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學(xué)習(xí)企業(yè)文化心得感悟 200x年是我們天元發(fā)展有限職責(zé)公司的“企業(yè)文化建設(shè)年”,銳意創(chuàng)新的時代要求鞭策著我們發(fā)奮培植先進的企業(yè)文化。我們對企業(yè)文化塑造就應(yīng)報一種什么樣的期望,企業(yè)文化究竟能夠給企業(yè)帶來什么成果?我認(rèn)為:企業(yè)文化建設(shè)的目的在于保證企業(yè)在不斷變化的環(huán)境中持續(xù)發(fā)展。
首先,企業(yè)文化塑造是為了使企業(yè)適應(yīng)不斷變化的環(huán)境。在企業(yè)文化塑造中,主要透過共同價值觀及理念的貫徹落實來增強對內(nèi)部的凝聚力。在天元,你總覺得自己是受尊重的,你不用擔(dān)心自己學(xué)不到東西,得不到重用。做大做強做優(yōu)企業(yè)的追求不斷地昭示著我們進取不息、追求卓越。追求卓越的核心思想就是創(chuàng)新。追求卓越表現(xiàn)了天元人永不自滿、永遠(yuǎn)進取、永遠(yuǎn)創(chuàng)新的生生不息的精神境界。作為天元的一員,企業(yè)的利益高于一切。
其次,企業(yè)文化是為了企業(yè)經(jīng)營績效的提高。企業(yè)文化要能夠“看得見”,我們要讓天元企業(yè)文化出此刻全公司的各個角落。不但要有能夠體現(xiàn)公司文化的辦公環(huán)境、建筑和設(shè)施,在辦公區(qū)、會議室、板報、內(nèi)刊等傳播媒介和公眾場合,更要注意時時宣傳和闡釋我們公司的文化,尤其是企業(yè)文化理念;企業(yè)文化還要讓員工“感受到”,員工的感受來自于切身的工作,與其相關(guān)的因素有領(lǐng)導(dǎo)風(fēng)格、績效考核、激勵機制、團隊關(guān)聯(lián)、培訓(xùn)體系、制度和規(guī)范等。對企業(yè)管理者來說,培養(yǎng)學(xué)習(xí)的文化,構(gòu)成學(xué)習(xí)的氛圍,提倡團隊合作,經(jīng)常與下屬溝通和交流,定期進行反思和感悟,這樣才能真正領(lǐng)會到文化的真諦;企業(yè)文化更要讓員工“自己做”,務(wù)必讓員工行動起來,即使是帶必須強制性的,但務(wù)必按照要求做,也就是進行“文化體驗”。在體驗時,是否思考能夠給員工一些利益,如簡單的溝通環(huán)境、更加靈活的激勵機制。這些細(xì)節(jié)能夠讓員工在實際工作中感受到文化的力量,好比我們在促銷中的“嘗一嘗”。
第三,企業(yè)文化是為了將企業(yè)的生命周期延長。我們要在狠抓公司各項管理的進程中,始終將企業(yè)文化建設(shè)貫穿其中,開展職工演唱會、詩歌朗誦、體育比賽等系列活動,幫忙職工陶冶情操、娛樂身心。商戰(zhàn)無情,隨著外來超市的不斷進入,零售業(yè)競爭硝煙彌漫。我們天元連鎖要在挑戰(zhàn)面前審時度勢,要迎難而上、穩(wěn)扎穩(wěn)打、步步推進,力求從商品、企業(yè),服務(wù)三個方面做大自己的品牌。以“高品質(zhì),多品種、低價位”為經(jīng)營宗旨,以“創(chuàng)石家莊人自己的連鎖品牌,做石家莊人自己的低價賣場”為己任,打造連鎖超市的核心競爭優(yōu)勢,行業(yè)創(chuàng)優(yōu)、區(qū)域創(chuàng)優(yōu)。同時構(gòu)建科學(xué)管理機制,成功的把打造學(xué)習(xí)型團隊、培育現(xiàn)代的企業(yè)文化、提升員工素質(zhì)作為企業(yè)創(chuàng)新發(fā)展的不竭之源。這樣既增強了企業(yè)的團隊精神和文化品位,構(gòu)成了天元特有的向心力,凝聚力,又激發(fā)了員工以企業(yè)為榮的學(xué)習(xí)力,創(chuàng)造力。
在新的一年中,我們就應(yīng)更加關(guān)注員工在企業(yè)中的成長,經(jīng)常舉辦業(yè)務(wù)培訓(xùn),將經(jīng)營中總結(jié)的經(jīng)驗和學(xué)習(xí)心得與他們分享,并采用外出參觀、跟班學(xué)習(xí)、組織文化活動等多種形式,提高員工的綜合素質(zhì),為他們發(fā)展帶給平臺。同時透過培訓(xùn)和企業(yè)文化的熏陶,使他們嚴(yán)格自律、刻苦學(xué)習(xí)、踏實苦干,在平凡的崗位上實現(xiàn)自身價值。正因只有具備智慧和激情才能讓我們的員工魅力持久。沒有文化支持的企業(yè)干不成大事,不去建立學(xué)習(xí)型組織的企業(yè)很可能被時代所淘汰。因此,把建立學(xué)習(xí)型組織與企業(yè)文化建設(shè)很好結(jié)合起來有著十分重要的好處。將培育進步的企業(yè)文化和發(fā)揮人的主體作用作為企業(yè)管理的主導(dǎo)環(huán)節(jié),在這樣一種企業(yè)文化的氛圍中,我們天元人相互學(xué)習(xí)、相互信任、相互支持,發(fā)奮“學(xué)習(xí)新知識、創(chuàng)造新業(yè)績、倡揚新風(fēng)尚、建設(shè)新生活”,使大家充分發(fā)揮個人的潛力,情緒舒暢地得到發(fā)展、得以創(chuàng)新,提升自己生命的價值,將企業(yè)規(guī)模做大、實力做強、形象做優(yōu)。
學(xué)習(xí)企業(yè)文化心得感悟
企業(yè)文化的作用在哪兒?說到底,恐怕在于提高企業(yè)的品位、提升員工的素養(yǎng)。這就要求企業(yè)文化要重“三品”,即品質(zhì)、品格與品行。
企業(yè)文化的品質(zhì),主要體現(xiàn)在企業(yè)的價值理念。價值理念即價值觀。價值觀是個“總開關(guān)”。它不僅反映一個企業(yè)立身處事的信念、傾向、主張與態(tài)度,而且對企業(yè)起著行為取向、評價標(biāo)準(zhǔn)、評價原則和尺度的作用。企業(yè)的這種價值理念,用通俗的話講,就是企業(yè)要奔向哪兒、目標(biāo)是什么?員工要成為一支什么樣的隊伍、愿景是什么?這是一個企業(yè)發(fā)展的“綱”。只有綱舉,才能目張;只有企業(yè)品質(zhì)好,才能經(jīng)得起風(fēng)吹浪打,耐得住時光磨礪。
