μm厚切片，常規(guī)HE染色，并做免疫組化標(biāo)記，S-P法染色，所用單克隆抗體為HMB-45、Melan-A、S-100、Vimentin、CK(AE1/AE3)、EMA、CD34及actin，試劑均購自福建邁新生物有限公司。
2 結(jié)果
2.1 臨床特征 一例患者發(fā)現(xiàn)左側(cè)腹股溝腫物20余天，追溯病史患者一年前在外院行左足外踝關(guān)節(jié)下腫物切除術(shù)，術(shù)后病理診斷：血管外皮肉瘤；一例患者38歲，發(fā)現(xiàn)左大腿腫物一年，快速增大一月余，追溯病史患者一年半前曾行左膝蓋上方腫物切除術(shù)，術(shù)后診斷不詳。
2.2 大體檢查 2例均送檢灰白色結(jié)節(jié)，直徑1.5~2.5 cm，邊界清楚，包膜完整，切面灰白、灰紅色，實(shí)性。
2.3 鏡下檢查 2例淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)破壞，腫瘤細(xì)胞呈巢狀、片狀或束狀彌漫浸潤(rùn)，其間被細(xì)纖維結(jié)締組織分隔，腫瘤細(xì)胞中等大小，胞漿透亮或略嗜酸性，可見嗜堿性或嗜雙色性的大核仁。2例中均可見少量多核巨細(xì)胞，3~8個(gè)核排列在胞質(zhì)周圍。
2.4 免疫表型 2例彌漫性強(qiáng)陽性表達(dá)HMB-45、S-100及Vimentin，灶狀表達(dá)Melan-A，不表達(dá)CK、EMA、actin及CD34。
3 討論
淋巴結(jié)疾病一向是病理診斷的難點(diǎn)。淋巴結(jié)的惡性腫瘤以淋巴瘤及轉(zhuǎn)移癌多見。一般情況下肉瘤多沿血道轉(zhuǎn)移。透明細(xì)胞肉瘤的轉(zhuǎn)移率高達(dá)60%~70%，最常轉(zhuǎn)移的部位是淋巴結(jié)、肺臟和骨［1］。
3.1 臨床病理特點(diǎn) CCS又稱為軟組織惡性黑色素瘤，由Enzinger于1965年首次報(bào)道［2］。本病好發(fā)于20~40歲的青年人，無明顯的性別和種族差異，見于全身各部位，但常見于為四肢遠(yuǎn)端，也見于膝、大腿、頭、頸。起病隱匿，往往無其他癥狀［3］。腫瘤位于深部軟組織內(nèi)，常與肌腱、筋膜粘連［4，5］。
3.2 組織發(fā)生 CCS的組織發(fā)生不明確，部分學(xué)者認(rèn)為CCS是來源于神經(jīng)嵴的一種惡性腫瘤，依據(jù)是電鏡下瘤細(xì)胞內(nèi)含黑色素小體，S-100及HMB-45標(biāo)記陽性，推測(cè)可能是胚胎發(fā)育中遷移到肌腱或腱膜中的黑色素細(xì)胞來源［6］。
3.3 診斷要點(diǎn) 本次討論的兩例患者均以淋巴結(jié)病變?yōu)槭自\目的，首診部位均無特異性，而追溯病史發(fā)現(xiàn)原發(fā)部位均為CCS經(jīng)典的好發(fā)部位，足外踝下方的腱膜及膝關(guān)節(jié)上方的腱膜。鏡下淋巴結(jié)內(nèi)腫瘤組織具有典型的CCS的鏡下表現(xiàn)，免疫表型亦支持。
3.4 鑒別診斷 本次討論的兩個(gè)病例應(yīng)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤鑒別，首先應(yīng)該追溯病史，原發(fā)的惡性黑色素瘤往往原發(fā)于皮膚，或與皮膚相連，鏡下多形性明顯，多有所謂的“四不象結(jié)構(gòu)”。兩者的免疫表型相似，無鑒別意義。其他需要鑒別的腫瘤主要有含有上皮樣細(xì)胞成分的肉瘤，如滑膜肉瘤、纖維肉瘤、上皮樣惡性外周神經(jīng)鞘膜瘤、上皮樣肉瘤及腺泡狀軟組織肉瘤等。這些腫瘤發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的可能性小，而且通過免疫標(biāo)記鑒別，這些腫瘤的HMB-45是陰性的。
參 考 文 獻(xiàn)
［1］ 軟組織透明細(xì)胞肉瘤5例臨床病理分析.
［2］ Enzinger RM. Clear cell sarcoma of tendons and aponcuroses. Cancer, 1965,18：1163-6.
［3］ 軟組織透明細(xì)胞肉瘤的臨床與病理特點(diǎn).
［4］ Chung EB, Enzinger FM. M alignant melanoma of soft parts A reassessment of clear cell sarcoma.Am J Surg Pathol, 1983, 7:405-13.
第3篇：異型淋巴細(xì)胞范文
[關(guān)鍵詞] 特發(fā)性血小板減少性紫癜；T淋巴細(xì)胞亞群；B淋巴細(xì)胞；NK細(xì)胞
[中圖分類號(hào)] R558+.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] C[文章編號(hào)] 1674-4721（2011）04（c）-083-02
特發(fā)性血小板減少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）發(fā)病機(jī)制尚不完全明了，目前認(rèn)為可能與機(jī)體免疫功能失調(diào)、血小板相關(guān)抗體產(chǎn)生、免疫細(xì)胞介導(dǎo)的血小板凋亡等有關(guān)[1-2]，但確切機(jī)制仍未完全明確。本文就淋巴細(xì)胞亞群與ITP發(fā)生的關(guān)系及其臨床意義進(jìn)行了分析。
1 資料與方法
1.1 一般資料
2010年3月～2011年2月在本院血液科住院的ITP患者60例，男25例，女35例；年齡1～14歲，平均（6.1±2.3）歲，診斷均符合文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[3]。將其分為：新診斷ITP組（診斷后3個(gè)月以內(nèi)血小板減少）35例，持續(xù)性組（診斷后3～12個(gè)月血小板持續(xù)減少）15例，慢性ITP組（血小板減少持續(xù)超過12個(gè)月）10例，所有患兒在采集標(biāo)本1周內(nèi)均未接受糖皮質(zhì)激素等任何免疫相關(guān)治療。對(duì)照組為30例為健康體檢者，男18例，女12例；年齡1～11歲，平均（5.8±6.1）歲。兩組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。
1.2 方法
本實(shí)驗(yàn)各單抗及相應(yīng)的同型對(duì)照及試劑盒均為由美國BD公司提供，流式細(xì)胞儀為美國Beckman-Coulter公司產(chǎn)品。Th/Ts淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞及NK細(xì)胞為抽取晨起空腹外周血2 ml，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定，分析計(jì)算CD19+、CD16+CD56+細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+細(xì)胞比值。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞檢測(cè)為采集外周靜脈血5 ml，送檢并計(jì)算CD4+CD25+T細(xì)胞、CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞的比例。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行處理，計(jì)量資料以表示，數(shù)據(jù)資料呈正態(tài)分布，組間比較采用t檢驗(yàn)，P
2 結(jié)果
2.1 Th/Ts細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果
見表1。
2.2 CD4+CD25+T細(xì)胞和CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)檢測(cè)結(jié)果
見表2。
3 討論
ITP為一種自身免疫性疾病，其中急性ITP為急性、自限過程，免疫狀態(tài)好，隨病原菌清除而恢復(fù)，不需要治療，可自行恢復(fù)；慢性ITP為慢性病程，存在免疫失調(diào)和異常，細(xì)胞因子產(chǎn)生增強(qiáng)、淋巴細(xì)胞活性增加和特殊的自身抗體產(chǎn)生，需免疫治療[4]。Cines DB等[5]認(rèn)為，盡管B細(xì)胞產(chǎn)生針對(duì)血小板的自身抗體是ITP發(fā)病的直接原因，但T細(xì)胞異常導(dǎo)致B細(xì)胞激活可能是ITP真正的發(fā)病機(jī)制。
T淋巴細(xì)胞在免疫反應(yīng)中起重要作用，是細(xì)胞免疫和體液免疫的重要環(huán)節(jié)，按免疫應(yīng)答中的功能不同，可將T細(xì)胞分成輔T細(xì)胞（Th）和抑制性T細(xì)胞（TS）。最新的研究表明，輔T細(xì)胞（Th）和抑制性T細(xì)胞（TS）中不是所有的CD4+CD25+T細(xì)胞均具有抑制自身免疫的功能，部分CD4+CD25+T細(xì)胞并不具有調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的功能。CD4+CD25+T細(xì)胞發(fā)揮抑制自身免疫的功能需要達(dá)叉頭/翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子基因的穩(wěn)定持續(xù)和高水平表達(dá)，而其表達(dá)降低不僅使得CD4+CD25+T細(xì)胞調(diào)節(jié)喪失，還使得CD4+T細(xì)胞更易于分化為Th2細(xì)胞，從而誘發(fā)多種重大免疫相關(guān)性疾病，其中與自身免疫性疾病的生理病變進(jìn)程密切相關(guān)[6]。
本研究結(jié)果顯示，CD4+CD25+細(xì)胞/CD4+T淋巴細(xì)胞和CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞/CD4+細(xì)胞在持續(xù)性ITP組和慢性ITP組降低，在新診斷ITP組CD4+CD25+Foxp3+T細(xì)胞/CD4+細(xì)胞降低，提示CD4+CD25+和CD4+CD25+Foxp3+Treg免疫調(diào)節(jié)功能異常是ITP發(fā)病的重要機(jī)制。故筆者認(rèn)為，T、B淋巴細(xì)胞免疫功能失衡在兒童持續(xù)性和慢性ITP的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。對(duì)于ITP患兒，尤其兒童持續(xù)性和慢性ITP具有重要的臨床意義。
[參考文獻(xiàn)]
[1]羅桂英,鐘立群,梁昌達(dá),等.特發(fā)性血小板減少性紫癜患兒血小板膜糖蛋白特異性抗體水平檢測(cè)的意義[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2008,23(15):1179-1180.
