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1免疫學理論知識及技術(shù)發(fā)展迅猛,設(shè)置的課程應(yīng)與時俱進
基于《免疫學技術(shù)》課程知識體系邏輯性強、技術(shù)方法多樣以及理論和技術(shù)進展快的特點,課程教學的整體指導思想必須在強調(diào)對基本原理理解的基礎(chǔ)上,明確同一理論下技術(shù)開發(fā)的多樣性,以及免疫學傳統(tǒng)理論技術(shù)與相關(guān)學科現(xiàn)代技術(shù)結(jié)合,促進免疫學技術(shù)快速發(fā)展的現(xiàn)狀;要求學生掌握免疫學技術(shù)的基本原理和在免疫學功能檢測中的應(yīng)用,并結(jié)合學科前沿進展進行適當拓展和補充,注重創(chuàng)新能力和邏輯思維能力的培養(yǎng)。如在理論課的教學過程中應(yīng)增加CD4+T細胞亞群Treg(天然調(diào)節(jié)性T細胞)、Tfh(濾泡輔T細胞)、Tfr(濾泡調(diào)節(jié)性T細胞)分化發(fā)育等最新研究進展,以及其在不同疾病中扮演的不同功能研究;實驗課的教學中增加細胞亞群分化發(fā)育標志分子及功能的檢測。
2聯(lián)系實際,力求做到學以致用
免疫學與醫(yī)學密切相關(guān),教學活動中,教師應(yīng)多運用臨床實例輔助教學,使學生能將掌握的免疫學知識用于解答臨床相關(guān)問題,達到“學以致用”的目的。理論課“講授法”可以問題為牽引的啟發(fā)式教學為主,重在培養(yǎng)學生科學的思維方式,注重理論聯(lián)系實際;結(jié)合“討論式”教學法,提高學生分析、判斷、歸納、總結(jié)問題的能力,在教學過程中教師起著引導學生分析問題、思維邏輯的方向,尤其是對臨床相關(guān)復雜病例的綜合分析、判斷和解決能力的指導。這一部分知識很多都可能是教科書中沒有的知識點,更多的是指導教師工作經(jīng)驗的累積,教師在平時的科研及臨床實踐中應(yīng)善于總結(jié),為課堂教學提供相應(yīng)素材。在實驗課的教學中注重技術(shù)性與連貫性,如學生操作技能的學習能為今后的工作奠定基礎(chǔ);技能的內(nèi)容具有可操作性及連貫性,啟發(fā)科研思維。如第一次實驗課選擇小鼠脾臟淋巴細胞的分離及純化技術(shù);第二次實驗課可以選擇流式細胞儀檢測或分選細胞亞群;第三次實驗課可以選擇細胞亞群功能檢測如增殖能力檢測、分泌細胞因子檢測、細胞活性檢測,CD8+T細胞殺傷功能檢測等[3]。
3因材施教,確保學生真正掌握知識
醫(yī)學免疫學課程應(yīng)充分考慮學生的興趣、特長和基礎(chǔ)等方面的個體差異,從而確定具體的學習目標和評價方法,提出相應(yīng)的教學建議。課程標準在課程的設(shè)計、教學方案和計劃的制定、教學內(nèi)容的選取和教學評價等環(huán)節(jié),應(yīng)為教師教學、學生學習留出足夠的選擇余地和發(fā)展空間。理論課的授課過程中,教師根據(jù)學生分析問題,歸納、總結(jié)知識點的情況來判斷學生掌握知識的情況,假如存在學生對知識點沒有理解、理解錯誤的情況要及時地調(diào)整教學策略,對于個別理解能力較差的學生課后可以進行“一對一”的輔導;同時,教師應(yīng)將學生對實驗的評價和建議歸納總結(jié)用于改善教學效果[4],確保學生真正掌握基礎(chǔ)理論知識。
4以人為本,突出學生的主體地位,走信息化教學道路
從課程的設(shè)計到評價各個環(huán)節(jié),應(yīng)注重體現(xiàn)學員的主體地位,充分調(diào)動學員的學習積極性、挖掘?qū)W員的學習潛能。教師應(yīng)注重教學方法,授之以“漁”,通過各種方式使學員明確如何學。教學中,充分發(fā)揮學員的主觀能動性,通過自讀、小組討論、總結(jié)發(fā)言、角色扮演等形式,使學員參與到教學實踐中。在課后通過與同學、老師討論,利用網(wǎng)絡(luò)或參考書查閱相關(guān)資料,以擴大對該知識點的認識,認真體會如何用辯證的觀點認識“免疫”,并鍛煉自己獨立學習免疫學的能力。充分發(fā)揮信息化教學手段的特點和優(yōu)勢,激發(fā)學生的學習興趣,進一步強化學生的理論知識與實踐操作技能,開闊視野,培養(yǎng)科學的思維方式。實物投影儀的運用為學生模仿操作創(chuàng)造了良好的條件;多媒體的應(yīng)用,使學生形象了解實驗步驟,實際操作更易上手;多媒體課件及互聯(lián)網(wǎng)的利用創(chuàng)造了一個在功能、時間和空間上交互的嶄新環(huán)境,使一些不易口頭表達清楚的教學內(nèi)容通過課件的演示變成生動具體的知識,縮短了學生與教材之間的距離。此外,學生利用虛擬教室,在自學鞏固的同時又能實現(xiàn)課下與教師的互動,真正做到“互動教學”。利用課堂教學為主,信息化教學為輔的教學形式,符合新型“教”與“學”模式的必然要求。
5實現(xiàn)真正意義的學生能力的培養(yǎng)
通過本課程理論和實驗的學習,學員應(yīng)掌握人體免疫系統(tǒng)的組成和功能、免疫應(yīng)答的規(guī)律、免疫應(yīng)答產(chǎn)物的特性和生物學作用、疾病的免疫學發(fā)病機理、免疫學診斷要點和防治原則;具備學習其他基礎(chǔ)醫(yī)學、臨床醫(yī)學及專業(yè)課程的必要免疫學基礎(chǔ)知識;初步學會運用免疫學的基礎(chǔ)理論知識思考和解決與本專業(yè)相關(guān)的問題;為最終實現(xiàn)培養(yǎng)具有良好的職業(yè)道德、精湛的專業(yè)技術(shù)、嚴謹?shù)目茖W作風以及勇于創(chuàng)新的醫(yī)學人才的目標打下堅實的基礎(chǔ)。理論課的授課方式以問題為牽引的啟發(fā)式教學為主,重在培養(yǎng)學員科學的思維方式,注重理論聯(lián)系實際,提高學員分析、判斷、歸納、總結(jié)問題的能力,尤其是對臨床相關(guān)復雜病例的綜合分析、判斷和解決的能力。學生在學習過程中應(yīng)該以認真的態(tài)度學習醫(yī)學免疫學相關(guān)知識,培養(yǎng)對醫(yī)學免疫學學習的興趣,以及學習的邏輯性和系統(tǒng)性。形成較強的自主學習意識,養(yǎng)成積極思考問題、探究未知的良好習慣,初步具有科研和創(chuàng)新意識。為更好地在教學活動中尊重學生的主體地位,注意培養(yǎng)學生實際應(yīng)用能力,發(fā)揮學生的自覺性、主動性、創(chuàng)造性,提高學生的主體意識和創(chuàng)造力,實現(xiàn)真正意義的能力培養(yǎng)。總之,生物技術(shù)專業(yè)學生畢業(yè)后肩負著運用最新技術(shù)手段結(jié)合國際科學前沿理論知識對疑難疾病的診斷,掌握國際前沿醫(yī)學領(lǐng)域做原創(chuàng)性的科研工作的使命,高等醫(yī)學院校對生物技術(shù)專業(yè)人才的培養(yǎng)應(yīng)將素質(zhì)教育與創(chuàng)新教育相結(jié)合,與人才培養(yǎng)目標密切結(jié)合,實現(xiàn)真正意義的人才培養(yǎng)。
參考文獻:
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【關(guān)鍵詞】學發(fā)光免疫分析技術(shù);基本原理;分類;應(yīng)用