企業(yè)文化的品格,主要反映在企業(yè)的精神支撐。精神支撐即企業(yè)的精神。精神是一種意識。意識不僅能反映客觀世界,而且能反作用于客觀世界。所以,精神具有能動性,其表現(xiàn)在于有活力,即“龍馬精神海鶴姿”;其本質(zhì)在于能超越,即“今勝于古,后勝于今”;其境界在于“與天地合一”,即人與自然和諧共處,企業(yè)發(fā)展與“綠色”共行。企業(yè)的這種精神,源于企業(yè)走過的路,發(fā)展于企業(yè)正在走著的路,同時,又激勵著企業(yè)將要走的路。這種精神,是一個企業(yè)的品性風(fēng)格,體現(xiàn)著一個企業(yè)的精氣神,預(yù)示著一個企業(yè)的明日興衰。
企業(yè)文化的品行,主要彰顯在企業(yè)的行為規(guī)范。行為規(guī)范即企業(yè)員工行為的準(zhǔn)則或原則。無疑,作為企業(yè)的一名員工,既有其傳統(tǒng)的行為或遺傳的行為,又有其情感的行為或即時的行為,更應(yīng)有其目標(biāo)的理性行為或價值的理性行為。要保證企業(yè)既定目標(biāo)的實現(xiàn),就應(yīng)該制定并遵循目標(biāo)的理性行為規(guī)范;要保證企業(yè)價值理念的實現(xiàn),就應(yīng)該規(guī)定并執(zhí)行價值的理性行為規(guī)范。這種目標(biāo)與價值的理性行為規(guī)范,既表現(xiàn)在立身處事上,又表現(xiàn)在行動舉止上,還表現(xiàn)在姿態(tài)風(fēng)度上。這種行為規(guī)范,是企業(yè)價值的心靈取向,是企業(yè)心靈的外在表現(xiàn),是企業(yè)要達(dá)目標(biāo)的理性選擇。
要使企業(yè)文化的品質(zhì)、品格、品行得以實現(xiàn),僅僅靠知曉并提出企業(yè)的價值理念、精神支撐、行為規(guī)范還不夠,必須要有相應(yīng)的方式方法。這個方式方法,不是靠讓廣大員工死記硬背某些提煉出來的概念、條文,而是要讓廣大員工理解并能自覺執(zhí)行這些理念、精神與行為要求。要做到這一點,員工最喜聞樂見的是靠大家“化”大家,即從員工中挖掘出典型案例、提煉出典型格言,從而用講故事的方法、用員工格言的方式使價值理念形象化、精神支撐口語化、行為規(guī)范具體化,以達(dá)到用身邊的事教育身邊的人、用身邊的人提升身邊的事的效果。
企業(yè)文化的品質(zhì)、品格、品行,一言以蔽之,是企業(yè)的品位。企業(yè)是一個經(jīng)濟組織,同時,作為社會上的一個單位,又可以說是一個社會組織。是經(jīng)濟組織,就要賺錢。賺錢要有道。黑心錢、昧心錢不僅不能賺,還要與之作斗爭。是社會組織,就要負(fù)責(zé)。不僅對企業(yè)內(nèi)的員工負(fù)責(zé),還要對與之關(guān)聯(lián)的供貨商、分銷商、社區(qū)負(fù)責(zé),更要對養(yǎng)育自己的消費者和使自己安身立命的國家負(fù)責(zé),做到既要承擔(dān)好公認(rèn)的職責(zé),又要勇挑各方期待的職責(zé),從而使企業(yè)“不搖香已亂,無風(fēng)花自飛”。也就是說,通過重企業(yè)文化的“三品”,不僅使企業(yè)強,更使企業(yè)“香”,且香“飛”千里,行得遠(yuǎn)、走得久。
學(xué)習(xí)企業(yè)文化心得感悟 全新的企業(yè)文化公布了,作為一名網(wǎng)新人,我更加清楚地了解了公司定位、目標(biāo)、方向和發(fā)展思路。一個人創(chuàng)造不了文化,一件事不能形成文化,網(wǎng)新文化關(guān)切每一個人,每一件事。學(xué)習(xí)企業(yè)文化的同時,我對當(dāng)中的管理和團隊有所感觸。
但是在實際工作中也有一些不符合企業(yè)文化精神的做法,在此想談?wù)勎业目捶ā?/p>
關(guān)于部門間協(xié)調(diào)工作的問題。
我們客服部經(jīng)常接觸運管、財務(wù)、資質(zhì)組,我發(fā)現(xiàn)在部門協(xié)調(diào)性的工作中經(jīng)常會遇到經(jīng)辦人態(tài)度不好、速度慢、流程復(fù)雜多變、各自為政等等情況,導(dǎo)致不同的部門之間有一堵無形的墻。例如又一次在客戶臨時要辦理續(xù)費,我去財務(wù)開發(fā)票,但是開票的前提是訂單已審,客戶總公司的財務(wù)一個月來報一次推廣費用,錯過了就要到下個月。在hi上溝通無效的情況下我就去運管部說明情況,但是他們講我每次都上去催訂單,很不理解。
建議建立一套應(yīng)急機制,將此類情況列入應(yīng)急流程,保障客戶利益。跨部門工作是正常的事情,如果不打破交流障礙會影響整個公司工作效率和運營速度。
關(guān)于崗位職責(zé)范圍界定的問題。
上次公司客戶答謝會,我有客戶同意會場續(xù)費領(lǐng)禮品,當(dāng)時簽了續(xù)費合同。我把合同拿給財務(wù),申請拿禮品,但是財務(wù)堅持認(rèn)為我的合同金額是自己臨時寫上去的,不像真的。拒絕給我禮品,導(dǎo)致我的工作很被動,后來花了一番周折才解決了。我認(rèn)為財務(wù)的工作職責(zé)是看到合同當(dāng)即確認(rèn),如果合同是假,導(dǎo)致的后果應(yīng)該是我來承擔(dān)。如果我交了合同他不給確認(rèn),那是他沒有搞清自己的工作職責(zé)。
建議公司明確各個崗位的職責(zé)范圍,在崗人員應(yīng)當(dāng)十分清楚自己該做什么,不能以自己的主觀判斷影響各個部門的正常工作。
關(guān)于公司政策的連續(xù)性和穩(wěn)定性問題。
公司續(xù)費的禮品政策經(jīng)常無故中斷,或者變更禮品檔次。禮品作為我們客服做好客戶關(guān)系的有效方法,有的客戶很看重。經(jīng)常我們與客戶是在續(xù)費前就與客戶確認(rèn)好禮品事宜,但是客戶打完款后政策又變了,我們不好跟客戶交代。一方面影響客服在客戶心中的形象,另外也阻礙我們的工作進度。