[2]Provan D,Stasi R,Newland AC,et al.International consensus report on the investigation and management of primary immune thrombocytopenia[J].Blood,2010,115:168-186.
[3]楊仁池.免疫性血小板減少癥的命名、定義與療效評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)化[J].中華血液學(xué)雜志,2009,30(3):215-216.
[4]吳海,廖欽晨,賀慧娟,等.擴(kuò)張型心肌病患者CD4+CD25+Foxp3++細(xì)胞的檢測(cè)及意義[J].臨床心血管病雜志,2010,26(25):90-94.
[5]Cines DB,McMillan R.Pathogenesis of chronic immune thrombocytopenic purpura[J].CurrOpin Hematol,2007,14(5):511-514.
第4篇：異型淋巴細(xì)胞范文
【關(guān)鍵詞】 反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎; T細(xì)胞亞群; NK淋巴細(xì)胞; B淋巴細(xì)胞; 血清免疫球蛋白
[Abstract] Objective: To study the changes of lymphocyte subsets in peripheral blood and serum immunoglobulin of patients with reactive arthritis (ReA) and their clinical significance. Methods： CD3+T， CD4+T， CD8+T，CD16+56+NK， CD19+B positive rate (with flow cytometry) and serum IgG， IgA， IgM levels (with immunoturbidity) were measured in 56 patients with ReA and 53 normal controls. Results： Compared with the normal controls， the percentage of CD4+T lymphocyte，CD4+/CD8+ratio and CD19+B cell percentage increased significantly (P
[Key words] reactive arthritis; T lymphocyte subsets; NK lymphocyte; B lymphocyte; serum immunoglobulin
反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎(reactive arthritis， ReA)是在關(guān)節(jié)外遠(yuǎn)端部位發(fā)生微生物感染后產(chǎn)生的慢性無菌性炎癥，其病因與病原體、免疫、遺傳有關(guān)。該疾病發(fā)病機(jī)制尚未明確，目前認(rèn)為其本質(zhì)上都有抗原微生物侵入黏膜內(nèi)，而且機(jī)體免疫防御系統(tǒng)存在功能紊亂[1]。本研究采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者與健康人群外周血T淋巴細(xì)胞亞群、NK淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞百分率，采用免疫比濁法檢測(cè)血清IgA、IgG、IgM含量，觀察ReA患者體內(nèi)細(xì)胞免疫、體液免疫指標(biāo)的變化和規(guī)律，并探討其臨床意義。
1 材料和方法
1.1 材 料
1.1.1 對(duì)象 病例來源于2007年9月至2009年10月我院免疫風(fēng)濕科住院患者。診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1990年公布的Amor診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。ReA患者56例，男30例，女26例，年齡25～74歲，中位年齡53歲。正常對(duì)照組為53例本院健康體檢者，男27例，女26例，年齡17～78歲。
1.1.2 試劑 試劑均由BD公司提供，包括:熒光抗體CD3percp/CD4FITC/CD8PE;CD3FITC/CD16+CD56+PE;CD19cy5;溶血素，鞘液等。免疫球蛋白試劑盒由BEHRING 公司提供。
1.2 方 法
1.2.1 標(biāo)本采集 抽取病例組和對(duì)照組外周靜脈血1 ml，注入EDTAK2抗凝管中，室溫保存，在24 h內(nèi)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè);同時(shí)抽取4 ml靜脈血注入真空采血管中，用于檢測(cè)血清免疫球蛋白。
1.2.2 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè) 取50 μl上述抗凝血分別加入兩個(gè)試管中，一管加入10 μl熒光抗體CD3percp/CD4FITC/CD8PE;另一管加入熒光抗體CD3FITC/CD16+CD56+PE和CD19cy5各10 μl，充分混勻后避光室溫孵育20 min后，每管加入溶血素(1∶10稀釋)1 ml，避光放置至透明后1 000 r/min離心5 min，棄去上清液體，加入1 ml PBS洗滌細(xì)胞2次，最后加入500 μl PBS溶液混勻直接上流式細(xì)胞儀(德國PARTEC公司)檢測(cè)。
1.2.3 免疫球蛋白檢測(cè) 每個(gè)樣本分離出血清，在特種蛋白分析儀(德國BEHRING公司)上測(cè)定血清中IgG 、IgA、IgM的含量。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
應(yīng)用SPSS13.0處理數(shù)據(jù)，結(jié)果以±s表示， t檢驗(yàn)比較各組間差異，P
2 結(jié) 果
2.1 ReA患者的淋巴細(xì)胞亞群流式細(xì)胞儀檢測(cè)散點(diǎn)圖
采用CD3+T為總T細(xì)胞，CD3+CD4+T細(xì)胞為輔T細(xì)胞，CD3+CD8+T為抑制性T細(xì)胞，CD3-CD16+CD56+為NK細(xì)胞，CD19+為B細(xì)胞。設(shè)門分析各淋巴細(xì)胞亞群的百分比。典型檢測(cè)結(jié)果見圖1。
a為FSC和SSC的散點(diǎn)圖，R1區(qū)為淋巴細(xì)胞區(qū);b為CD3和CD4的散點(diǎn)圖，Q2區(qū)為輔T細(xì)胞(CD3+CD4+);c為CD3和CD8的散點(diǎn)圖，QA2為抑制性T細(xì)胞(CD3+CD8+);d為CD4和CD8的散點(diǎn)圖，QB4為CD4+T細(xì)胞，QB1為CD8+T細(xì)胞;e為CD3和CD19的散點(diǎn)圖，Q4為B細(xì)胞(CD19+);f為CD16+56和CD3的散點(diǎn)圖，QB1為NK細(xì)胞(CD3-CD16+56+)。
圖1 流式細(xì)胞儀檢測(cè)ReA患者外周血淋巴細(xì)胞亞群
Fig 1 Lymphocyte subsets in peripheral blood with ReA detected by flow cytometry
2.2 ReA患者的淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果
ReA患者CD4+T淋巴細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值及CD19+B淋巴細(xì)胞百分率均明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
2.3 ReA患者的免疫球蛋白檢測(cè)結(jié)果
ReA患者的血清IgG含量與正常對(duì)照組相比明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)，見表2。表2 兩組血清免疫球蛋白水平與對(duì)照組比較，b:P
3 討 論
T細(xì)胞亞群對(duì)機(jī)體免疫功能的穩(wěn)定起著重要的調(diào)節(jié)作用，尤其是輔T細(xì)胞和抑制性T細(xì)胞之間的相互協(xié)調(diào)與制約，產(chǎn)生適度的免疫應(yīng)答，使之既能清除異物抗原，又不至于損傷自身組織。CD4+T細(xì)胞為輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞(Th/Ti)，CD8+T細(xì)胞為抑制/殺傷細(xì)胞(Ts/CTL)。正常情況下CD4+和CD8+T細(xì)胞之間始終保持一恒定的比例，構(gòu)成宿主細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)的重要環(huán)節(jié)。CD4+與CD8+T細(xì)胞的平衡在抑制腫瘤、抗感染和自身免疫性疾病中起著重要作用[3]。本組資料分析了56例反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者的T淋巴細(xì)胞亞群，發(fā)現(xiàn)ReA患者CD4+T細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值明顯升高，CD3+和CD8+T細(xì)胞百分率無明顯變化，與文獻(xiàn)報(bào)道的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)及強(qiáng)直性脊柱炎(AS)結(jié)果基本一致[4，5]。這些提示反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者輔T細(xì)胞數(shù)量增多，抑制性T細(xì)胞數(shù)量相對(duì)減少，導(dǎo)致Th細(xì)胞功能亢進(jìn)，Ts細(xì)胞抑制功能相對(duì)不足，使T細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)失衡，引起細(xì)胞介導(dǎo)的免疫損傷。
免疫球蛋白是由漿細(xì)胞合成和分泌的一組能與抗原發(fā)生特異性結(jié)合的球蛋白，是免疫細(xì)胞受到病原微生物等抗原刺激后產(chǎn)生的重要免疫分子。CD19+是B淋巴細(xì)胞膜表面標(biāo)志，B細(xì)胞識(shí)別抗原后增殖分化為漿細(xì)胞，漿細(xì)胞分泌免疫球蛋白進(jìn)而介導(dǎo)體液免疫。本研究結(jié)果顯示反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎患者CD19+B細(xì)胞百分率明顯升高，血清IgG含量也升高。王喜英等[6]在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中也有類似的報(bào)道。這些表明ReA患者的體液免疫存在一定程度上的亢進(jìn)，外周血中B細(xì)胞明顯增多，免疫球蛋白表達(dá)失控，產(chǎn)生大量自身抗體，導(dǎo)致免疫病理反應(yīng)造成組織器官的損傷。