文章編號:1004-7484(2013)-01-0463-01
化學發(fā)光免疫分析技術(shù)(chemiluminescence immuno-assay,CLIA),是在二十世紀八十年展起來的,它是比熒光免疫測定、酶免疫、發(fā)射免疫更先進的一種最新的免疫測定技術(shù)。這種技術(shù)主要用于對各種抗體、抗原、半抗原、脂肪酸、激素和藥物的檢測分析,下面就介紹一下這種技術(shù)的基本原理和分類。
1化學發(fā)光免疫分析技術(shù)的基本原理
化學發(fā)光免疫分析技術(shù)是由免疫分析和化學發(fā)光分析兩個系統(tǒng)構(gòu)成的。其中免疫分析是用標記物直接標記在抗原或抗體之上的,然后再經(jīng)過抗原與抗體反應(yīng)生成抗體免疫復合物,其中標記物可以是化學發(fā)光物質(zhì),也可以是某種酶。化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)是在免疫反應(yīng)結(jié)束后,加入氧化劑或酶的發(fā)光底物,待發(fā)光物質(zhì)氧化后就會形成一個處于激發(fā)態(tài)的中間體,會發(fā)射光子釋放能量以回到穩(wěn)定的基態(tài),發(fā)光強度可以利用發(fā)光信號測量儀器進行檢測,其中被測物的含量就是根據(jù)化學發(fā)光標記物與發(fā)光強度的關(guān)系利用標準曲線計算出來的。
化學發(fā)光的原理是指分子或原子中的電子吸收能量后,發(fā)生能級躍遷而釋放光子的過程,能級躍遷過程是電子從基態(tài)到激發(fā)態(tài)的過程,實現(xiàn)了從較低能級向較高能級的躍遷。其中可以根據(jù)形成激發(fā)態(tài)分子的能量來源不同將發(fā)光過程分為化學發(fā)光(chemiluminescence)、光照發(fā)光(photoluminescence)和生物發(fā)光(bioluminescence)。
化學發(fā)光又可分為直接化學發(fā)光和間接化學發(fā)光,若參加反應(yīng)的物質(zhì)是一個反應(yīng)產(chǎn)物分子,且被激發(fā)到能發(fā)射光的電子激發(fā)態(tài),那么這就是直接化學發(fā)光過程。若參加反應(yīng)的物質(zhì)激發(fā)能傳遞到另一個未參加化學反應(yīng)的分子D上,使D分子激發(fā)到電子激發(fā)態(tài),D分子從激發(fā)態(tài)回到基態(tài)時發(fā)光,這種過程叫間接化學發(fā)光。
2化學發(fā)光免疫分析的分類
化學發(fā)光免疫分析根據(jù)應(yīng)用于免疫分析體系中的方式不同,可以分為以下三類:
2.1直接標記發(fā)光物質(zhì)的免疫分析這種分析方式是用吖啶酯直接標記抗體,作為抗原,然后與待測標本中相應(yīng)抗體發(fā)生免疫反應(yīng),就會形成固相包被抗體一待測抗原一吖啶酯標記抗體復合物,到這一步后再加入雙氧水氧化劑和氫氧化鈉,這樣環(huán)境就會呈堿性,吖啶酯就會在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光。
2.2酶催化化學發(fā)光免疫分析標本中的抗原(抗體)在發(fā)生免疫反應(yīng)時所用的標記物為發(fā)光的酶,這種化學發(fā)光免疫分析方法是酶催化化學發(fā)光免疫分析。
2.3電化學發(fā)光免疫分析(ECUA)這種分析過程包括電化學和化學發(fā)光兩個過程,具體是以三丙胺(TPA)為電子供體,用電化學發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標記抗體(抗原),在電場中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學發(fā)光反應(yīng)。
3化學發(fā)光免疫分析在臨床檢驗中的應(yīng)用
就目前而言,化學發(fā)光免疫分析技術(shù)已經(jīng)成為替代RIA的首選技術(shù),且已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于基礎(chǔ)和臨床醫(yī)學的各個領(lǐng)域。下面就簡要地談?wù)劵瘜W發(fā)光免疫分析技術(shù)在臨床檢驗中的幾個應(yīng)用。
3.1應(yīng)用于傳染性疾病的病原診斷作為評價和治療機體免疫功能重要指標的重要血清學標志物乙型肝炎病毒表面抗原、抗體,以前診斷是否感染乙肝病毒用的是常規(guī)酶法,常規(guī)酶法的缺陷是可能使得部分低病毒含量攜帶者漏檢。但是化學發(fā)光免疫分析具有高靈敏度和線性范圍寬的特點,在傳染性疾病的病原診斷方面其檢測靈敏度比常規(guī)酶法高,Bowser等在測定感染人類免疫缺陷病毒的圍產(chǎn)期兒童體內(nèi)的單純皰疹病毒、乙型肝炎病毒甲型肝炎病毒、及丙型肝炎病毒時給出了證明。
3.2應(yīng)用于腫瘤標志物的分析腫瘤標志物包括蛋白質(zhì)、酶、癌基因產(chǎn)物、激素等,它是由腫瘤細胞合成釋放或機體對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)。在患者的細胞中,血液中以及組織中都存在腫瘤標志物?;瘜W發(fā)光免疫分析可以用于尋找新的腫瘤標志物,也可以進行體外早期輔助診斷和對術(shù)后的監(jiān)測,對惡性腫瘤患者的具有重要意義。Mac等達到了對食管癌患者的診斷和病情監(jiān)測,他們采用的方法就是檢測血清中癌胚抗原的濃度、cyfra21-1的濃度、鱗狀細胞癌抗原的濃度。Shabin和Raslan比較了AFP和人絨毛膜促線性激素這胎膜早破和健康孕婦陰道液中的兩種標志物,發(fā)現(xiàn)AFP的敏感性和特異性最高。Sakaida等通過檢測細胞色素C的含量得出C可能成為肝衰竭的新標志物。
3.3應(yīng)用于心臟疾病的特征標記物測定臨床上的心臟疾病常常采用同工酶定量測定,標記物為肌酸激酶和肌鈣蛋白T\肌紅蛋白。Dutra等運用心肌肌鈣蛋白cTnT受體分子制成了免疫傳感器,可用于臨床上早期檢測心肌梗死。有文獻報道同時檢測了cTnT肌酸激酶同工酶CK-MB和肌紅蛋白,相關(guān)系數(shù)分別為cTnT0.953-0.982;CK—MB0.835-0.999;肌紅蛋白0.776-0.992,具有很好的相關(guān)性可用于檢測臨床標本。
4結(jié)束語
化學發(fā)光免疫分析技術(shù)具有高特異性和高靈敏度的特點,它將化學分析方法和免疫學分析方法的優(yōu)點融合了起來,用這種方法分析簡便、快速,且標記結(jié)合物穩(wěn)定,沒有污染,是非放射性免疫分析方法中最有前途的方法?,F(xiàn)在在臨床診斷和治療疾病中應(yīng)用的全自動化學發(fā)光免疫分析儀能夠?qū)崿F(xiàn)試劑穩(wěn)定自動分析,且可以在短時間內(nèi)得出精確的結(jié)果,可以說化學發(fā)光免疫分析檢測技術(shù)的應(yīng)用必將為未來迎來新的曙光。
參考文獻
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[2]鄭開作.化學發(fā)光免疫分析技術(shù)測定血清TSH及臨床評價.福建分析測試研究報告,2001,10(3):1458-1461.