學(xué)習(xí)企業(yè)文化心得感悟 公司企業(yè)就好比像一艘行駛在大海之中的扁舟,只有大伙齊心協(xié)力、共謀劃策、凝成一股神,心往一處想、力往一處使,才能穩(wěn)步快速地達(dá)到勝利輝煌的彼岸。
只有公司企業(yè)在不斷茁壯成長、公司企業(yè)獲得輝煌的成績時,才有自己穩(wěn)步向前發(fā)展的機會和平臺。公司是我家,要做到廠興我榮、廠衰我恥。要以集體利益為重,要會舍小家為大家。要與企業(yè)的興旺壯大共同成長進步。與公司企業(yè)共命運,共謀更大的發(fā)展。要學(xué)之所用,充分發(fā)揮自己的專業(yè)技能專長。
在工作中要安份守紀(jì)、勤勤懇懇做人、踏踏實實做事。要有積極向上奮發(fā)進取樂觀的心。對待工作事情要有軍人般的氣質(zhì)與氣魄,要學(xué)習(xí)遵照軍人般的紀(jì)律和習(xí)性。忠心樂觀高興的服從領(lǐng)導(dǎo)安排的工作任務(wù),交代的事情要按質(zhì)按量按時認(rèn)認(rèn)真真的完成好。愛崗敬業(yè)、團隊意識時刻牢記于心。多與領(lǐng)導(dǎo)、同事溝通交流學(xué)習(xí),虛心學(xué)習(xí)。要不斷地學(xué)習(xí)新知識新技術(shù),電子電器技術(shù)產(chǎn)品是在不斷飛速的發(fā)展,唯有給自己不停不斷地充電,以求完善自己學(xué)到更多的知識本領(lǐng),才能讓自己立于社會不敗之地。在生活工作中多多地問自己做得怎么樣,多站在公司立場想想,捫心自問。
對有利于公司企業(yè)健康良好穩(wěn)步發(fā)展的好的意見建議要及時勇于提出來,嚴(yán)謹(jǐn)對待工作,在工作上要認(rèn)認(rèn)真真、一絲不茍。工作之中要有豪放的氣概、暢所欲言、性格可熱情活潑開朗,做到與全公司領(lǐng)導(dǎo)同事和睦融洽相處、共同進步。
企業(yè)文化是一個包含企業(yè)行為準(zhǔn)則、企業(yè)信念、企業(yè)價值觀的復(fù)合體。企業(yè)文化建設(shè)是實施企業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略和提高企業(yè)經(jīng)營管理水平的有效途徑,是激勵員工積極性和創(chuàng)造性的內(nèi)在動力,是提高企業(yè)市場競爭力的重要法寶,是保證企業(yè)長盛不衰的核心力量,是塑造企業(yè)形象的有效手段。每個成功的企業(yè),都有自己的企業(yè)文化,一個企業(yè)如果想發(fā)展壯大,就必須依靠企業(yè)文化來增強員工的凝聚力。良好的企業(yè)文化,既有利于公司的發(fā)展,也有利于員工個人的發(fā)展,好的企業(yè)文化,能限度的激發(fā)員工的潛能,創(chuàng)造的經(jīng)濟效益和社會效益。
不灑汗水的人就不可能收獲,既然選擇了自己的事業(yè),那么你就必須準(zhǔn)備為之付出代價---大量的心血和汗水。創(chuàng)業(yè)是很難的,它不屬于那些貪圖安逸享樂的人,一步一個深深的腳印好好的努力吧。抓住今天,你就會擁有明天。把自己的興趣和愛好帶到工作之中來。
學(xué)習(xí)企業(yè)文化心得感悟
俗話說得好:“女怕嫁錯郎,男怕入錯行”,找一份工作容易,而找一份好的、適合自己發(fā)展前途的好工作卻并不那么容易,而認(rèn)真務(wù)實堅持做好一份工作也不是一朝一夕的事情。因此務(wù)必認(rèn)真對待、珍惜自己發(fā)奮爭取得來的工作機會。這天不發(fā)奮工作,而就意味著明天要發(fā)奮找工作了。
公司企業(yè)就好比像一艘行駛在大海之中的扁舟,只有大伙齊心協(xié)力、共謀劃策、凝成一股神,心往一處想、力往一處使,才能穩(wěn)步快速地到達(dá)勝利輝煌的彼岸。
只有公司企業(yè)在不斷茁壯成長、公司企業(yè)獲得輝煌的成績時,才有自己穩(wěn)步向前發(fā)展的機會和平臺。公司是我家,要做到廠興我榮、廠衰我恥。要以群眾利益為重,要會舍小家為大家。要與企業(yè)的興旺壯大共同成長進步。與公司企業(yè)共命運,共謀更大最大的發(fā)展。要學(xué)之所用,充分發(fā)揮自己的專業(yè)技能專長。
在工作中要安份守紀(jì)、勤勤懇懇做人、踏踏實實做事。要有用心向上奮發(fā)進取樂觀的心。對待工作事情要有軍人般的氣質(zhì)與氣魄,要學(xué)習(xí)遵照軍人般的紀(jì)律和習(xí)性。忠心樂觀高興的服從領(lǐng)導(dǎo)安排的工作任務(wù),交代的事情要按質(zhì)按量按時認(rèn)認(rèn)真真的完成好。愛崗敬業(yè)、團隊意識時刻牢記于心。多與領(lǐng)導(dǎo)、同事溝通交流學(xué)習(xí),虛心學(xué)習(xí)。要不斷地學(xué)習(xí)新知識新技術(shù),電子電器技術(shù)產(chǎn)品是在不斷飛速的發(fā)展,唯有給自己不停不斷地充電,以求完善自己學(xué)到更多的知識本領(lǐng),才能讓自己立于社會不敗之地。在生活工作中多多地問自己做得怎樣樣,多站在公司立場想想,捫心自問。
對有利于公司企業(yè)健康良好穩(wěn)步發(fā)展的好的意見推薦要及時勇于提出來,嚴(yán)謹(jǐn)對待工作,在工作上要認(rèn)認(rèn)真真、一絲不茍。工作之中要有豪放的氣概、暢所欲言、性格可熱情活潑開朗,做到與全公司領(lǐng)導(dǎo)同事和睦融洽相處、共同進步。
企業(yè)文化是一個包含企業(yè)行為準(zhǔn)則、企業(yè)信念、企業(yè)價值觀的復(fù)合體。企業(yè)文化建設(shè)是實施企業(yè)發(fā)展方法和提高企業(yè)經(jīng)營管理水平的有效途徑,是激勵員工用心性和創(chuàng)造性的內(nèi)在動力,是提高企業(yè)市場競爭力的重要法寶,是保證企業(yè)長盛不衰的核心力量,是塑造企業(yè)形象的有效手段。每個成功的企業(yè),都有自己的企業(yè)文化,一個企業(yè)如果想發(fā)展壯大,就務(wù)必依靠企業(yè)文化來增強員工的凝聚力。良好的企業(yè)文化,既有利于公司的發(fā)展,也有利于員工個人的發(fā)展,好的企業(yè)文化,能最大限度的激發(fā)員工的潛能,創(chuàng)造最大的經(jīng)濟效益和社會效益。