CD16+CD56+是NK細(xì)胞的標(biāo)志物，表達(dá)的量可能與NK細(xì)胞的數(shù)量或功能有關(guān)。NK細(xì)胞作為先天性免疫系統(tǒng)中的重要成分，與先天性和獲得性免疫系統(tǒng)其他成分間存在廣泛而復(fù)雜的相互關(guān)系，在機(jī)體免疫監(jiān)視過程中發(fā)揮重要功能。Ohtsuka等[7]研究表明系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者NK細(xì)胞的數(shù)量和功能較正常人低下。AzuzLiberman等[8]研究發(fā)現(xiàn)AS患者的NK細(xì)胞活性被抑制，NK細(xì)胞在AS發(fā)病機(jī)制中起作用。分析本組資料發(fā)現(xiàn)ReA患者與對(duì)照組相比，NK細(xì)胞數(shù)量明顯降低，提示ReA患者的先天性免疫存在異常，而NK細(xì)胞對(duì)T、B細(xì)胞有協(xié)調(diào)作用，同時(shí)NK細(xì)胞還能抑制B細(xì)胞的活化，調(diào)節(jié)抗體的產(chǎn)生，NK細(xì)胞的活性降低可導(dǎo)致B細(xì)胞過度增殖，因此NK細(xì)胞也參與了ReA的發(fā)病過程。
綜上所述，ReA患者體內(nèi)CD4+T細(xì)胞百分率及CD4+/CD8+比值明顯增高，B細(xì)胞及血清免疫球蛋白的水平升高，NK細(xì)胞數(shù)量明顯降低。這些免疫指標(biāo)顯示ReA患者體內(nèi)細(xì)胞免疫紊亂，體液免疫增強(qiáng)，天然免疫功能低下。故監(jiān)測(cè)ReA患者外周血淋巴亞群和免疫球蛋白有助于了解機(jī)體的免疫狀態(tài)，對(duì)于我們尋找有效方法重建免疫平衡，調(diào)節(jié)患者體內(nèi)免疫失衡狀態(tài)，治療反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎，具有一定的臨床價(jià)值。
參考文獻(xiàn)
[1] Rihl M， Klos A， Kler L， et al. Infection and musculoskeletal conditions: Reactive arthritis[J]. Best Pract Res Clin Rheumatol， 2006， 20(6): 1119-1137.
[2] Amor B， Dougados M， Mijiyawa M. Criteria of the classification of spondylarthropathies [J]. Rev Rhum Mal Osteoartic， 1990， 57(2): 85-89.
[3] Hgqvist B， Hultman P. Effects of deviating the Th2response in murine mercuryinduced autoimmunity towards a Thlresponse[J]. Clin Exp Immunol， 2003， 134(2): 202-209.
[4] 周 暉，汪楚文.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血T淋巴細(xì)胞AgNORs及T亞群變化[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2005， 20(6): 7-8.
[5] 張臘紅，陳兆軍，鄭高明，等.強(qiáng)直性脊柱炎患者HLAB27和免疫指標(biāo)檢測(cè)的臨床意義[J].放射免疫學(xué)雜志， 2007， 20(6): 582-584.
[6] 王喜英，毛少華，張小青，等. 細(xì)胞因子和淋巴細(xì)胞亞群在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中檢測(cè)的臨床意義[J].中原醫(yī)刊， 2008， 35(5): 33-34.
第5篇：異型淋巴細(xì)胞范文
【摘要】 目的 檢測(cè)胃癌細(xì)胞中T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，Tiam1)的表達(dá)及其與腫瘤侵襲、移行能力的關(guān)系，同時(shí)觀察胃癌細(xì)胞在形態(tài)學(xué)方面的變化。方法 采用層黏連蛋白黏附法，由胃癌MKN45細(xì)胞株(M0)中篩選獲得高(MH)、低(ML)黏附亞株。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Tiam1在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)，以Boyden小室法測(cè)定M0、ML、MH細(xì)胞的體外侵襲、移行能力，并分析其與Tiam1表達(dá)間的關(guān)系，同時(shí)采用蘇木精伊紅及細(xì)胞骨架蛋白染色、掃描電鏡技術(shù)觀察胃癌細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果 MH細(xì)胞的體外侵襲、移行能力及Tiam1表達(dá)均強(qiáng)于M0、ML細(xì)胞(P<0.05)，且Tiam1表達(dá)與胃癌細(xì)胞體外侵襲、移行能力呈正相關(guān)(r=0.997和1.000)；同時(shí)與M0、ML相比，MH胞體伸展，表面突起增多，片狀偽足寬厚，絲狀偽足細(xì)長(zhǎng)而密集，異型性明顯，且細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)較紊亂，斑點(diǎn)狀肌動(dòng)蛋白小體增多。但M0、ML細(xì)胞間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 Tiam1表達(dá)水平升高可能促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲、移行。這或許是通過調(diào)整胃癌細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)重組，增強(qiáng)其變形、游走能力而實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】 胃癌； T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1； 侵襲； 移行； 形態(tài)學(xué)
Correlation between invasion and migration ability of gastric cancer cells and Tiam 1
【Abstract】 Objective To investigate the expression of T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1 (Tiam1) in gastric cancer cells and its relationship with the invasion and migration ability of gastric cancer cells, and observe the morphological changes of gastric cancer cells. Methods High adhesive subgroups (MH) and low adhesive subgroups (ML) were separated from MKN45 cell strain (M0) by laminin adhesion method in vitro. The expressions of Tiam1 in M0, ML and MH cells were detected by flow cytometry, the invasion and migration ability of M0, ML and MH cells in vitro by Boyden chamber. The correlation between invasion and migration ability of M0, ML, MH cells and expression of Tiam1 in M0, ML, MH cells was analyzed. The morphological differences among M0, ML and MH cells were observed by hematoxylin eosin stain, cytoskeletal protein stain and scanning electronic microscope. Results The invasion and migration ability and the expression of Tiam1 in MH cells were higher than those in M0 and ML cells (P<0.05). The expression of Tiam1 was positively correlated with the invasion and migration ability of gastric cancer cells (r=0.997, 1.000). Compared with the M0 and ML cells, the MH cell bodies elongated with wide and thick lamellate pseudopodia, slender and intensive filamentous pseudopodia, more projections on the surface, derangement of cell skeleton and more dotlike actin bodies. There was no significant difference between M0 and ML cells (P>0.05). Conclusions The high expression level of Tiam1 may promote the invasion and migration of gastric cancer cells through adjusting the cytoskeletal reconstruction and enhancing the deforming and migration ability of gastric cancer cells.