【摘要】為了配合新的實驗課程模式,本室根據(jù)實際情況和學科特點,進行了一系列的改革措施。
【關(guān)鍵詞】病原生物學;免疫學;教學改革
長沙醫(yī)學院實驗教學中心即將對醫(yī)學免疫學、醫(yī)學微生物學、人體寄生蟲學三門課程的實驗內(nèi)容進行整合,開設(shè)了獨立的融合性實驗課程----病原生物學與免疫學實驗課,旨在拓展學生實驗?zāi)芰?、?chuàng)新力和思維開拓能力,培養(yǎng)具有較扎實基本理論知識和突出實踐技能的應(yīng)用型臨床醫(yī)學人才。為了配合新的實驗課程模式,本室根據(jù)實際情況和學科特點,進行了一系列的改革措施,如下:
一、構(gòu)建實驗教學新體系,優(yōu)化實驗項目
從實驗教學的整體優(yōu)化、內(nèi)涵提升的要求出發(fā),對現(xiàn)有實驗教學資源進行重組和優(yōu)化,對現(xiàn)有的課程進行整合和變構(gòu),改變傳統(tǒng)的以依附和驗證理論為主的機械僵化的實驗教學模式,加強微生物學、人體寄生蟲學及免疫學三門實驗課的交叉融合,增加綜合性、設(shè)計性實驗的比例。同時,以培養(yǎng)學生突出實踐技能為主線,構(gòu)建分層次、多模塊、相互銜接的實驗教學新體系,實現(xiàn)實驗教學與理論教學既緊密聯(lián)系又相對獨立運行的良性互動新格局,充分彰顯實驗教學在醫(yī)學人才培養(yǎng)中的自主性和獨特性。新的實驗教學體系包含三個教學層次:
1 基礎(chǔ)驗證性實驗課群:是反映基本知識和基本理論,訓練基本技能的經(jīng)典實驗。其教學內(nèi)容具有基礎(chǔ)性、入門性、規(guī)范性的特點,教師示范、學生作規(guī)范化操作訓練。
2 綜合性實驗課群:綜合性實驗項目在內(nèi)容和知識點遵循立體交叉、逐步遞進原則,使學生在對微生物學、人體寄生蟲學及免疫學學科相關(guān)實驗知識和方法有初步認識的基礎(chǔ)上向多學科知識交叉融合、實驗技術(shù)涉及面較廣的綜合性實驗遞進。綜合性實驗中既有病原微生物的鑒別,又有機體免疫功能的檢測,實驗中主要學習研究方法的基本原理、實驗步驟和應(yīng)用范圍,使同學們對實驗研究有一個比較全面和立體的概念,以培養(yǎng)學生科學思維能力。本類項目由教師引導,學生自主完成,多層次、多方向綜合訓練,提高學生對復雜問題的分析和處理能力。實現(xiàn)微生物學、人體寄生蟲學及免疫學學科的緊密結(jié)合,強調(diào)知識的交叉、融合。
3 設(shè)計拓展性實驗課群:以已有的知識和技能為基礎(chǔ),以個人興趣和科研目標為導向自主設(shè)計實驗及科研興趣小組活動等,如殼寡糖對臍血樹突狀細胞表型及功能成熟的影響實驗,從免疫學、分子生物學、藥理學等方向進行基礎(chǔ)研究。這一層次的實驗以學生自學、自主設(shè)計為主,教師進行引導、指導和評價。通過拓展性實驗可訓練學生科學思維,更好地培養(yǎng)實踐創(chuàng)新能力。
二、構(gòu)建實驗室開放管理運行機制
根據(jù)構(gòu)建實驗教學新體系的要求,在適當保留經(jīng)典實驗的基礎(chǔ)上,大力整合實驗相關(guān)模塊,提升實驗設(shè)備規(guī)模和層次,全面開放實驗室,提高實驗資源利用率。病原生物學免疫學實驗室開放運行的指導思想就是建構(gòu)“大實驗”體系,而立足于“四個有利于”,即有利于實驗教學資源的高效利用,有利于提高實驗室的管理水平、服務(wù)質(zhì)量,有利于提高學生學習的主動性和創(chuàng)造性,有利于提升才長沙醫(yī)學院的本科教育教學質(zhì)量。為保障實驗室開放的質(zhì)量,相繼建立了《病原生物學免疫學實驗室開放管理細則》、《安全與衛(wèi)生管理制度》等一系列制度,以保證開放的效果,保障實驗室的安全。
病原生物學免疫學實驗室的資源為醫(yī)學類、全院生物類相關(guān)實驗教學所共享;為全校大學生的醫(yī)學科學基礎(chǔ)、自然科學基礎(chǔ)和其它生物類公選課的相關(guān)實驗教學及課外活動所共享;部分教學、科研兩用的儀器設(shè)備可以為教師及相關(guān)科研人員服務(wù),同時,為相關(guān)醫(yī)療單位開放。在保證完成病原生物學免疫學實驗室承擔的實驗教學任務(wù)的前提下,分實驗室、分時段進行開放。病原生物學免疫學教學實驗室的實驗教學任務(wù)重,主要在周六、周日和晚上開放。
三、制定實驗教材選用原則及實施辦法,鼓勵編寫實驗教材和講義
實驗教材建設(shè)是實驗教學的基礎(chǔ),為了解實驗?zāi)康摹⒄_使用儀器、配制實驗試劑、規(guī)范實驗操作、正確記錄實驗數(shù)據(jù)及書寫實驗報告等提供規(guī)范的文字依據(jù)。為抓好實驗教材建設(shè),學院制定了完整的教材建設(shè)計劃,積極鼓勵和提倡實驗指導教師編寫實驗講義和教材,并在出版經(jīng)費和工作時間上給予大力支持。結(jié)合實驗項目的調(diào)整和更新,督促和協(xié)調(diào)實驗教師不斷完善實驗教材的內(nèi)容。目前我室在本科生的實驗教學中采用了由科學出版社等出版的《醫(yī)學免疫學雙語實驗指導》、《醫(yī)學微生物學雙語實驗指導》及《醫(yī)學寄生蟲學實驗指導》,此外由基礎(chǔ)系組織和資助擬按照基礎(chǔ)-綜合-設(shè)計創(chuàng)新三大模塊編寫新的實驗教材等。
四、努力改革實驗教學方法,完善實驗考核評定手段
報考時間
甘肅隴南2020年4月自考時間安排在:4月11日星期六(上午9:00--11:30;下午14:30--17:00);4月12日星期日(上午9:00--11:30;下午14:30--17:00),具體開考專業(yè)及課程考試時間安排見附表。
附件:2020年4月甘肅省高等教育自學考試開考專業(yè)及課程考試時間安排表
一、專科(含基礎(chǔ)科段) 時間
專業(yè) 4月 星期六(4月11日) 星期日(4月12日) 上午(9:00--11:30) 下午(14:30--17:00) 上午(9:00--11:30) 下午(14:30--17:00) 020203會計 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
00157管理會計(一) 00009政治經(jīng)濟學(財經(jīng)類)
03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ) 00146中國稅制 00041基礎(chǔ)會計學
00155中級財務(wù)會計 00020高等數(shù)學(一)
04729大學語文
00144企業(yè)管理概論 030112法律 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
05679憲法學
00247國際法 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)
00245刑法學 00260刑事訴訟法學 04729大學語文
05677法理學 030301行政管理 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論 00292市政學 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ) 00107現(xiàn)代管理學 00277行政管理學 04729大學語文
00040法學概論 040103小學教育 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
00405教育原理 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)
00406小學教育科學研究 00413現(xiàn)代教育技術(shù) 00415中外文學作品導讀