不灑汗水的人就不可能收獲,既然選取了自己的事業(yè),那么你就務(wù)必準(zhǔn)備為之付出代價---超多的心血和汗水。創(chuàng)業(yè)是很難的,它不屬于那些貪圖安逸享樂的人,一步一個深深的腳印好好的發(fā)奮吧。抓住這天,你就會擁有明天。把自己的興趣和愛好帶到工作之中來。
學(xué)習(xí)企業(yè)文化心得感悟
前不久,我在某報上讀到這樣一則消息:海爾人在接待參觀者的整個過程中,主人總是堅持面朝著參觀者邊倒行邊介紹情況,許多參觀者對這種倒行工作法費解,時常有人問:你們這樣做是不是有點難受 但聽到的回答卻總是一樣的,面對你們是一種尊重。大家知道,海爾集團是在海內(nèi)外享有盛譽的大型國際化企業(yè),海爾之所以能快速成長為企業(yè)巨人,關(guān)鍵因素就是因為它錘煉形成了富有自身特色的企業(yè)文化,并且使之在職工心中深深地扎了根,不斷開出芬芳的花朵,結(jié)出豐碩的果實,煥發(fā)出源源不斷的生機和活力。海爾現(xiàn)象及其培育的企業(yè)文化已成為許多專家、企業(yè)關(guān)注和研究的焦點,成為人們前進的路標(biāo)和旗幟。
說到這里也許就會有人問:企業(yè)文化真的有那么神奇嗎 到底什么是企業(yè)文化呢 專家已經(jīng)給出了定義:企業(yè)文化是企業(yè)在長期的生產(chǎn)經(jīng)營活動中創(chuàng)造的具有企業(yè)特色的物質(zhì)財富和精神財富的總和,它對外是一面旗幟,對內(nèi)是一種向心力,是企業(yè)的靈魂和持久動力。企業(yè)文化包括精神文化、制度文化和物質(zhì)文化。其中,精神文化又稱企業(yè)理念,是企業(yè)文化的精髓,處于核心地位。
近期我有幸參加了在xx市舉辦的 “全國中小學(xué)德育管理與班主任工作技能提升高級研修班”的學(xué)習(xí)。在這次學(xué)習(xí)中,我們聆聽了華林飛老師的《關(guān)愛學(xué)生需要教育智慧》、田麗霞老師的《班級管理中的辯證法》、李鳳遐老師的《用班主任所有的愛去成就學(xué)生精彩的未來》、鄭學(xué)志老師的《班級自主教育管理解讀》精彩報告。通過這兩天的學(xué)習(xí),我感觸很深,同是戰(zhàn)斗在教育戰(zhàn)線上的同仁,我們做的遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠,對教育的理解還處于較淺的層次,有很多的做法過于簡單,沒能從長遠(yuǎn)的發(fā)展眼光看教育。下面就談?wù)勎业囊稽c學(xué)習(xí)感受。
一、以善致善,讓學(xué)生心靈接受洗禮
華老師講了這樣一個教育案例:在與家長的接觸中,我了解到很多學(xué)生對家長不尊重家長,而且動輒以離家出走相威脅。結(jié)合學(xué)校的“感恩教育”我準(zhǔn)備召開一次以“關(guān)愛父母”為主題的班會。班會前我正好聽到幾個女生圍在一起談?wù)撜f,某一女生削鉛筆把手指削了一個深口子,流了很多血,可她媽比她哭得還厲害。班會課時,我就以此事入題問那女生:你手指削破了,感到疼嗎?(生:肯定疼)你媽媽為什么哭?(生:肯定是為我的痛而痛)。我問全班同學(xué)如果你們的媽媽切菜時手指被切了,你們會感到同樣的疼痛嗎?(生不語)是??!我們每個同學(xué)受傷都會感到疼痛,那么,別人受傷,你會感到疼痛嗎?知道自己的痛就要知道別人的痛,悲憫自己的苦難就要同情他人的苦難,關(guān)愛自己,同時要關(guān)愛他人。這就是孟子所說的“老吾老以及人之老”。今天就以此為話題,討論一下如何處理親子關(guān)系。然后,我在屏幕上打出下列畫面和文字:故事一 撒哈拉沙漠中,母駱駝為了使即將渴死的小駱駝喝到夠不著的深潭里的水,而縱身跳入潭中,讓水漲起來,以母死來換取子生。故事二一條鱔魚在油鍋中被煎時始終弓起身子,是為了保護腹中的小鱔魚。故事三 在十幾層樓高的電梯上勞動的一男一女兩個建筑工人,在電梯鐵鏈斷裂的瞬間同時抓住一根木條,而這根木條不能承受兩個人的重量,眼看就要斷裂,那女人對男人說她是兩個孩子的母親,這個男人毅然松了手,用生命換取那母親的存活。聽完故事,讓學(xué)生談感想,這一節(jié)班會下來,學(xué)生的心靈受到了洗禮,靈魂得到了升華。我趁機倡議開展短信獻(xiàn)恩師、賀卡送雙親等競賽活動,從中評出最有人情味的短信發(fā)給師長并予以獎勵。并要求學(xué)生在家要幫爸爸媽媽做幾件家務(wù)事。還要求每一位同學(xué)每一周要為班級做一件好事,而且要在周末的班會上匯報,并記入每個人的成長檔案。
華老師還講了一個案例: 我一直認(rèn)為,90后群體不缺乏愛,他們是被愛包圍了的一群,他們?nèi)狈Φ氖侨绾伟褠坌膫鬟f給別人。我在班上持續(xù)開展愛心傳遞活動,確實收到了一些好的效果。如我班上的門軸響聲大,有同學(xué)把機油帶來注入其中;黑板擦擦黑板灰多,有同學(xué)用毛巾擦;進門腳步輕輕,不會驚擾他人等蔚成風(fēng)氣。在日常生活中,我又積極倡導(dǎo)師生關(guān)系的和諧與溫馨,我要求每天老師上課有人幫她倒水,有人幫她抹講臺,有人幫她拿教具。見了老師要問好,離開老師要再見,老師上課有綠茶,節(jié)日講臺放鮮花。為了給學(xué)生樹立榜樣,我還主動承諾在校內(nèi)見到學(xué)生向我問好,我一定雙腳并攏向?qū)W生一鞠躬并答謝。有學(xué)生故意逗我,一見我就問好,看見我一本正經(jīng)地答禮,便偷著樂,我也跟著樂。有一次,一位值日老師老師驚奇的對我說:“你有什么高招?你們班的朱某某以前見了老師理都不理,今天居然在走廊里對我喊老師好?!?/p>