【Key words】 Gastric cancer; T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1; Invasion; Migration; Morphology
腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移與其運(yùn)動(dòng)能力密不可分，而有效遷移行為的達(dá)成又來源于細(xì)胞內(nèi)、 外調(diào)節(jié)因子對(duì)細(xì)胞骨架動(dòng)力裝置所賦予的驅(qū)動(dòng)力以及細(xì)胞骨架成分介導(dǎo)黏附所提供錨定力間的協(xié)調(diào)運(yùn)作。T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor 1，Tiam1)正是作為重要的細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)因子， 而與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［1-3］。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)Tiam1蛋白在具有不同侵襲、 移行能力胃癌細(xì)胞中的表達(dá)， 初步探討了Tiam1表達(dá)與胃癌細(xì)胞侵襲、移行的關(guān)系，并對(duì)其細(xì)胞形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)進(jìn)行了簡(jiǎn)要分析。
1 材料與方法
1．1 主要試劑
1．3 胃癌細(xì)胞中Tiam1蛋白檢測(cè)
1．4 胃癌細(xì)胞體外侵襲、移行能力檢測(cè)
1．5 胃癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期經(jīng)胰蛋白酶消化的M0、ML和MH細(xì)胞，接種于預(yù)置有消毒蓋玻片的6孔培養(yǎng)板中，待細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)至玻片面積的60%～80%時(shí)，取出蓋玻片，分別進(jìn)行HE染色、細(xì)胞骨架染色［5］和掃描電鏡觀察。
1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
應(yīng)用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料采用單因素方差分析，均數(shù)間差別多重比較的LSD檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用雙變量間的Pearson檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2．1 Tiam1在M0、ML、MH中的表達(dá)情況
2．2 M0、ML、MH體外侵襲、移行能力比較
MH細(xì)胞跨越Boyden小室濾膜網(wǎng)孔的體外移行能力及穿透包被有Matrigel基質(zhì)的Boyden小室濾膜網(wǎng)孔的體外侵襲能力均高于M0、ML細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；但在M0和ML細(xì)胞間其體外移行及侵襲能力差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。表1 胃癌細(xì)胞體外侵襲移行能力比較(略)
2．3 Tiam1蛋白表達(dá)與胃癌細(xì)胞體外侵襲、移行能力的相關(guān)性
相關(guān)分析結(jié)果顯示，Tiam1蛋白表達(dá)強(qiáng)度與胃癌細(xì)胞M0、ML和MH的體外移行及體外侵襲能力均呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)分別為r=0.997和1.000)。
2．4 M0、ML、MH的形態(tài)學(xué)差異
3 討論
Tiam1是Dbl(diffuse Bcell lymphoma oncogene family)家族成員，可作為小G蛋白R(shí)ho的特異性鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子，促使其向活化狀態(tài)轉(zhuǎn)變，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)重組與形體極化，促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和遷移［6］。通常Tiam1除在人大腦和組織中表達(dá)外，在其他正常組織中不表達(dá)或僅呈低度表達(dá)。近年的研究表明，Tiam1在T/B細(xì)胞淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞中呈陽性表達(dá)，且與其侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)［1-3］。
我們的研究已證實(shí)Tiam1在胃癌組織中呈高表達(dá)，且與其侵襲轉(zhuǎn)移等病理生物學(xué)行為密切相關(guān)［7］。本實(shí)驗(yàn)則借助“層黏連蛋白黏附法”，由人胃低分化管狀腺癌來源的MKN45細(xì)胞株(M0)中，篩選獲得起源相同但表型有異的高、低黏附亞株(MH和ML)［4］。經(jīng)Boyden小室檢測(cè)發(fā)現(xiàn)， MH細(xì)胞的體外侵襲、 移行能力均強(qiáng)于M0、 ML細(xì)胞(P<0.05)，但在M0、ML細(xì)胞間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Tiam1蛋白在MH細(xì)胞中的表達(dá)也強(qiáng)于其在M0、ML細(xì)胞中的表達(dá)(P<0.05)，但在M0、ML細(xì)胞間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。進(jìn)1步的相關(guān)分析顯示，Tiam1 蛋白表達(dá)水平與M0、ML、MH細(xì)胞的體外侵襲、移行能力成正相關(guān)。上述結(jié)果提示，Tiam1表達(dá)水平升高可能促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲、移行。
已知腫瘤細(xì)胞中常發(fā)生微管解聚、微絲束及其末端的膜黏著斑破壞，應(yīng)力纖維網(wǎng)架結(jié)構(gòu)紊亂，肌動(dòng)蛋白聚集、重排，出現(xiàn)大量點(diǎn)狀或短樹根樣的肌動(dòng)蛋白小體，使胞體剛性降低，順應(yīng)性增強(qiáng)，易于在組織中變形、游走，且在高侵襲轉(zhuǎn)移細(xì)胞的膜表面突起和偽足較多，更利于其運(yùn)動(dòng)與侵襲［8-9］。本實(shí)驗(yàn)中HE染色顯示，MH細(xì)胞較M0、ML細(xì)胞異型性大，形態(tài)不規(guī)則更加明顯。在掃描電鏡下觀察可見，MH細(xì)胞形體延展性好，胞膜表面突起或皺褶增多，片狀偽足寬厚，絲狀偽足長(zhǎng)且密集。進(jìn)1步經(jīng)細(xì)胞骨架染色顯示，MH細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)較M0、ML細(xì)胞略顯紊亂，肌動(dòng)蛋白小體增多，使其形體順應(yīng)性增強(qiáng)，從而易于在組織中變形和游走?？傊?，所有這些胃癌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)上的差異可能恰好反映了其侵襲、移行等生物學(xué)行為的不同。
近期研究顯示，Tiam1既可通過調(diào)節(jié)整合素α3β1介導(dǎo)的層黏連蛋白5分泌與沉積，進(jìn)而影響角質(zhì)形成細(xì)胞的形體延展與移行［10］，還可通過分子結(jié)構(gòu)中PHnCCEx功能域與CD44V3單體耦聯(lián)，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞與胞外基質(zhì)成分透明質(zhì)酸的結(jié)合，促進(jìn)其侵襲、轉(zhuǎn)移［11］。因此，有關(guān)Tiam1如何影響胃癌細(xì)胞侵襲移行及其形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)的相關(guān)機(jī)制，值得深入探討。
【參考文獻(xiàn)】
［4］陳向榮,任衛(wèi)平,童菊芳,等.粘附法篩選胃癌細(xì)胞亞株.胃腸病學(xué),2000,5(2):116-118，136.
［8］Lleonart ME, MartinDuque P, SanchezPrieto R, et al. Tumor heterogeneity: morphological, molecular and clinical implications. Histol Histopathol,2000,15(3):881-898.