00417高等數(shù)學基礎(chǔ) 00012英語(一)
04729大學語文
00416漢語基礎(chǔ)
00418數(shù)論初步 040109心理健康教育 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
05615心理健康教育概論 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)
05618青少年心理衛(wèi)生 00031心理學
01755人體解剖生理學(教育類) 04729大學語文
02108實驗心理學
03584偏差行為輔導與案例分析 050114漢語言文學 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
00024普通邏輯
00535現(xiàn)代漢語 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)
00530中國現(xiàn)代文學作品選 00506寫作(一) 00532中國古代文學作品選(一) 080701計算機及應(yīng)用 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
02316計算機應(yīng)用技術(shù)
02318計算機組成原理 02198線性代數(shù) 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)
04730電子技術(shù)基礎(chǔ)(三) 00342高級語言程序設(shè)計(一) 02141計算機網(wǎng)絡(luò)技術(shù) 00012英語(一)
00022高等數(shù)學(工專)
04729大學語文
02323操作系統(tǒng)概論 100701護理學 12656*思想和中國特色社會主義理論體系概論
02997護理學基礎(chǔ)
00488健康教育學 03706思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)
03179生物化學(三) 03000營養(yǎng)學 02864微生物學與免疫學基礎(chǔ) 04729大學語文 03002婦產(chǎn)科護理(一) 03003兒科護理學(一) 二、獨立本科段(含本科段) 020104財稅 03708中國近現(xiàn)代史綱要
00058市場營銷學 03709基本原理概論
04184線性代數(shù)(經(jīng)管類)
00054管理學原理 04183概率論與數(shù)理統(tǒng)計(經(jīng)管類) 00069國際稅收 00015英語(二)
00053對外經(jīng)濟管理概論 020202工商企業(yè)管理 03708中國近現(xiàn)代史綱要
00151企業(yè)經(jīng)營戰(zhàn)略 03709基本原理概論
04184線性代數(shù)(經(jīng)管類)
00054管理學原理
00150金融理論與實務(wù) 04183概率論與數(shù)理統(tǒng)計(經(jīng)管類) 00153質(zhì)量管理(一) 00015英語(二)
00152組織行為學 020204會計 03708中國近現(xiàn)代史綱要
00058市場營銷學 03709基本原理概論
04184線性代數(shù)(經(jīng)管類)
00150金融理論與實務(wù) 04183概率論與數(shù)理統(tǒng)計(經(jīng)管類) 00160審計學 00015英語(二)
00158資產(chǎn)評估 020210旅游管理 03708中國近現(xiàn)代史綱要
00058市場營銷學 03709基本原理概論 04184線性代數(shù)(經(jīng)管類) 00198旅游企業(yè)投資與管理 04183概率論與數(shù)理統(tǒng)計(經(jīng)管類) 00197旅游資源規(guī)劃與開發(fā) 00053對外經(jīng)濟管理概論
00152組織行為學 06124旅游文化學 020229物流管理 03708中國近現(xiàn)代史綱要
00151企業(yè)經(jīng)營戰(zhàn)略
07725物流規(guī)劃 03709基本原理概論
00009政治經(jīng)濟學(財經(jīng)類) 03361企業(yè)物流 07006供應(yīng)鏈與企業(yè)物流管理 00015英語(二)
00152組織行為學 03364供應(yīng)鏈物流學 030106法律 03708中國近現(xiàn)代史綱要
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00264中國法律思想史 03709基本原理概論
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00453教育法學
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關(guān)鍵詞:免疫學;課程;教學改革
中圖分類號:G643 文獻標志碼:A 文章編號:1674-9324(2016)14-0091-02
進入21世紀以來,隨著我國社會經(jīng)濟的快速發(fā)展和經(jīng)濟結(jié)構(gòu)的戰(zhàn)略性調(diào)整,社會對高素質(zhì)人才的需求愈來愈迫切。明確地提出了希望全國廣大教師“牢固樹立改革創(chuàng)新意識,踴躍投身教育創(chuàng)新實踐,為發(fā)展具有中國特色、世界水平的現(xiàn)代教育作出貢獻”[1]。教育的質(zhì)量最終要由社會來評價和檢驗,在科學技術(shù)突飛猛進、知識經(jīng)濟已現(xiàn)端倪的今天,判斷教育是否成功,只能看培養(yǎng)出的學生是否具有創(chuàng)新精神和創(chuàng)新能力[2]。高等學校要把提高教學質(zhì)量作為教育改革發(fā)展最核心最緊迫的任務(wù)[3]。
免疫學(Immunology)是當前生命科學中一門富有活力并具備巨大發(fā)展?jié)摿Φ膶W科。隨著科學研究的發(fā)展,免疫學作為是生命科學的重要分支之一[4],還在不斷地深入與革新中。免疫學課程內(nèi)容多,涉及面廣,相對較為抽象,難于理解和記憶?;诖耍疚尼槍γ庖邔W的授課提出一系列教學方法,望為以后的免疫學教學改革提供一些參考。
一、課前做好充足的準備
備課是老師根據(jù)學科課程標準的要求和本門課程的特點,結(jié)合學生的具體情況,選擇最合適的表達方法與授課順序,保證學生能夠最有效地接收知識。目前南陽師范學院生物工程專業(yè)研究生所學的免疫學,是基于Thao Doan、Roger Melvold等人主編,呂昌龍主譯的《圖解免疫學》。該教材不僅內(nèi)容全面、信息量大、知識性強、邏輯性強,并且有精心設(shè)計描繪的插圖和表格,生動形象地闡述了免疫學抽象難懂的理論知識,有效地精練了累贅的文字敘述。本書共分為四個單元,二十個章節(jié),計劃講授36個學時。前三個單元重點闡述基礎(chǔ)免疫學的內(nèi)容,最后一個單元重點闡述臨床免疫學的內(nèi)容。如何在有限的學時內(nèi)把教材內(nèi)容系統(tǒng)的傳授給學生,并使其牢固掌握,這需要我們每一位教師在備課過程中深入研究教學大綱,結(jié)合本專業(yè)學生特點,抓住所需要講授的課程重點與難點。在備課的同時,也應(yīng)該注意到學生個體間的差異,了解本專業(yè)學生的學習背景。
二、靈活運用多種教學方法