【摘要】 目的: 探討新生兒外周血及胃液HBeAg, HBsAg等標(biāo)志物與乙型肝炎病毒宮內(nèi)感染的關(guān)系. 方法: 連續(xù)收集母親外周血標(biāo)本和新生兒外周血及胃液標(biāo)本,ELISA檢測HBeAg, HBsAg, PCR方法檢測HBV DNA;以ABBOTT試劑檢測新生兒HBsAg. 采用χ2檢驗等統(tǒng)計學(xué)方法對結(jié)果進行統(tǒng)計分析. 結(jié)果: 共收集133例母親、新生兒血標(biāo)本和胃液標(biāo)本. 58例胃液HBsAg陽性,9例胃液HBeAg陽性. HBV DNA均陰性,其中發(fā)生宮內(nèi)感染5例. 統(tǒng)計學(xué)檢驗顯示新生兒外周血HBeAg、胃液HBsAg與乙肝病毒宮內(nèi)感染有關(guān)系,而胃液HBeAg陽性與乙肝病毒宮內(nèi)感染沒有關(guān)系 (P=0.415). 結(jié)論: 新生兒外周血HBeAg與胃液HBsAg與乙肝病毒宮內(nèi)感染有關(guān);但是由于所有標(biāo)本HBV DNA均陰性,尚不支持乙肝病毒宮內(nèi)感染的胃液途徑.
【關(guān)鍵詞】 肝炎表面抗原,乙型;宮內(nèi)傳播;肝炎,乙型
【Abstract】 AIM: To estimate the relationship of hepatitis B virus (HBV) intrauterine trarsmission to HBeAg or HBsAg in neonatal peripheral serum or gastric aspirates. METHODS: Gastric samples from neonates and serum samples from both mothers and neonates were consecutively collected and detected with ELISA for HBsAg or HBeAg and with PCR for HBV DNA in gastric samples. Chi square test and Fishers exact test were employed to find out the significance. RESULTS: A total of 133 neonatal gastric aspirates were collected and 58 of them were detected positive for HBsAg, 9 positive for HBeAg. All were detected negative for HBV DNA, 5 had intrauterine infection. Statistical analysis indicated that association of HBsAg in gastric aspirates, HBeAg in peripheral serum with HBV intrauterine transmission was significant, but HBeAg in gastric aspirates was not. CONCLUSION: Although HBsAg in gastric aspirates and HBeAg in peripheral serum are associated with HBV intrauterine transmission, HBV DNA was not found in gastric aspirates. Therefore, neonatal acquired HBV by gastric fluid routine is not conclusive.
【Keywords】 hepatitis B surface antigens; intrauterine transmission; hepatitis B
0引言
乙型肝炎(hepatitis B, HB)是一種嚴(yán)重危害人類健康的傳染病. 我國是乙肝高發(fā)區(qū),人群感染率高達(dá)60%. 乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen, HBsAg)攜帶者亦高達(dá)10%~15%. 乙型肝炎年病毒(Hepatitis B virus, HBV)攜帶者超過1.2億,其中大多數(shù)為母嬰傳播所致[1]. 目前的危險因素研究都是以母親為核心進行的,而新生兒的乙肝標(biāo)志物還沒有進行過深入研究. Chen等[2]首次探討了新生兒胃液HBsAg與HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系,他們發(fā)現(xiàn)發(fā)生宮內(nèi)感染新生兒其胃液HBsAg均陽性,但其聯(lián)系的強度、意義尚待深入研究.
1對象和方法
1.1對象
200210/200407陜西省婦幼保健院待產(chǎn)的、HBsAg陽性孕婦及其新生兒為研究對象. 采集孕婦肘靜脈血和新生兒股靜脈血,離心分離血清,低溫保存. 新生兒出生后、進食前立即收取胃液,低溫保存?zhèn)溆?
1.2方法
新生兒胃液HBeAg, HBsAg檢測均采用ELISA方法進行;診斷試劑盒購于科華生物工程有限公司(上海);胃液標(biāo)本HBV DNA檢測采用PCR方法,引物及擴增方法參見文獻(xiàn)[3]. 新生兒股靜脈血HBsAg采用Abbott 公司的HBsAg診斷試劑進行檢測,檢測程序及結(jié)果閱讀在Abbott System上自動完成,以S/N≥5為宮內(nèi)感染診斷標(biāo)準(zhǔn).
2結(jié)果
2.1一般情況共收集臨床檢驗HBsAg陽性孕婦133例及其所產(chǎn)新生兒135例. 新生兒血清或胃液不足或已不適于ELISA檢測2例,故實際檢測的病例數(shù)為133例.
2.2新生兒胃液檢測結(jié)果和外周血ELISA檢測結(jié)果依據(jù)我們的診斷標(biāo)準(zhǔn),共有5例新生兒發(fā)生宮內(nèi)感染. 133例新生兒中有58例胃液HBsAg陽性,75例胃液HBeAg, HBsAg均陰性. 胃液HBeAg陽性9例,胃液HBsAg和HBeAg同時陽性7例,新生兒胃液HBV DNA PCR檢測均為陰性.