第6篇：異型淋巴細(xì)胞范文
【關(guān)鍵詞】 急性胰腺炎； 中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值； 血液； 診斷
中圖分類號(hào) R657 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2015）24-0011-02
Prognostic Values of NLR in Patients with Acute Pancreatitis/ZHANG Ming，ZHOU Zhi-guo，HUANG Jin-ye.//Chinese and Foreign Medical Research，2015，13（24）：11-12
【Abstract】 Objective：To explore the changes and prognostic values of neutrophil-to-lymphocyte rate（NLR） in patients with acute pancreatitis（AP）.Method：The data of 46 patients with AP who were treated in our hospital were retrospectively analysed.To analyze their changes of neutrophil， lymphocyte and NLR.The receiver operating characteristic（ROC） curve was drawn and the area under curve（AUC） was compared.In addition，30 cases age-，gender-，body mass index（BMI）-matched healthy subjects（negative control group） were set up.Result：The NLR in AP group were higher than those in negative control group（P
【Key words】 Acute pancreatitis； Neutrophil-to-lymphocyte rate； Blood； Diagnosis
First-author’s address：The Health Center of Jiuli Town of Ganyu District in Lianyungang City，Lianyungang 222100，China
doi：10.14033/ki.cfmr.2015.24.006
急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是胰酶在胰腺內(nèi)被激活引起胰腺及周圍組織自身消化的化學(xué)性炎癥，是普外科、消化內(nèi)科常見病和多發(fā)病[1]。臨床上將急性胰腺炎分為輕型急性胰腺炎（mild acute pancreatitis，MAP）和重癥急性胰腺（severe acute pancreatitis， SAP）。MAP病情輕，治療效果好，預(yù)后良好。SAP病情重、并發(fā)癥多、病死率高[2]。如能在治療前對(duì)AP病情進(jìn)行預(yù)先判斷，從而選擇合適的治療方案，有著極其重要的臨床意義。已有研究證實(shí)，中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值（neutrophil-to-lymphocyte rate，NLR）與AP病情有明顯的相關(guān)性[3]，但采用NLR對(duì)AP病情預(yù)測(cè)的研究較少。本研究通過回顧性分析筆者所在醫(yī)院收治的46例AP患者的臨床資例，探討NLR對(duì)AP病情的預(yù)測(cè)價(jià)值，旨在為臨床診斷與治療決策提供參考。
1 資料與方法
1.1 一般資料
收集2012年1月-2014年12月筆者所在醫(yī)院普外科收治的46例AP住院患者，其中男26例，女20例；年齡21～67歲，平均（42.47±13.32）歲；病因?yàn)槟懺葱砸认傺?3例，酒精性胰腺炎13例。所有病例均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)外科學(xué)會(huì)胰腺外科學(xué)組制訂的急性胰腺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]，發(fā)病時(shí)間在24 h以內(nèi)，近期無嚴(yán)重感染，無血液系統(tǒng)疾病史，無嚴(yán)重心肝腎疾病及。另將同期年齡、性別與體重指數(shù)相匹配的健康體檢者作為陰性對(duì)照組，并證實(shí)近期無嚴(yán)重感染、無血液系統(tǒng)疾病及嚴(yán)重心肝腎疾病史；其中男17例，女13例；年齡20～68歲，平均（40.98±15.45）歲。兩組研究對(duì)象性別、年齡、體重指數(shù)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。以Ranson評(píng)分≥3分診斷為SAP[5]，反之，則為MAP。
1.2 觀察指標(biāo)
收集AP患者入院時(shí)、第4天、第7天和陰性對(duì)照組體檢時(shí)的血常規(guī)資料，根據(jù)其中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞數(shù)值計(jì)算出NLR。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
所得數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較進(jìn)行兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)（符合方差齊性、正態(tài)性分布）；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（n）表示；繪制受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線并進(jìn)行ROC曲線分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P
2 結(jié)果
2.1 患者的預(yù)后情況
46例AP患者中，MAP35例，SAP11例。
2.2 入院時(shí)AP患者與陰性對(duì)照組的NLR比較
與陰性對(duì)照組（3.97±0.94）相比，AP組入院時(shí)NLR （9.67±3.16）明顯高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=17.76，P
2.3 SAP組和MAP組患者NLR比較
與MAP組（5.69±1.64）相比，SAP組的NLR（15.42±5.94）水平顯著高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=11.40，P
2.4 NLR預(yù)測(cè)AP病情的ROC曲線分析
以SAP組為陽性組，MAP組為陰性組，構(gòu)建ROC曲線（圖1）。由圖1可見，曲線下面積（area under curve，AUC）為0.842（95%CI：0.709～0.956），面積標(biāo)準(zhǔn)誤為0.063，以NLR值判斷AP病情有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）；以靈敏度和特異度之和最大值所對(duì)應(yīng)的NLR值為截?cái)帱c(diǎn)，即NLR值>12.38可預(yù)測(cè)AP病情。
圖1 預(yù)測(cè)AP病情的ROC曲線
注：以靈敏度（Sensitivity）為縱軸，以1-特異度（1-Specificity）為橫軸的ROC曲線，AUC為0.842（95%CI：0.709～0.956），面積標(biāo)準(zhǔn)誤為0.063，以NLR預(yù)測(cè)AP病情有顯著意義（P=0.001）
3 討論
AP是多種原因引起的急性全身性復(fù)雜的炎癥[6-7]，是普外科、消化內(nèi)科常見病和多發(fā)病。AP發(fā)作時(shí)，胰腺腺泡內(nèi)的白細(xì)胞（中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞）、單核巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等是炎癥反應(yīng)的主要效應(yīng)細(xì)胞[8]，因此，以往多將白細(xì)胞總數(shù)作為AP病情判定的指標(biāo)，但白細(xì)胞總數(shù)易受理化等多種因素的影響，靈敏度和特異度均不高，從而影響其對(duì)AP病情的判斷。由于缺乏AP的早期判斷指標(biāo)，不能將SAP早期識(shí)別，及早干預(yù)，從而延誤了SAP的最佳治療時(shí)機(jī)。因此，尋找更有效判定AP病情的指標(biāo)具有極其重要的臨床意義。已有研究證實(shí)，NLR較白細(xì)胞更能預(yù)測(cè)AP患者入住重癥監(jiān)護(hù)病房及入院天數(shù)[3]，因此有作者推測(cè)NLR能特異地反映各種AP患者的胰腺損傷及恢復(fù)過程，可作為預(yù)測(cè)AP患者胰腺損傷的可靠指標(biāo)之一[9]。
本組資料顯示，AP患者入院時(shí)NLR顯著高于陰性對(duì)照組，根據(jù)病情變化SAP患者可出現(xiàn)高值持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)且下降緩慢，而MAP患者出現(xiàn)持續(xù)時(shí)間較短且下降較快。究其原因可能是因?yàn)锳P患者的中性粒細(xì)胞在各種炎癥因子的作用下被激活從而在AP的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用[10]，而胰腺發(fā)生炎癥時(shí)中性粒細(xì)胞可表達(dá)多種抗凋亡蛋白，從而延遲中性粒細(xì)胞凋亡[11-12]。因此，高值持續(xù)時(shí)間較短且下降較快表明胰腺損害輕微；高值持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)且下降緩慢表明胰腺損害較重或發(fā)生了繼發(fā)性損害，這類患者SAP發(fā)生率高。本組資料中，SAP患者入院時(shí)NLR顯著高于未發(fā)生MAP組患者，提示NLR可預(yù)測(cè)SAP的發(fā)生，這為早期干預(yù)提供了客觀依據(jù)。另外，作者通過ROC曲線對(duì)NLR在預(yù)測(cè)AP病情的價(jià)值進(jìn)行了研究，結(jié)果表明NLR的AUC為0.842（95%CI：0.709～0.956），面積標(biāo)準(zhǔn)誤為0.063，以NLR判斷AP病情有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001），NLR>12.38可預(yù)測(cè)SAP的發(fā)生。
參考文獻(xiàn)
[1]向瑞清.體質(zhì)指數(shù)、血清甘油三酯及C肽水平與急性胰腺炎病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2014，12（30）：12-13.
[2]曲春雪.急性胰腺炎反復(fù)發(fā)作20例原因探討[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（35）：130.
[3] Azab B，Jaglall N，Atallah J P，et al.Neutrophil-lymphocyte ratio as a predictor of adverse outcomes of acute pancreatitis[J].Pancreatology，2011，11（4）：445-452.
[4]中華醫(yī)學(xué)會(huì)外科學(xué)會(huì)胰腺外科學(xué)組.急性胰腺炎臨床診斷及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[J].中華外科雜志，1997，35（12）：773-775.
[5] Toouli J，Brooke-Smith M，Bassi C，et al.Guidelines for the management of acute pancreatitis[J].J Gastroenterol Hepatol，2002，17（Suppl）：S15-39.
[6]彭晟.急性胰腺炎患者血清TNF-α水平檢測(cè)的臨床意義[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（5）：31-32.
[7]李紹軍，張翠生，孫世杰，等.急性胰腺炎早期IL-6的動(dòng)態(tài)變化及其臨床意義[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014，11（1）：8-10.
[8]余賢恩.中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值對(duì)急性胰腺炎嚴(yán)重性的預(yù)測(cè)價(jià)值[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2012，21（6）：574-577.
[9]胡秦妮，張玉琴，鄧芝云，等.中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值預(yù)測(cè)急性胰腺炎嚴(yán)重程度的意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（23）：3119-3121.