現(xiàn)代教育理念認為,真正的教育應(yīng)當是以人為本的教育,把人作為發(fā)展的主體與動力,把挖掘人的潛能、開發(fā)人的聰明才智作為出發(fā)點和落腳點。教學方法的改進是教學內(nèi)容圓滿完成的保障。免疫學知識點繁雜,專有名詞多,學生普遍存在不好理解,把握不住重點的問題。在教學過程中,充分發(fā)揮教師和學生的主觀能動性,開展多種多樣的互動教學,培養(yǎng)學生興趣,提高學習效率。研究生相對本科生來說專業(yè)基礎(chǔ)較好,上課人數(shù)相對較少,非常便于開展互動式教學,比單純的講授法傳授知識模式更加生動,提高學生的學習效率。
1.應(yīng)用PBL教學方法。以問題為導向的教學方法(Problem-Based Learning,PBL)是基于問題式學習,與傳統(tǒng)的灌輸式和填鴨式教學方法有很大的不同。這種模式主要以學生為主體,以討論的形式完成教學,能夠更多地調(diào)動學生的主觀能動性與自我學習的能力;培養(yǎng)學生分析問題和解決問題的綜合能力。對于免疫學教學來說,講授每一塊知識時都會留給學生一些問題,如腫瘤在發(fā)生發(fā)展過程中的免疫逃逸方式、如何治療免疫缺陷與過敏反應(yīng)等問題,讓學生們自己思考,查閱更多的信息,進行分析討論。對于一些重點難點問題,如抗原受體多樣性的產(chǎn)生,細胞因子的作用模式等,在授課過程中還會留出單獨的專題討論課,可將學生分成3人一組的若干小組進行討論,學生可以各抒己見,每組派一名代表對該組的觀點進行總結(jié)匯報。力圖營造一個輕松和諧的討論氛圍,調(diào)動學生的積極性與團隊合作意識。
2.靈活運用多媒體教學。免疫學是一門十分抽象,難于理解與記憶的生命科學。單靠教師的機械式講解往往很難讓學生理解并運用。對于知識點碎片化的章節(jié),如果能讓學生直觀地看到,再加以講解,效果會事半功倍。如在講解器官移植與免疫排斥時,可以采用直觀法,通過播放教學視頻,讓學生親眼看到器官移植的大致過程與后期排斥反應(yīng)等癥狀的出現(xiàn)及藥物干預(yù),讓學生直觀地看到自身免疫耐受的突破所造成的嚴重臨床后果;在講解補體系統(tǒng)三種激活途徑參與的分子與調(diào)節(jié)分子時,可制作小動畫讓學生觀看,利于學生直觀理解激活過程的發(fā)生與發(fā)展;在講解抗體多樣性產(chǎn)生的遺傳機制時,可用幻燈繪圖或擺模塊的方式,講訴基因片段重排的過程。
3.注重指導學生自學。在課堂教學中貫徹少而精的原則,適當開展自學、課堂討論和教師小結(jié),以培養(yǎng)學生積極參與教學和獨立思考的能力。研究生免疫理論課教學與其他學生層次的教學不同,大多數(shù)研究生在本科階段已經(jīng)接觸過免疫學的基礎(chǔ)理論知識,再結(jié)合生物工程專業(yè)的特點和培養(yǎng)要求,對某些較為易懂的概念性內(nèi)容如免疫器官、組織與細胞、免疫應(yīng)答與免疫調(diào)節(jié)等概念性知識,可安排學生自主學習來完成教學目標。在指導學生閱讀教材的同時,針對本專業(yè)特點,結(jié)合教授內(nèi)容讓學生閱讀與學科相關(guān)的新發(fā)現(xiàn)、新信息,指導學生利用學校圖書館資源及網(wǎng)絡(luò)資源,查找更多更新的相關(guān)資料。
免疫學是一個“很年輕”的學科,與其他自然學科不同的是,各體系內(nèi)容建立的較晚,有些認識隨著近年科學研究的深入,不斷出現(xiàn)革新甚至“”。在教學的同時,講授者要對課本的知識進行及時的完善與補充,結(jié)合學生自學產(chǎn)生的“疑問”對于解答,可起到事半功倍的效果。
對于一些免疫學相關(guān)的科學研究熱點,諸如“腫瘤免疫逃逸”、“治療性抗體”、“腫瘤免疫細胞治療”等等,可結(jié)合課程相關(guān)內(nèi)容進行拓展與延伸。由于課程時間有限,研究生的生物學理論知識普遍較扎實,在講授這些內(nèi)容的時候可以只講述原理與發(fā)展動向,具體由感興趣的學生進行課下學習,培養(yǎng)學生的自主查閱資料的能力,對學生正在參與的科研項目也會起到啟發(fā)思路與開拓視野的作用。
三、強化與其他有關(guān)學科知識的聯(lián)系
免疫學理論性強,涉及面廣,與許多生命科學學科都有交叉。在講授或指導學生自行學習時,注意與其他學科(如微生物學、病原生物學、疫苗學等)的連接,激發(fā)學生的學習興趣,為以后的科研奠定一定的基礎(chǔ)。如將免疫學與微生物感染、發(fā)病病程,以及血清學診斷結(jié)合起來,使得知識點繁多的枯燥課程內(nèi)容變得更加豐富生動;講授抗體產(chǎn)生與初次、再次免疫時,可結(jié)合臨床使用疫苗的注意事項、免疫程序、佐劑選擇等等,可幫助學生在理解本學科內(nèi)容的同時理解相關(guān)學科。多學科的交叉,可擴大不同專業(yè)背景的學生的知識收獲面,提高免疫學課程的價值。
四、增加實驗課,培養(yǎng)學生綜合能力
免疫學是一門實踐性很強的學科,實驗課的開設(shè)非常重要。實驗課不僅可以驗證和鞏固學生在理論課上學到的知識,還可以訓練學生的基本實驗技能,提高學生的動手能力,更能培養(yǎng)學生的科學思維能力。我校應(yīng)對研究生開設(shè)免疫學實驗課,這對其科研能力與科研思維及實驗設(shè)計能力的培養(yǎng)是所必需的。免疫學實驗課可通過引導研究生發(fā)現(xiàn)問題、探索分析解決方案,來培養(yǎng)科學思維能力,為以后的科研道路打下堅實的基礎(chǔ)。由于免疫學涉及到的抗原抗體反應(yīng)、補體結(jié)合等知識點抽象并且難以理解,結(jié)合實驗,對學生深入理解理論知識大有助益。
同時,很多免疫學實驗的基本原理都是相似和相通的,在理論課程教學的時候,可適當增添免疫學實驗的拓展內(nèi)容;結(jié)合開展的免疫學實驗,讓學生對免疫學實驗體系有更系統(tǒng)的認識,達到“舉一反三”、“觸類旁通”的效果。
除了免疫學基礎(chǔ)實驗以外,以“抗原抗體反應(yīng)”為核心的生物醫(yī)學實驗有很多,諸如單克隆、多克隆抗體的制備,免疫印跡與免疫熒光,免疫共沉淀等;對于生物學和醫(yī)學研究生來說,這些技術(shù)與方法與科研工作的完成是息息相關(guān)的,對于有條件的院校,可以開展相關(guān)實驗及配套理論講解。
五、完善考核方式
考核是教學過程中的必要環(huán)節(jié),是檢驗教學質(zhì)量的重要方法??己嗽u價可以更好地激勵學生學習,同時可以讓教師找到在教學中的不足之處,加以改正與完善,為以后的教學打下良好的基礎(chǔ)。我?,F(xiàn)行的免疫學考核制度主要是以筆試體現(xiàn)的理論成績?yōu)橹?,這種評價方式比較機械與片面。因此,我們應(yīng)積極尋求多樣化的考核制度,如增加動手能力的考核、開放性問題的考核,可增加學生進行科研專題的匯報與討論,或者進行實驗操作與結(jié)果分析,這些考核方式可從全面、綜合素質(zhì)來評價學生,提高學生的學習能力與綜合素質(zhì),避免培養(yǎng)“死讀書,讀死書”的研究生。
總之,免疫學教學改革是促進學科發(fā)展、改善教學質(zhì)量的必然要求。只有我們在教學內(nèi)容、教學方法及教學考核等方面深入改革,充分調(diào)動學生的主觀能動性,同時老師做好合理的引導,加強對學生創(chuàng)新能力、實踐能力和思考能力的培養(yǎng),增強教學雙方的互動和聯(lián)系,才能更有效地提高免疫學的教學質(zhì)量,為生物醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展培養(yǎng)更多具有良好職業(yè)素質(zhì)的新型技能型人才。
參考文獻:
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酶聯(lián)免疫吸附測定 (enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)技術(shù)是1971年由Engvall 和Perlman 建立的一種生物活性物質(zhì)微量測定新技術(shù),以其靈敏度高、特異性好等優(yōu)點,在生命科學各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。近年來,該技術(shù)不斷改進,形成了多種分析方法,并且在檢測的靈敏度、特異性、操作簡單化、高效性等方面都有很大提高。ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性[1]。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。有報道441例梅毒患者的血清樣品,認為ELISA的敏感性和特異性為100%和93%[2]。本文將ELISA的基本原理、類型、關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)、國內(nèi)外近年來ELISA的新技術(shù)綜術(shù)如下:
1ELISA的建立
1.1抗體的制備:任何一種ELISA方法都需要抗體,因此在建立ELISA方法時都需要制備滿足實驗方法的抗體,抗體的制備是利用動物對外來異己的物質(zhì)(抗原)的排斥作用發(fā)生免疫反應(yīng),在體液(血液)中產(chǎn)生針對該異己物質(zhì)的免疫球蛋白,成為抗體,提取這些動物的體液就可以得到相應(yīng)的抗體。抗原的種類很多,大小也不同,不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性,一般情況當抗原的分子量較大時(大于5000D)才能誘導動物產(chǎn)生抗體,免疫動物時需用佐劑,如小分子激素或基因工程抗原等半抗原物質(zhì)需先通過人工的方法與蛋白質(zhì)載體連接后再與佐劑混合免役動物,方可獲得理想的免疫效果,一些藥物和激素的抗體都需經(jīng)這個方法制得[3]??贵w的純化方法有:中性鹽沉淀、離子交換層析和親和層析等方法。制備的抗體一般需要進行特異性和親和力的鑒定。
近年來,隨著單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展,在ELISA方法中越來越多的應(yīng)用單克隆抗體。單克隆抗體是由B細胞雜交瘤細胞株產(chǎn)生的,只針對一種抗原決定簇的單一抗體。是將小鼠骨髓瘤細胞和小鼠脾細胞融合成雜交瘤細胞,這種細胞能在人工培養(yǎng)下無限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體[4]。單克隆抗體的優(yōu)點是:理化性質(zhì)高度均一、生物活性單一、與抗原結(jié)合的特異性強、來源容易等。他的應(yīng)用大大提高了ELISA方法的選擇性和特異性,同時也是大量提供標準化抗體的一個途徑。
1.2ELISA的標記技術(shù):標記是ELISA檢測方法的關(guān)鍵技術(shù)。好的酶結(jié)合物要求穩(wěn)定,具有很高的酶活性,產(chǎn)量高及成本低。常用的酶有堿性磷酸酶(簡稱AP),辣根過氧化酶(簡稱HRP),此外還有葡萄糖氧化酶,β-D-半乳糖甙酶,葡萄糖氧化酶、青霉素酶及乙酰膽堿酯酶等[5]。(1)戊二醛交聯(lián)法:戊二醛是一種雙功能團試劑,它可以使酶與蛋白質(zhì)或其他抗原的氨基通過它而連結(jié)。戊二醛法分為一步法和二步法。一步法容易形成高分子量的酶和酶標抗體聚合物,以及形成不穩(wěn)定的酶標抗體;二步法也形成高分子量的復合物,但酶與抗體的分子比為1∶1,特別適用于定量ELISA。AP和HRP一般用戊二醛法與抗體交聯(lián)。(2)過碘酸鈉法:過碘酸鈉法標記的的酶標抗體是一個高分子量的復合物,也常用于定量ELISA法,有較高的靈敏度。此方法的標記率在70%左右,是目前最常用的方法。本方法只用于HRP的交聯(lián),是HRP交聯(lián)最有效的方法。但是由于此法所用試劑較為劇烈,各批實驗結(jié)果不易重現(xiàn)。除此之外還有二來酰亞胺法、二異氰酸甲苯法、氟二硝基砜法、苯醌法等。但是都比較少用。交聯(lián)反應(yīng)的選擇與實驗條件和實驗者的經(jīng)驗有關(guān)。
2ELISA的主要類型
2.1雙抗體夾心法:用于檢測抗原。本法首先用特異性抗體包被于固相載體,利用待測抗原上的兩個抗原決定簇分別與固相載體上的抗體和酶標記抗體結(jié)合,形成抗體-待測抗原-酶標抗體復合物,復合物的形成量與待測抗原含量成正比。此方法欲測的抗原必須有兩個可以與抗體結(jié)合的部位。因此,不能用于分子量小于5 000的半抗原的測定。此法在霍亂腸毒素、HBsAg及HbS的測定中有應(yīng)用。陳松等[6]用抗體夾心ELISA 法直接檢測轉(zhuǎn)基因植物體內(nèi)Bt毒蛋白含量,認為其簡便、靈敏、準確。
2.2改良雙抗體夾心法:也是用于測定抗原的,其原理見圖1。與改良前的雙抗夾心不同之處在于本法也是首先將特異性抗體a包被于固相載體,抗原與特異性抗體a結(jié)合后再與特異性抗體b結(jié)合,而這次加入的抗體b于第一次包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的,但不是用同種動物免疫制備的,否則可出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。形成抗體a-待測抗原-抗體b復合物,此復合物再與酶標記抗b抗體結(jié)合。
圖1改良雙抗體夾心法測抗原示意圖
這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。因此,放大的倍數(shù)更高,故比雙抗體夾心法更加靈敏。同時避免標記特異性抗體,而另一優(yōu)點是只要標記一種抗體,即可達到多種應(yīng)用。
2.3間接法:用于測定抗體。將已知抗原連接在固相載體上,待測抗體與抗原結(jié)合后再與酶標二抗結(jié)合,形成抗原-待測抗體-酶標二抗的復合物,復合物的形成量與待測抗體量成正比。
2.4競爭法:既可用于檢測抗原又可用于檢測抗體。方法的基本原理見圖2(以測定抗原為例):首先將特異性抗體(抗原)吸附于固相載體表面,經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液,而另一組只加酶標記抗原,由于酶標抗原(抗體)與待測的非標記抗原(抗體)競爭性的與固相載體上的限量抗體(抗原)結(jié)合,待測抗原(抗體)多,則形成非標記復合物多,酶標抗原與抗體結(jié)合就少,也就是酶標記復合物少,因此,顯色程度與待測物含量成反比。
這種方法所測定的抗原只要有一個結(jié)合部位即可,因此,對小分子抗原如激素和藥物之類的測定常用此法。該法的優(yōu)點是快,因為只有一個保溫洗滌過程。但需用較多量的酶標記抗原為其缺點。
3ELISA的新技術(shù)
3.1斑點ELISA法:斑點ELISA試驗(Dot-ELISA)又稱點免疫結(jié)合法或抗原斑點試驗,是Hawkes等參照核酶的斑點雜交法改良而成的,是以纖維素膜為載體的一種新型免疫檢測技術(shù)[7]。已被廣泛應(yīng)用于免疫印記單克隆抗體鑒定及各種抗原-抗體體系的檢測。也有報道用白色PVC作快速Dot-ELISA載體來檢測日本血吸蟲抗體。其實驗效果不僅與NC膜做載體的常規(guī)ELISA無異,而且有許多優(yōu)點,載體和容器合一,操作方便;孔底薄吸熱性好,有利于各試劑快速結(jié)合;點抗原不擴散,斑點色度增加等[8]。
3.2單克隆抗體捕獲ELISA法:單克隆抗體捕獲ELISA法(Mac-ELISA)是在抗體捕獲試驗基礎(chǔ)上近幾年發(fā)展起來的一種檢測技術(shù),他可以避免同型抗體間對抗原位點的競爭而敏感性差的問題也可以避免如類風濕因子(RF)等引起的非特異性反應(yīng),敏感性和特異性強。Florent等成功的將此種方法應(yīng)用于牛呼吸道病毒感染的IgM抗體檢測,Lee等應(yīng)用HBDV的單克隆抗體通過Mac-ELISA檢測出HBDV的特異性抗體。