2.3胃液HBsAg陽性新生兒外周血及其母親外周血HBeAg檢測我們對58例胃液HBsAg陽性新生兒外周血及其母親外周血也檢測了HBeAg. 共檢測到15例HBeAg陽性孕婦. 這15例HBeAg陽性孕婦所產(chǎn)的16例新生兒有11例HBeAg陽性(68.75%,11/16). 精確檢驗顯示新生兒胃液HBsAg與乙肝病毒宮內(nèi)感染有關(guān)系(P=0.015,表1),而HBeAg陽性與乙肝病毒宮內(nèi)感染沒有關(guān)系 (P=0.415,表2). 本次調(diào)查的57名孕婦中,HBeAg陽性孕婦15例(26.31%),發(fā)生宮內(nèi)感染3例. 精確檢驗顯示母親、新生兒HBeAg都與乙肝病毒宮內(nèi)感染有關(guān)(表3). 表1新生兒胃液HBsAg與宮內(nèi)感染的關(guān)系(略)表2新生兒胃液HBeAg與宮內(nèi)感染的關(guān)系(略)表3外周血HBeAg陽性對乙肝病毒宮內(nèi)感染的關(guān)系(略)
2.4新生兒外周血、胃液HBsAg, HBeAg分布差異比較 新生兒外周血標(biāo)本HBeAg的傳播率為68.75%(11/16),HBsAg宮內(nèi)傳播率為5.17%(3/58);而在胃液標(biāo)本中HBeAg的傳播率為31.03%(9/29),HBsAg的陽性率為43.61%(58/133). χ2檢驗顯示HBeAg在新生兒外周血、胃液中的分布相一致(P=0.62);而HBsAg在新生兒外周血、胃液中的分布是不一致(P
3討論
Wang等[3]在7例HBeAg陽性母親的新生兒靜脈血檢測到HBeAg,且新生兒HBeAg滴度都低于他們的母親,本研究對部分新生兒股靜脈血血清HBeAg和母親血清HBeAg進行檢測,共檢出16例陽性母親,其所產(chǎn)新生兒有11例HBeAg陽性. 新生兒外周血HBeAg陽性率明顯高于外周血HBsAg陽性率,提示HBeAg和HBsAg跨越胎盤的機制可能不同.
胎兒發(fā)育過程中如果在宮內(nèi)暴露于一些免疫源性物質(zhì)則易引起免疫耐受. Chen等[4]用HBeAg決定多肽表位p120131刺激HBeAg轉(zhuǎn)基因雌性小鼠的子代(F1)和正常小鼠,發(fā)現(xiàn)HBeAg轉(zhuǎn)基因小鼠的子代小鼠抗原刺激后淋巴細(xì)胞增生能力明顯低于正常小鼠,提示宮內(nèi)暴露于HBeAg可引起免疫耐受[5]. 本次研究發(fā)現(xiàn)不僅驗證了母親HBeAg陽性仍然是HBV宮內(nèi)感染的危險因素[1];同時也發(fā)現(xiàn)新生兒HBeAg與HBV宮內(nèi)傳播也有關(guān). HBeAg是否是通過影響胎兒免疫系統(tǒng),進而增加感染的風(fēng)險,有待于深入研究.
Chen等[6]對新生兒胃液進行HBsAg檢測,發(fā)現(xiàn)宮內(nèi)感染新生兒其胃液HBsAg均陽性. 本次研究結(jié)果顯示新生兒胃液HBsAg與HBV宮內(nèi)感染有關(guān)系(P=0.015),而胃液HBeAg陽性與HBV宮內(nèi)感染沒有關(guān)系 (P=0.415). 同時,本次研究結(jié)果顯示胃液標(biāo)本HBV DNA全陰性,而單一的HBsAg陽性還不足以說明完整的HBV病毒顆粒的存在. 因此,尚不支持HBV宮內(nèi)感染的消化道途徑,新生兒胃液HBsAg陽性與HBV宮內(nèi)感染的關(guān)系也有待于深入的研究.
【參考文獻(xiàn)】
[1]Xu DZ, Men K, Choi BC, et al. Risk factors and mechanism of transplacental transmission of hepatitis B virus: A casecontrol study [J]. J Med Virol 2002;67:20-26.
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[3]邵中軍,徐德忠,徐劍秋,等. 孕期性行為與乙型肝炎病毒宮內(nèi)感染關(guān)系的病例對照研究[J].中華流行病學(xué)雜志,2005,26(4):232-235.
[4]Wang JS, Zhu QR. Infection of the fetus with hepatitis B e antigen via the placenta[J]. Lancet, 2000,355(9208):989.