[10]李俊，劉震，李曉東，等.外周血中性粒細(xì)胞凋亡與急性胰腺炎的關(guān)系探討[J].四川醫(yī)學(xué)，2009，30（3）：301-303.
[11]朱樹養(yǎng)，陳衛(wèi)昌，蔡篤雄.重癥急性胰腺炎外周血中性粒細(xì)胞凋亡及其調(diào)控機(jī)制的研究[J].胰腺病學(xué)，2006，6（5）：277-280.
第7篇：異型淋巴細(xì)胞范文
基金項(xiàng)目：湖南省衛(wèi)生計(jì)生委2015年度科研計(jì)劃課題項(xiàng)目（編號(hào)B2015-159）；株洲市年度醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域指導(dǎo)性計(jì)劃（編號(hào)2014YW01）
復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RSA）是指妊娠20周前連續(xù)自然流產(chǎn)3次及3次以上者，是臨床上常見的妊娠并發(fā)癥。在育齡婦女中的發(fā)病率約為1%～5%[1]。引起復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的因素很多，如遺傳因素、子宮病變、內(nèi)分泌失調(diào)、自身免疫性疾病等是較確定的原因[2]。另外，還有占50%左右的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，目前病因還沒有明確，而其中40%～60%原因不明的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是由免疫方面的因素引起的，其中封閉抗體不足就是導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)鍵免疫因素。
現(xiàn)今，選擇淋巴細(xì)胞免疫治療該疾病已經(jīng)成為關(guān)注的焦點(diǎn)。通常是采用丈夫的外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行主動(dòng)免疫治療，可以取得良好的療效。然而，有時(shí)受女方丈夫患有傳染性疾病或其他因素影響，丈夫外周血不能用時(shí)這一治療方法就受到了限制。本研究主要是采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴細(xì)胞對(duì)患復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女方進(jìn)行主動(dòng)免疫治療，與采用丈夫外周血中淋巴細(xì)胞進(jìn)行主動(dòng)免疫治療進(jìn)行對(duì)比，觀察其治療效果。以尋求一種新的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的有效治療方法。
1 資料與方法
1.1 研究對(duì)象
選擇在本院生殖中心門診確診的RSA患者114例，由于丈夫患有傳染性疾病或其他因素影響只能采用丈夫以外的男性（第三方）外周血的56例，作為觀察組。采用丈夫外周血的58例作為對(duì)照組。女方平均年齡29歲，平均自然流產(chǎn)5（3～8）次，所有患者均符合以下條件：1）早期自然流產(chǎn)史≥2次；2）抗體ASAb、EmAb、ACA等自身抗體均陰性；3）內(nèi)分泌檢查正常，無黃體功能不足；4）封閉抗體（BA）陰性；5）雙方行TORCH、衣原體、支原體等檢查均為陰性；6）夫婦雙方無家族遺傳病史；7）男方分析正常；8）治療前3個(gè)月未經(jīng)過任何免疫治療；9）夫妻雙方對(duì)淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫療法有充分的了解，并簽署知情同意書，均排除生殖道畸形和形態(tài)學(xué)異常。
供血者篩查：在進(jìn)行主動(dòng)免疫治療前，對(duì)供血者進(jìn)行常規(guī)檢查，已排除疾病血行感染的潛在可能。同時(shí)對(duì)患者進(jìn)行知情談話，告知主動(dòng)免疫治療存在的風(fēng)險(xiǎn)，簽署知情同意書。
1.2 研究方法
無菌條件下抽取患者丈夫或第三方男性外周血20mL，加入肝素鈉10m、生理鹽水10mL混勻，靜置30min，經(jīng)淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞，然后吸取富含淋巴細(xì)胞的白膜層，加入適量生理鹽水洗滌2次，將淋巴細(xì)胞濃度調(diào)整為（20～40）×106mL-1，于患者前臂內(nèi)側(cè)分4～6點(diǎn)皮內(nèi)注射，間隔3周注射1次（避開月經(jīng)期），3次為1個(gè)療程。第1個(gè)療程結(jié)束后2周，復(fù)查封閉抗體，如果轉(zhuǎn)陽者，鼓勵(lì)患者盡快受孕，妊娠后再繼續(xù)免疫治療12～14周，B超檢查提示胎兒正常則停止治療。同時(shí)囑咐患者妊娠后注意休息，保持情緒穩(wěn)定。療程結(jié)束后未妊娠者，每3個(gè)月加強(qiáng)1次。
1.3 觀察指標(biāo)
對(duì)兩組患者的CD4+、CD25+、Tr 表達(dá)率進(jìn)行比較，同時(shí)將妊娠超過12周者視為妊娠成功，比較兩組妊娠成功率。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩樣本均數(shù)比較采用。針對(duì)計(jì)數(shù)資料和組間對(duì)比展開t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)，在P
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1 治療前后兩組患者的 CD4+、CD25+、Tr表達(dá)率比較
治療前后兩組患者的CD4+、CD25+、Tr表達(dá)率經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，觀察組和對(duì)照組治療前后患者的CD4+、CD25+、Tr表達(dá)率之間均存在顯著差異（P
2.2 妊娠成功率
統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，觀察組患者妊娠成功率為 94.4%，對(duì)照組妊娠成功率為 93.1%。二者之間無顯著差異 （P>0.05），詳見表2。
3 討論
復(fù)發(fā)性流產(chǎn)給患者本人以及家庭帶來諸多生理以及心理上的問題?，F(xiàn)階段，針對(duì)原因不明性復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的流行病學(xué)、病因?qū)W、生殖免疫學(xué)等諸多研究為臨床對(duì)該病的治療提供了有利的依據(jù)。然而，至今還未有一個(gè)相對(duì)統(tǒng)一的方案[3]。經(jīng)現(xiàn)代免疫學(xué)研究指出，人類胚胎的形成過程為一個(gè)同種半移植的過程，胎兒中來自父親的那一半基因抗原針對(duì)孕婦而言為一種外來異物，所以會(huì)受到母體的明顯排斥。在正常妊娠過程中，為了對(duì)抗排斥能夠保證胚胎的繼續(xù)生存，一般母體會(huì)產(chǎn)生封閉抗體現(xiàn)象，若是封閉抗體缺乏后，胚胎則會(huì)受到來自母體血中殺傷細(xì)胞的有力攻擊， 最終引起流產(chǎn)的發(fā)生[4]。
主動(dòng)免疫治療的主要機(jī)制，是應(yīng)用淋巴細(xì)胞誘發(fā)患者產(chǎn)生對(duì)妊娠起保護(hù)作用的阻斷性抗體，即封閉抗體。當(dāng)妻子再次受孕時(shí)這些封閉抗體就能識(shí)別胚胎來自配偶的抗原并與之結(jié)合繼而產(chǎn)生封閉作用可使胚胎得到保護(hù)并生長(zhǎng)發(fā)育從而有利于妊娠成功[5][6]。另外，主動(dòng)免疫治療還可提高妻子的免疫反應(yīng)性使妻子體內(nèi)的封閉抗體形成增多保護(hù)胎兒不易受母體免疫系統(tǒng)排斥。
主動(dòng)免疫治療可提高不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的再次妊娠成功率，其方法簡(jiǎn)單、有效且有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。然而，當(dāng)受女方丈夫患有傳染性疾病或其他因素影響，丈夫外周血不能用時(shí)這一治療方法就受到了限制。本研究主要是采用丈夫以外的男性（第三方）外周血中淋巴細(xì)胞對(duì)患復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女方進(jìn)行主動(dòng)免疫治療，與采用健康的丈夫外周血中淋巴細(xì)胞進(jìn)行主動(dòng)免疫治療相對(duì)比，觀察其治療效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)采用丈夫以外的男性（第三方）外周血（實(shí)驗(yàn)組）和采用丈夫外周血（對(duì)照組）治療前后患者的CD4+、CD25+、Tr表達(dá)率之間均存在顯著差異（P0.05）。
4 結(jié)論
綜上所述，主動(dòng)免疫治療可提高不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的再次妊娠成功率，其方法簡(jiǎn)單、有效且有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。當(dāng)受女方丈夫患有傳染性疾病或其他因素影響，丈夫外周血不能用時(shí)，采用丈夫以外的健康男性（第三方）外周血中淋巴細(xì)胞對(duì)患復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女方進(jìn)行主動(dòng)免疫治療同樣效果顯著。
參考文獻(xiàn)：
[1]Kuon RJ，Wallwiener LM，Germeyer A，et al.Establishment of a standardized immunological diagnostic procedure in RM patients[J].J Reprod Immunol，2012，94（ 1）： 55.