3.3聚合酶鏈式反應(yīng)ELISA法:聚合酶連式反應(yīng)(PCR)是分子生物學技術(shù)檢測DNA最靈敏的方法之一,而酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)是免疫學中最敏感和特異的檢測方法的代表。聚合酶鏈式反應(yīng)ELISA法(PCR-ELISA)集合了上述兩種方法的精髓,成為繼PCR之后的又一個靈敏性更高、特異性更強、省時易行的新方法[9]。
4研究展望
ELISA具有靈敏度高、特異性強等優(yōu)點, 自問世以來,迅速得到推廣。ELISA分析方法多樣,適用面廣,廣泛的用于抗原、抗體和半抗原的免役測定。其線性范圍較寬,符合臨床檢驗的要求,ELISA技術(shù)為臨床診斷和科學研究提供了一種超微量的非同位素免役檢測手段,在醫(yī)學、食品分析、藥物殘留、環(huán)境等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。目前,ELISA在免役分析方面取得了一些成就,但其遠不能滿足臨床分析的要求。研究者在如何提高免疫診斷的敏感性和特異性,發(fā)展新的分析技術(shù)等方面仍在不斷努力。ELISA技術(shù)的發(fā)展趨勢在于優(yōu)化抗體制備和標記技術(shù)以及建立新的免疫分析方法等;在新的分析方法原理上力求創(chuàng)新,追蹤生命科學和環(huán)境科學發(fā)展的前沿領(lǐng)域,建立對生命過程和環(huán)境毒理有重要內(nèi)源性和外源性物質(zhì)分析的新方法,促進生命科學、環(huán)境科學的研究和發(fā)展。
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每年發(fā)生的食源性疾病近數(shù)10億例,其中約有170萬名15歲以下兒童因為食源性微生物污染引起腹瀉而死亡。金黃色葡萄球菌是引起細菌性食物中毒的重要病原菌之一。無論在發(fā)達國家還是在發(fā)展中國家,金黃色葡萄球菌引起的食物中毒在細菌性食物中毒中都占有較大比例。該菌在自然界中分布廣泛,在人體中主要存在于皮膚、粘膜,特別是鼻咽部,30%~80%的人群為該病原菌的攜帶者,因此金黃色葡萄球菌污染食品的幾率較大。在美國,每年超過18.5萬人發(fā)生金黃色葡萄球菌食物中毒,其中約1750人住院,每年損失約15億美元;在歐盟,1993~1998年報告的金黃色葡萄球菌食物中毒共926起,占食源性疾病的4.5%。日本的調(diào)查結(jié)果表明,平均32.5%的食品存在金黃色葡萄球菌的污染。據(jù)美國CDC報告,金黃色葡萄球菌引起的食物中毒僅次于大腸埃希菌,居第2位,占細菌性食物中毒的33%。加拿大金黃色葡萄球菌中毒的發(fā)生率更高,占細菌性食物中毒的45%。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒也已成為世界性的公共衛(wèi)問題。近年來,我國每年由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒事件已居第4位。鑒于此,對金黃色葡萄球菌的危害認識和檢測是至關(guān)重要的。
擺在食品安全工作者面前的問題不只是金黃色葡萄球菌的檢測,而是對全部致病菌的檢測,怎樣快速地完成檢測,這是食品安全檢測方法中比較薄弱的地方,也是食品安全工作者不停努力的方向。
對于金黃色葡萄球菌的檢測,國內(nèi)90%實驗室還是使用GB 4789.10-2010,其時間長,操作繁瑣,需要48小時或者更多的時間。要求專業(yè)技術(shù)人員,不適合大批量檢測及快速檢測?,F(xiàn)有的金黃色葡萄球菌檢測方法
1.紙片法
目前廣泛應(yīng)用的一種方法,用紙片、膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體,將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面,通過觀察微生物在測試片上面的生長、顯色來測定食品中微生物。采用快速測試片檢測具有顯著的優(yōu)點:可測定少量檢品,不需要配制試劑,不需要大量的玻璃器皿,操作簡便迅速;易于消毒保存,便于運輸攜帶方便,價格低廉;除紙片外無其他任何廢液廢物,大大減少了工作量;可以在取樣時同時接種,結(jié)果更能反映當時樣本中真實細菌數(shù),防止延長接種時間時細菌繁殖造成的污染。
技術(shù)優(yōu)點:操作簡單使用方便,避免了繁瑣的操作。
技術(shù)缺點:用時間比較長,無法準確定性及計數(shù)。
此方法現(xiàn)在應(yīng)用于快速檢測領(lǐng)域,美國3M公司Petrifilm為載體的測試片應(yīng)用最為廣泛。但其也存在一些問題:Petrifilm測試片上覆蓋了一層薄膜,當樣品粘液過多時會出現(xiàn)菌落的擴散和融合,影響計數(shù);Petrifilm測試片面積較小,當菌量大于250cfu時,準確計數(shù)較困難;待測樣品中含有的某些有機物可能使顯色減緩。使目視效果下降,導致計數(shù)偏低。
2.免疫學方法
各種免疫學方法的基本原理都是抗原抗體反應(yīng)??乖贵w反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。金黃色葡萄球菌特異的抗原能激發(fā)機體產(chǎn)生相應(yīng)的特異性抗體。在免疫檢測中,可利用單克隆抗體檢測金黃色葡萄球菌的特異抗原,也可利用金黃色葡萄球菌抗原檢測體內(nèi)產(chǎn)生的特異抗體,兩種方法均能判斷機體的感染狀況。目前對于金黃色葡萄球菌的測定主要進行了腸毒素的測定,方法以酶聯(lián)免疫吸附實驗為主,有膠體金方法,也有用親和素一生物素乳膠凝集實驗和免疫熒光實驗,但都有一定的局限性。
免疫學方法包括下面兩個部分:
(1)抗原抗體技術(shù)分析:抗原抗體技術(shù)是免疫技術(shù)中的核心部分,對于金黃色葡萄球菌檢測全菌免疫篩選抗體是很困難的事情,現(xiàn)在目前市場有的大多都是對金黃色葡萄球菌毒素類進行免疫得到的抗體,金黃色葡萄球菌毒素有12種,軍事醫(yī)學科學院生產(chǎn)的金黃色葡萄球菌毒素A、B、c的抗體。毒素抗體優(yōu)勢在于敏感度高,易于檢查,缺點毒素種類多,檢測其中幾種不具有普遍性。毒素分離工藝復雜,要得到純毒素成本比較高。
(2)免疫學方法技術(shù)分析:上述免疫學技術(shù)應(yīng)用最多的是酶聯(lián)免疫技術(shù)和膠體金側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)。酶聯(lián)免疫技術(shù)廣泛應(yīng)用于實驗室檢測,由于一次可以檢測多個樣本,此技術(shù)多用于體外診斷,目前也廣泛用于食品安全。膠體金技術(shù)由于操作簡單,檢測適度快等優(yōu)勢,在食品安全領(lǐng)域廣泛用于現(xiàn)場快速檢測。
基于免疫學方法的技術(shù)主要分為:酶聯(lián)免疫技術(shù)、膠體金側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)、免疫熒光技術(shù)、免疫沉淀技術(shù)、乳膠凝集技術(shù)、免疫磁珠技術(shù)。
3.分子生物學方法
金黃色葡萄球菌的致病力強弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶:腸毒素、血漿凝固酶、溶血素、殺白細胞素、表皮溶解毒素、毒性體克綜合重量毒素I等。而這些致病因子基因的鑒定(包括耐藥性相關(guān)基因、毒素基因、酶基因及多種特異性鑒別基因)使得分子生物學檢測成為近年來應(yīng)用于食品中致病微生物快速檢測的方法。