1.從美術(shù)作品中感悟古人對自然的消極適應(yīng)
古人對大自然的關(guān)系是怎樣的呢?我們無法與古人對話,但可以讓學(xué)生欣賞古人的美術(shù)作品,從中感悟古人對自然的認(rèn)識。
我首先讓學(xué)生欣賞原始洞窟壁畫的圖片,從而引領(lǐng)他們走進原始社會。發(fā)現(xiàn)于19世紀(jì)的拉科洞窟壁畫和阿爾塔米洞窟壁畫,是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的人類最早的繪畫藝術(shù)作品,其中以《 受傷的野牛 》《 阿爾塔米拉野山羊 》這兩幅為代表作品。這些壁畫最早創(chuàng)作于舊石器晚期,距今已有3萬年歷史。這些作品多以動物形象為主,其中《 受傷的野牛 》帶有某種符咒的意味,作者把受傷的野牛畫在洞窟上,似乎意味著人們經(jīng)過搏斗才獲得了一頭野牛。通過對這些作品的欣賞,學(xué)生可以認(rèn)識到原始社會早期的居住和生活環(huán)境的艱苦和險惡,明白這是由于原始社會人類生產(chǎn)力極度低下造成的。
到了封建社會,人們認(rèn)為自然災(zāi)害以及各種疫病都是神操作的結(jié)果,所以古人因敬畏大自然而創(chuàng)作了大量的圖騰藝術(shù)和神殿神廟。對此,我展示了古希臘雅典衛(wèi)城巴底農(nóng)神廟的圖片,還有我國一些邊遠(yuǎn)山寨中圖騰柱的圖片給學(xué)生欣賞。讓學(xué)生感悟古人因敬畏自然而對自然采取的消極適應(yīng)態(tài)度。通過欣賞原始洞窟壁畫、神殿神廟文化以及封建圖騰藝術(shù)的圖片,能讓學(xué)生深切感悟到古人對自然的極度依賴心理。
2.從美術(shù)作品中感悟近代人對自然的貪婪掠奪
隨著封建社會的衰落和資本主義的發(fā)展,人類社會進入了工業(yè)革命時代,人類對大自然的意識和行為相應(yīng)地也發(fā)生巨大的變化。我利用多媒體,展示了收藏在德國柏林國立博物館門采爾畫的油畫《 軋鋼廠 》,為學(xué)生推開了工業(yè)革命的大門。這幅畫畫的是軋鋼車間繁忙的生產(chǎn)景象。我先讓學(xué)生回顧工業(yè)革命的歷程再結(jié)合這幅畫談感想。結(jié)果學(xué)生認(rèn)識到這幅作品既是19世紀(jì)末歐洲工業(yè)發(fā)展的頌歌,也是勞動者淪為勞動機器的寫照。在此基礎(chǔ)上,我又根據(jù)畫面內(nèi)容,引導(dǎo)學(xué)生思考工廠的原料消耗及排泄污染的情況。學(xué)生透過油畫,仿佛看到了一方面人類在對自然資源進行瘋狂地開采和掠奪,另一方面大自然又被人類排放的廢氣廢物無情地污染。于是他們認(rèn)識到,工業(yè)革命是一把雙刃劍,它在創(chuàng)造物質(zhì)文明的同時,又在不斷地破壞周圍的生態(tài)環(huán)境。
接著,我又用多媒體給學(xué)生展示了我國杰出畫家蔣兆和的國畫《 流民圖 》,讓學(xué)生思考這幅畫反映的歷史背景。造型樸素、表情逼真的《 流民圖 》所營造的悲傷氣氛一下子把學(xué)生帶入了深沉的思索中。結(jié)合這幅畫的創(chuàng)作年代,學(xué)生明白了整幅畫描繪的是在日本侵略者鐵蹄下背井離鄉(xiāng)、流離失所的中國難民的悲慘處境。我讓學(xué)生結(jié)合歷史知識,分析日本侵華的原因。學(xué)生經(jīng)過討論,認(rèn)為侵華的原因主要有三點:首先,,稱霸太平洋是日本帝國主義的既定國策;其次,受世界性資本主義經(jīng)濟危機的影響,當(dāng)時日本經(jīng)濟陷入低谷,侵華是其轉(zhuǎn)移國內(nèi)矛盾的措施之一;再次,日本是一個島國,自然資源匱乏,它渴望掠奪中國乃至整個亞洲的自然資源。通過分析,學(xué)生明白了為了掠奪自然資源,人類竟然會以強凌弱發(fā)動侵略戰(zhàn)爭。
通過欣賞和評述《 軋鋼廠 》《 流民圖 》,學(xué)生認(rèn)識到人類在向大自然索取資源的同時還在瘋狂地破壞自然;認(rèn)識到人類為了掠奪自然資源可以不惜發(fā)動戰(zhàn)爭,從而暴露出自己貪婪的本性。
3.從美術(shù)作品中感悟當(dāng)代人與自然的和諧發(fā)展
翻過古代和近代這一頁,我又用圖畫把學(xué)生帶進了當(dāng)代生活。先用多媒體展示我國漫畫家楊昆原的漫畫《 大買主 》。這幅作品把地球塑造成一個巨大的禿發(fā)人,通過擬人的手法讓地球和普通人在一起排隊購買“101毛發(fā)再生精”。原來地球也想用藥物來刺激毛發(fā)的生長,而它的毛發(fā)就是地球的綠色植被。這幅畫的表現(xiàn)方法可謂生動有趣。在此基礎(chǔ)上,我又給學(xué)生展示了一系列提倡節(jié)能減排的環(huán)保美術(shù)作品,讓學(xué)生明白保護自然環(huán)境的重要性。
接著,我又給學(xué)生欣賞美術(shù)作品《 熱帶伊甸園 》。這幅畫描繪了英國的一座大型植物展覽館的情形。展覽館建在英格蘭西南部一座曾被瘋狂開采過而廢棄的礦區(qū)上,如今它已成為世界最大的溫室,種植了來自世界各地的數(shù)萬種植物。我告訴學(xué)生,這個展覽館是園林建設(shè)和環(huán)保理念的完美結(jié)合,體現(xiàn)了人與自然和諧相處的關(guān)系,因此它也被稱為“通往植物與人類世界的大門”。
國外有體現(xiàn)環(huán)保理念的展覽館,我們國內(nèi)有沒有類似的地方呢?通過展示上海世博會的會徽以及“海寶”吉祥物的圖片,又把學(xué)生領(lǐng)進了2010年上海世博園。通過視頻,我先讓學(xué)生感受上海世博園的宏大與精彩,再讓學(xué)生領(lǐng)悟到這不僅是一次經(jīng)濟、科技、文化、藝術(shù)的世界盛會,更是一件把環(huán)保理念變成現(xiàn)實的典范之作。因為這次世博會,從建筑到展品、從展覽內(nèi)容到布展方式都充分體現(xiàn)了節(jié)能、減排、綠色、低碳的環(huán)保理念。通過上海世博會的相關(guān)照片和美術(shù)作品,學(xué)生接受了當(dāng)代人應(yīng)該與自然和諧發(fā)展的觀念。
【關(guān)鍵詞】 骨髓細(xì)胞;成骨細(xì)胞;生長物質(zhì);組織工程
0引言
骨骼損傷、腫瘤等導(dǎo)致的骨缺損是骨科每天都要面臨的問題,臨床醫(yī)生通常是通過自體或異體骨移植方法來解決缺損問題,但這種方法存在著來源有限、增加創(chuàng)傷、排斥反應(yīng)及疾病傳播等問題. 由于利用組織工程學(xué)原理與方法再生的骨組織植入體內(nèi)無免疫排斥的危險且來源充足,因此它的優(yōu)勢逐漸得到認(rèn)同[1] . 近年來,組織工程迅猛發(fā)展并且是目前公認(rèn)的最有可能在臨床取得實際效益的研究領(lǐng)域之一[2]. 但是要真正廣泛應(yīng)用于臨床,還必須解決好組織工程的三大關(guān)鍵問題即種子細(xì)胞、可降解的生物支架及生長因子. 骨髓來源的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(marrow stromal stem cells, MSCs)由于取材容易,易于體外培養(yǎng)和誘導(dǎo),是目前最有前途成為組織工程種子細(xì)胞來源的細(xì)胞[3-4]. 組織工程是將細(xì)胞與材料復(fù)合,從而構(gòu)建植入人體的活材料. 在此過程中,目的細(xì)胞的生長調(diào)控是十分重要的一環(huán),因此對生長因子的作用及其機制的研究是組織工程的重要內(nèi)容. 生長因子是通過細(xì)胞間信號傳遞影響細(xì)胞活動的一類多肽因子,它對細(xì)胞具有促進或抑制其分裂增殖、遷移和基因表達(dá)的作用. 生長因子對目的細(xì)胞作用有利于在體外構(gòu)建與體內(nèi)更為相似的模擬環(huán)境,從而為體內(nèi)試驗奠定基礎(chǔ).