[2]Rai R，Regan L.Recurrent miscarriage[J].Lancet，2006，368 （ 9535）： 601-611.
[3] 林其德.復(fù)發(fā)性流產(chǎn)免疫學(xué)診斷和治療共識(shí)[J].生殖醫(yī)學(xué).2008，2（17）：1.
[4] 徐嵐，張新能等.細(xì)胞免疫功能的變化與原因不明習(xí)慣性流產(chǎn)的關(guān)系[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2010，22（5）：349-351.
第8篇：異型淋巴細(xì)胞范文
患兒,男,3歲,因雙下肢無力3個(gè)月、發(fā)熱伴右踝關(guān)節(jié)腫痛1天,于2009年7月10日入院。入院查體:T 38.7℃,R 30次/分,P 135次/分,BP 105/70mmHg,神志清,右踝關(guān)節(jié)處皮膚可見2處2cm×2cm～3cm×3cm色素沉著斑,右踝關(guān)節(jié)腫脹,有觸痛,皮溫高,咽無充血,心肺腹部未見異常,肝脾肋下未及,淺表淋巴結(jié)未觸及腫大,肌力雙上肢V級(jí),雙下肢I(xiàn)V級(jí),肌張力正常,雙側(cè)腱反射亢進(jìn),病理征陰性。入院查血常規(guī)示:WBC 5.02×109/L,N 0.303,L 0.657,Hb 115g/L,PLT 119×109/L,血片染色檢查可見少許幼稚細(xì)胞;肝功:ALT 110U/L,AST 70U/L;X-ray:右踝關(guān)節(jié)諸骨未見骨質(zhì)異常,關(guān)節(jié)腫脹;MRI腰椎平掃未見異常;腦脊液檢查均未見異常;EB病毒、巨細(xì)胞病毒、柯薩奇病毒、單純皰疹病毒、支原體、衣原體均陰性;抗核抗體、抗雙鏈DNA、抗心磷脂抗體、ENA譜陰性?？紤]脊髓病變,給予營養(yǎng)神經(jīng)、保肝及抗感染治療后6天,患兒體溫正常,關(guān)節(jié)腫痛消失,但熱退5天后又發(fā)熱,體溫最高達(dá)40℃,查血常規(guī):WBC 3.4×109/L,L 0.785,Hb 103g/L,PLT 117×109/L;肝功:ALT 70U/L,AST 60U/L。以后患兒持續(xù)高熱不退,血常規(guī)示三系進(jìn)行性下降。于2009年7月24日、7月27日2次做骨穿經(jīng)髂后上棘多次多部位穿刺均抽取困難,取材不佳,骨髓增生低下。均未見有核紅細(xì)胞及巨核細(xì)胞,第1次淋巴細(xì)胞占97%,均為成熟型,第2次有核細(xì)胞全為淋巴細(xì)胞,多為成熟型,少數(shù)有核染色質(zhì)聚集不明顯。28日查血常規(guī):WBC 1.3×109/L,L 0.717,Hb 75g/L,PLT 74×109/L;于7月29日又行骨髓穿刺,骨髓像示:骨髓增生低下-活躍,蘭狀細(xì)胞多見,占50%～90%,有核細(xì)胞全為淋巴細(xì)胞,其中原幼細(xì)胞占47%,此類細(xì)胞胞體規(guī)則,多呈圓形,胞核凹凸不平,核染色質(zhì)疏松,核仁不明顯,漿量少,有細(xì)小顆粒。POX(-)。符合低增生性急性淋巴細(xì)胞白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。流式細(xì)胞免疫分型報(bào)告示:骨髓中異常細(xì)胞占43.67%,細(xì)胞分化較差,CD 34部分陽性,HLA-DR陽性。主要表達(dá)CD 10、CD 20、CD 19、CD 22、cCD 79a等B淋巴細(xì)胞免疫標(biāo)志,CD 10/CD 19雙陽性細(xì)胞占77.28%。支持急淋的診斷?；純悍艞壷委煶鲈骸?/p>
討 論
低增生性急性白血病臨床少見,發(fā)生率占5%～10%,多見于中老年人,常無肝脾和淋巴結(jié)腫大,類似再生障礙性貧血和骨髓增生異常綜合征的表現(xiàn)。常以頭暈、心悸、氣短等貧血癥狀最為多見,皮膚黏膜常輕中度出血,少數(shù)以發(fā)熱感染為臨床特征,且以髓系多見。急性淋巴細(xì)胞白血病極為少見,故易誤診,預(yù)后差,常合并感染致死[2]。本例患兒以關(guān)節(jié)無力入院,可能是患兒太小關(guān)節(jié)疼痛無法表達(dá),表現(xiàn)為關(guān)節(jié)無力,無法站穩(wěn)。且入院時(shí)三系正常,后出現(xiàn)發(fā)熱及全血細(xì)胞進(jìn)行性下降,應(yīng)排除感染所致的全血細(xì)胞減少,應(yīng)引起臨床醫(yī)生的重視。經(jīng)多方面檢查符合國內(nèi)、國外Nagal等提出的低增生型急性淋巴細(xì)胞白血病(HAL)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。
參考文獻(xiàn)
1 張之男.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn).北京:科學(xué)出版社,2008:122-123.
第9篇：異型淋巴細(xì)胞范文
[關(guān)鍵詞] 益腎康顆粒；慢性移植腎腎??；T淋巴細(xì)胞亞群
[中圖分類號(hào)] R692.3 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2013）03（a）-0107-03
腎移植受者出現(xiàn)的排斥反應(yīng)、感染是術(shù)后最常見的并發(fā)癥，其次是服用免疫抑制劑造成的肝腎功能損害，其結(jié)局是引起慢性移植腎腎?。–AN），往往造成移植腎失功，嚴(yán)重影響移植者/腎的長(zhǎng)期存活。因此，腎移植術(shù)后并發(fā)癥的預(yù)防尤為重要，而減少并發(fā)癥的關(guān)鍵在于調(diào)節(jié)患者的免疫狀態(tài)，T淋巴細(xì)胞亞群的水平能夠反應(yīng)機(jī)體的免疫狀態(tài)。本研究采用中藥益腎康顆粒（由積雪草、川芎、生白芍等組成）治療CAN，并觀察T淋巴細(xì)胞亞群的變化，以明確益腎康顆粒對(duì)CAN患者免疫狀態(tài)的影響。
1 資料與方法
1.1 一般資料
以河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2009年8月～2012年3月門診及住院CAN患者120例為研究對(duì)象，其中，男84例，女36例，平均年齡41.2歲。將120例患者分為益腎康大劑量組（益腎康組）、標(biāo)準(zhǔn)免疫抑制劑治療組（對(duì)照組）。益腎康組79例，男57例，女22例，平均年齡41.3歲，腎移植術(shù)后6～81個(gè)月；對(duì)照組41例，男28例，女13例，平均年齡40.6歲，術(shù)后6.5～72個(gè)月。兩組患者性別、年齡、病程及用藥前各項(xiàng)指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。
入組標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～60歲的腎移植患者，且在6個(gè)月后發(fā)生血肌酐（Cr）異常升高，復(fù)查仍證實(shí)133 μmol/L
排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床表現(xiàn)和病理穿刺符合急性排斥反應(yīng)；②急性CsA或FK506中毒；③彩超排除尿路梗阻以及腎動(dòng)脈狹窄等病變所致的腎功能損害；④血Cr>400 μmol/L；⑤過敏體質(zhì)，或?qū)Χ喾N藥物過敏者；⑥因各種原因不合作，不能堅(jiān)持用藥者。
1.2 方法
所有患者術(shù)后常規(guī)應(yīng)用CsA或FK506+嗎替麥考酚酯（MMF）+強(qiáng)的松三聯(lián)免疫抑制方案治療。益腎康組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用益腎康顆粒30 g/d，共治療12周。對(duì)照組除不給予益腎康顆粒外，其余治療及療程均與治療組相同。兩組治療期間未加入任何對(duì)腎功能有影響的藥物，不注射促紅細(xì)胞生成素，根據(jù)病情變化及血藥濃度情況進(jìn)行動(dòng)態(tài)調(diào)整CsA、FK506等免疫抑制劑用量，按時(shí)記錄各項(xiàng)觀察指標(biāo)。所有患者對(duì)治療方案均知情同意。
1.3 觀察指標(biāo)
治療前及治療后第4、8、12周后，兩組病例均抽靜脈血2 mL，EDTA抗凝，外周血CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞亞群的檢測(cè)采用三色流式細(xì)胞術(shù)。應(yīng)用美國BD公司Cell Quest軟件分析T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+計(jì)數(shù)，計(jì)算出每例CD4+/CD8+的比例，血液生化、血常規(guī)、CSA/FK506血濃度、尿常規(guī)，每人每次填寫自制觀察項(xiàng)目登記表，以利統(tǒng)計(jì)。治療過程中詳細(xì)觀察、記錄藥物的不良反應(yīng)，比較各項(xiàng)指標(biāo)的變化。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 兩組治療前后外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平比較