基于分子生物學方法的技術(shù)主要分為:聚合酶鏈式反應(yīng)PCR技術(shù)和實時熒光定量PCR(rtPCR)技術(shù)、生物芯片技術(shù)、測序技術(shù)。
分子生物學檢測技術(shù)是檢測技術(shù)的發(fā)展方向,是檢測技術(shù)的未來,從DNA、RNA角度深度檢測。但是由于檢測方法復雜,需要儀器設(shè)備及專業(yè)人員操作,對實驗室環(huán)境有要求,檢測成本高等因素,目前該技術(shù)沒有廣泛應(yīng)用。
針對市場上食品中金黃色葡萄球菌進行大批量的檢測,是一件很不容易的事情。目前市場上還沒有真正好的產(chǎn)品能夠?qū)瘘S色葡萄球菌進行快速檢測。首先要求檢測速度快,目前的方法大部分需要培養(yǎng),至少24~48小時,不利于現(xiàn)場檢測,48小時以上商家才能拿到檢測結(jié)果,才能進行市場銷售,熟食就沒有了新鮮度可言,所以檢測速度成了菌類包括金黃色葡萄球菌檢測的關(guān)鍵影響因素。其次是目前中國食品安全的重視度不夠,一般市場沒有相應(yīng)的檢測實驗室和檢測設(shè)備。上述需要儀器設(shè)備的檢測方法完全行不通。熟食和冷藏食品中金黃色葡萄球菌數(shù)量很少,在10個以內(nèi),為快速檢測增加了難度。而且人員素質(zhì)低,專業(yè)人員比例少是客觀存在的現(xiàn)實,不可能進行如分子生物學檢測之類的實驗,檢測成本問題也不可忽視,百姓不希望在買菜的同時附加上一大筆檢測費用。
解決關(guān)鍵性問題可以提高檢測速度,通過不斷的研究和總結(jié)金黃色葡萄球菌快速增殖的環(huán)境和條件,在增菌液中進行擴增,使菌數(shù)達到膠體金的檢測下限,用膠體金方法檢測,此方法檢測時間為4~10個小時(其中金黃色葡萄球菌擴增時間為4~10小時,檢測時間為3分鐘),操作簡單,不用任何實驗室儀器設(shè)備,檢測試劑盒價格低廉,比較適合金黃色葡萄球菌檢測初篩。
檢測膠體金試劑卡分兩種,一種是檢測金葡菌腸毒素ABC,另一種選取特異性菌壁蛋白,用基因工程方法合成抗原,對鼠進行免疫制出兩株單克隆抗體,用雙抗夾心法制成膠體金檢測卡,對于金黃色葡萄球菌屬檢測率為96%。特異性實驗證明與副溶血弧菌、鼠傷寒沙門氏菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌小川型、0139型及569B型等菌無交叉反應(yīng);假陽性率在5%以下、假陰性率在1%以下;同一批次的試紙條10次重復試驗結(jié)果一致。
一般來說,母體中的抗體是通過胎盤或初乳傳遞給出生幼子的,新生兒只有從母乳中才能獲得足夠量的抗體,以健康成長。因初乳中含有高濃度的免疫球蛋白,所以新生兒出生后的最初幾小時內(nèi)喂以初母乳,對其以后的生長發(fā)育、防病免疫都極為重要,這是任何其他物質(zhì)都無法替代的。
免疫學認為,哺乳動物的乳汁是機體免疫作用的產(chǎn)物。一個新生個體來到世界,會受到各種抗原,如細菌、病毒或毒素等的入侵,這時,機體就會產(chǎn)生相應(yīng)的“抗體”,即免疫球蛋白來抵抗??贵w與抗原結(jié)構(gòu)上具有互補性,兩者對應(yīng)結(jié)合后,可使抗原喪失活力,這就是免疫系統(tǒng)抗病的基本原理之一。
但這一反應(yīng)體系的建立需要一段時間,在此之前,初乳是哺乳動物的幼子獲得“被動免疫”的唯一途徑。只有獲得一定量的母親的初乳,嬰兒才能在降生初期有效地抵抗外界微生物的入侵,正常存活。
牛初乳有什么功效?
牛初乳是健康乳牛在產(chǎn)犢后5日內(nèi)所產(chǎn)的乳汁,可加工濃縮成固體粉末狀,其中主要含有免疫球蛋白、生長因子、脯氨酸多肽、牛磺酸、乳鐵蛋白,多種維生素以及鈣、鐵、鋅、硒等微量元素。免疫球蛋白可提高免疫力;生長因子可促進嬰兒胃腸道正常發(fā)育;脯氨酸多肽可激活細胞,促進其生長,在新生兒建立獨立的免疫反應(yīng)過程中起決定作用,且對腦神經(jīng)的生長發(fā)育、提高智力和強化視覺功能有重要作用。研究表明,牛初乳具有與母乳非常相似的成分與功能,吸收率高達90%。所以,對于沒有條件進行母乳喂養(yǎng)的嬰兒,牛初乳是不錯的選擇。
除了適用于嬰兒,牛初乳對成年人保健也有一定意義,最引人注目之處在于它獨特的免疫功能。牛初乳中的廣譜抗體及其他免疫因子有協(xié)同作用,能更加有效地預(yù)防和緩解疾病,促進細胞生長、組織修復和外傷痊愈,抗衰老。
牛初乳處處適用嗎?
雖然開發(fā)含牛初乳的功能性食品大有前景,但仍有專家認為,牛初乳確切的功效如何,尚存疑問。國外一項大型醫(yī)學研究表明,牛初乳中的免疫球蛋白對人體到底有多大效果目前尚無定論,還需大量臨床研究才能證明。因為大分子的免疫球蛋白空間結(jié)構(gòu)非常復雜,即使在加工、生產(chǎn)過程中不被破壞,在人體胃腸道中也會被酶消化失效,甚至可能引起過敏反應(yīng)。
而且,在牛初乳的使用中,也存在著種種誤區(qū)。有人把它當作“高級營養(yǎng)品”天天服用,還有愛美的媽媽放棄母乳喂養(yǎng),用牛初乳代替母乳長期喂養(yǎng)嬰兒……專家指出,食用牛初乳,應(yīng)注意以下幾點。
在購買牛初乳產(chǎn)品時,應(yīng)去大商場、超市,購買正規(guī)廠家經(jīng)檢驗合格的產(chǎn)品。
堅持母乳喂養(yǎng)。母乳的成分更加適合嬰兒,特別是免疫球蛋白的種類和數(shù)量,更易于嬰兒消化和吸收。
健康人不必食用牛初乳。因健康人的免疫功能正常,牛初乳不會產(chǎn)生太大作用,且價格昂貴。
藥學專業(yè)主要課程 主要課程:基本原理、思想道德修養(yǎng)、法律基礎(chǔ)、大學英語、高等數(shù)學、醫(yī)用物理學、計算機基礎(chǔ)、形態(tài)學概論、生理學、細胞生物學、分子生物學。
醫(yī)學免疫學、病理生理學、醫(yī)學微生物學、無機化學、有機化學、生物化學、定量分析、儀器分析、物理化學、基礎(chǔ)化學實驗、藥物化學、天然藥物化學、藥劑學、藥物分析、藥理學、毒理學基礎(chǔ)、藥物的波譜解析、藥事管理學、專業(yè)技能實驗等。
藥學專業(yè)就業(yè)前景 我國的藥學事業(yè)的發(fā)展也是非常迅猛的,許多藥品都得到了國際市場的認可,也與外國企業(yè)建立了合作關(guān)系,但在專業(yè)人才方面有稀缺,這表明藥學專業(yè)有很廣闊的發(fā)展前景。
社會對藥學才的需求正在增加,本專業(yè)的大學生就業(yè)率高達95%。制藥業(yè)發(fā)展較快,尤其是生活水平提高以后,人們對保健品的需求在增大,企業(yè)對藥學人才比較青睞。還有一塊就是生化藥品,這是一個新興也是尖端的行業(yè),發(fā)展前景很好。
藥學專業(yè)畢業(yè)生主要分配到制藥廠和醫(yī)藥研究所從事各類藥物開發(fā)、研究、生產(chǎn)質(zhì)量保證和合理用藥等方面的工作,也有很多人從事藥品銷售。
藥學專業(yè)就業(yè)方向 本專業(yè)學生畢業(yè)后可可以到制藥廠和醫(yī)藥研究所從事各類藥物開發(fā)、研究、生產(chǎn)質(zhì)量保證和合理用藥等方面的工作,藥學專業(yè)就業(yè)方向也有很多人從事藥品銷售。
從事行業(yè):
畢業(yè)后主要在制藥、醫(yī)療、新能源等行業(yè)工作,大致如下:
1 制藥/生物工程;
2 醫(yī)療/護理/衛(wèi)生;
3 新能源;
4 醫(yī)療設(shè)備/器械;
5 批發(fā)/零售。
從事崗位:
畢業(yè)后主要從事醫(yī)藥代表、銷售代表、產(chǎn)品經(jīng)理等工作,大致如下:
1 醫(yī)藥代表;
2 銷售代表;
3 產(chǎn)品經(jīng)理;
4 藥劑師;