治療前兩組患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平均較低，其水平相近，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；，治療前后T淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+的比例比較，益腎康組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.05），對(duì)照組患者治療后各指標(biāo)雖有上升，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P > 0.05）；與對(duì)照組比較，益腎康組各指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；益腎康組間比較差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；各組第4、8、12周間比較，益腎康組各指標(biāo)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），而對(duì)照組無明顯差異（P > 0.05）。見表1。
2.2 不良反應(yīng)
治療組有l(wèi)例患者在用藥過程中訴腹脹、食欲減退，但程度較輕，未見肝功能異常者，不影響治療。其余患者未見嚴(yán)重的不良反應(yīng)。
3 討論
CAN的臨床特征為進(jìn)行性移植腎功能減退，伴有高血壓、蛋白尿；組織學(xué)上將移植腎呈現(xiàn)出間質(zhì)纖維化、腎小管萎縮等特點(diǎn)的各種非特異性病理改變定義為CAN[1]。免疫學(xué)和非免疫學(xué)因素均能引起CAN，而CAN的最終結(jié)局是導(dǎo)致移植腎功能衰竭而回歸透析，是影響移植腎遠(yuǎn)期功能的重要因素[2]。排斥和感染是腎移植后常見的并發(fā)癥，通常會(huì)誘發(fā)CAN，而抗排斥和感染是一對(duì)不可避免的矛盾，了解機(jī)體的免疫狀態(tài)則能夠很好地解決這個(gè)矛盾。CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞是具有重要功能的T淋巴細(xì)胞亞群，可以反映機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)；CD4+/CD8+比值為免疫調(diào)節(jié)標(biāo)志，在一定程度上反映機(jī)體細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能[3]。因此，T細(xì)胞亞群是反應(yīng)機(jī)體免疫狀態(tài)的敏感指標(biāo)。
近年來，中藥制劑逐步應(yīng)用到CAN的治療[4]，但目前尚缺乏中醫(yī)藥在CAN治療中的系統(tǒng)研究。益腎康顆粒由積雪草、川芎、生白芍等組成，為我院張翥教授的經(jīng)驗(yàn)名方，在慢性腎臟?。╟hronic kidney disease，CKD）患者蛋白尿和慢性腎功能不全患者的治療中取得較滿意效果?，F(xiàn)代藥理表明，方中生白芍具有雙向調(diào)節(jié)免疫、抗炎、抗應(yīng)激、鎮(zhèn)痛、保肝等作用，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于自身免疫性疾病的治療[5]；川芎可改善微循環(huán)，抗氧化及抗纖維化，抑制腎系膜細(xì)胞增殖，并有效提高慢性腎功能不全患者肌酐清除率等作用[6]，其提取物川芎嗪可顯著抑制T淋巴細(xì)胞活化和增殖[7]；積雪草提取物對(duì)ConA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用，可顯著抑制G0/G1期細(xì)胞向S和G2/M期轉(zhuǎn)化，并能降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平，抑制白介素2（IL-2）和γ干擾素（IFN-γ）轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，從而阻滯淋巴細(xì)胞進(jìn)入S期，起到免疫抑制的作用[8]；有研究提示，積雪草能夠抑制間質(zhì)細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrixc，ECM）和成纖維細(xì)胞生成，防止粘連發(fā)生，緩解粘連形成[9]。既往研究證實(shí)[10-12]，益腎康顆粒中的主要組分積雪草可降低單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎結(jié)締組織生長(zhǎng)因子（CTGF）、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）的表達(dá)，并可通過直接抑制體外培養(yǎng)的腎小管上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）的表達(dá)，維持骨形成蛋白（BMP-7）的表達(dá)，減輕腎小管間質(zhì)的損傷，發(fā)揮抗腎間質(zhì)纖維化作用。益腎康顆粒的上述藥理作用是治療CAN和影響CAN患者T淋巴細(xì)胞亞群的理論基礎(chǔ)。益腎康顆粒是復(fù)合制劑，藥物之間具有協(xié)同和拮抗的作用，發(fā)揮了多種成分、多個(gè)靶點(diǎn)作用，藥物之間的相互作用共同調(diào)節(jié)著機(jī)體的免疫狀態(tài)。
本組資料顯示，在常規(guī)免疫抑制治療的情況下，益腎康組CD3+、CD4+、CD8+計(jì)數(shù)及CD4+/CD8+的比例較治療前有不同程度的上升，且呈劑量、時(shí)間依賴關(guān)系，說明益腎康顆粒可以提高T淋巴細(xì)胞亞群的水平，提高機(jī)體的免疫狀態(tài)，減少腎移植術(shù)后的感染機(jī)會(huì)，從而對(duì)抗排斥治療和感染的矛盾起到關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用，同時(shí)在一定程度上阻止了誘發(fā)CAN發(fā)生的危險(xiǎn)因素，改善移植腎的長(zhǎng)期預(yù)后，并減少感染的發(fā)生率，且無嚴(yán)重不良反應(yīng)。因此，益腎康顆粒對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群的影響為防治CAN提供了新的思路和理論依據(jù)。然而，益腎康顆粒調(diào)節(jié)CAN患者免疫狀態(tài)的機(jī)制尚需更深入的研究。
[參考文獻(xiàn)]
[1] Colvin RB. Chronic Allograft Nephropathy [J]. N Engl J Med，2003，349（24）：2288-2290.
[2] Womer KL，Vella JP，Sayegh MH. Chronic allograft dysfunction：mechanisms and approaches to therapy [J]. Semin Nephrol，2000，20（2）：126-147.
[3] 趙宏圖，孫曉慧，李夢(mèng)娟，等.慢性蕁麻疹患者特異性IgE和T淋巴細(xì)胞檢測(cè)[J].天津醫(yī)藥，2005，33（9）：558-559.
[4] 金鐘大，陳江華.中醫(yī)藥在腎移植臨床中的應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)研究概況[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2003，23（7）：558-560.
[5] ，栗占國.白芍總苷的藥理作用及其在自身免疫性疾病中的應(yīng)用[J].國新藥與臨床雜志，2003，22（11）：687-690.
[6] 阮建平，溫國賢，付康才，等.川芎嗪治療腎移植術(shù)后早期少尿的療效觀察[J].中原醫(yī)刊，2006，3（8）：33-34.
[7] 張濤，趙蕊，柳朝陽，等.川芎嗪對(duì)T淋巴細(xì)胞活化增殖的影響[J].中國老年學(xué)雜志，2009，29（7）：1658-1659.
[8] 龔靜青，李菁，朱偉杰.積雪草提取物對(duì)脾淋巴細(xì)胞周期及細(xì)胞內(nèi)游離鈣的影響[J].中國病理生理雜志，2011，27（4）：739-742.
[9] 潘姝，利天增，李葉揚(yáng)，等.積雪草苷對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖與Smad信號(hào)通路的影響[J].中國修復(fù)重復(fù)建外科雜志，2004，18（4）：291-294.
[10] 張翥，趙麗，王斌，等.積雪草顆粒對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎組織結(jié)締組織生長(zhǎng)因子表達(dá)的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2008，9（2）：118-120.
[11] 張翥，王鎖剛，王斌，等.積雪草顆粒對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎組織α-平滑肌肌動(dòng)蛋白表達(dá)的影響[J].中醫(yī)研究，2009，22（7）：15-18.