1骨髓基質(zhì)干細(xì)胞及成骨誘導(dǎo)
目前,骨組織工程種子細(xì)胞的分離主要有三種來源:骨髓來源、骨膜來源和松質(zhì)骨來源[5]. 種子細(xì)胞的培養(yǎng)是骨組織工程的前提與基礎(chǔ). MSCs 由于其強大的增殖能力與多向分化潛能成為骨組織工程的種子細(xì)胞之一[6].
骨髓是由造血系統(tǒng)和基質(zhì)系統(tǒng)組成的復(fù)合組織,它除了是造血干細(xì)胞的主要來源外,同時成人的骨髓組織中還存在著骨髓間質(zhì)干細(xì)胞. 20世紀(jì)70年代中期,F(xiàn)riedenstein等[7]報道,骨髓標(biāo)本中小部分貼附細(xì)胞在培養(yǎng)過程中能夠分化形成類似骨或軟骨的集落,這部分貼壁的細(xì)胞就是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,也叫間質(zhì)干細(xì)胞. 這種間質(zhì)干細(xì)胞具有多方向的分化潛能,可以分化成為骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱和脂肪等組織[8-9]. 間質(zhì)干細(xì)胞的多向分化特性使之成為組織工程的理想細(xì)胞來源,是目前骨組織工程普遍選用的細(xì)胞. 近年來的許多組織工程研究均采用了人或動物的骨髓間質(zhì)干細(xì)胞,其結(jié)果十分令人滿意[10-11].
現(xiàn)有的MSCs培養(yǎng)方法主要為應(yīng)用誘導(dǎo)劑 (地塞米松、β甘油磷酸鈉、抗壞血酸) 和生長因子進行誘導(dǎo),但誘導(dǎo)效果均不甚理想. 國內(nèi)外研究者發(fā)現(xiàn), MSCs的分化具有位點特異性,即在何種微環(huán)境中培養(yǎng)MSCs,就傾向于向這類環(huán)境中的細(xì)胞分化. 根據(jù)MSCs分化的位點特異性,在骨組織工程中欲把MSCs誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞,采用模擬成骨微環(huán)境來誘導(dǎo)MSCs的增殖與成骨分化可能也是一種有效的誘導(dǎo)方法[12-13].
2骨組織工程相關(guān)因子
生長因子的合理應(yīng)用對構(gòu)建骨組織工程起著關(guān)鍵的作用. 骨組織擁有一個龐大的生長因子庫,目前在骨組織中發(fā)現(xiàn)了十幾種生長因子,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有多種細(xì)胞因子對成骨過程具有重要的調(diào)節(jié)作用,可以誘導(dǎo)成骨、促進細(xì)胞增殖和膠原合成、促進成骨和血管生長以及在骨吸收改建方面發(fā)揮作用,因此在構(gòu)建組織工程骨時對成骨因子合理使用或調(diào)控成骨細(xì)胞的適時適量表達(dá)十分重要.
2.1血管內(nèi)皮生長因子VEGF又稱血管通透因子(VPF)或(VAS),是近年來發(fā)現(xiàn)的一種高度特異性的促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子,對胚胎發(fā)育及切口修復(fù)等生理功能有重要意義. VEGF是一種糖蛋白,其相對分子量為34~45 ku由兩個相對分子量各為17 ~22 ku的不同亞單位組成的二聚體,VEGF就是由于該基因的剪切方式不同所形成的系列產(chǎn)物. 人至少有4種VEGF,分別為VEGF121, VEGF165, VEGF189和VEGF206. 近年來研究表明,血管內(nèi)皮生長因子對中胚層細(xì)胞分化有作用,可以使骨髓基質(zhì)干細(xì)胞向成骨分化. Midy等[14]發(fā)現(xiàn),外源性VEGF能使體外培養(yǎng)的成骨細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP) 活性及cAMP濃度提高4倍. VEGF誘導(dǎo)成骨細(xì)胞遷移,增加ALP活性,同時成骨細(xì)胞自身合成VEGF. PGE1, PGE2, 1, 25(OH)維生素D3及IGFⅠ能增加成骨細(xì)胞VEGF mRNA的表達(dá).
2.2腫瘤壞死因子TNF是一種糖蛋白的低聚物,分子量為39~70 ku,是多功能的細(xì)胞因子,主要由活化的巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生. TNF是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的直接殺傷腫瘤細(xì)胞作用最強的生物活性因子之一. TNF分兩大類:由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的稱為TNFα,由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的TNF稱為TNFβ,它們共同作用于同一受體. TNF可刺激培養(yǎng)的成骨細(xì)胞和骨器官合成RNA和PGE2,TNF可以抑制膠原和骨鈣素的合成以及1, 25(OH)維生素D3刺激的ALP活性,但它可刺激Ι型膠原mRNA表達(dá),這說明TNF的這種膠原合成抑制作用受翻譯后產(chǎn)物的調(diào)節(jié)[15].
2.3骨形成蛋白BMP是廣泛存在于骨基質(zhì)中的一種酸性糖蛋白,是目前唯一被確認(rèn)具有異位成骨能力的生長因子,它能在體內(nèi)、外誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化為成骨細(xì)胞,使高分化的骨細(xì)胞群體數(shù)量保持穩(wěn)定. Okubo等[16]用支架材料與不同劑量的BMP復(fù)合后植入兔下頜骨的骨缺損中,3 wk后ALP和組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)新骨形成,證實BMP誘導(dǎo)成骨系軟骨內(nèi)化骨形成過程,且成骨量隨BMP劑量增加而增加,有明顯的劑量依賴性. 陳克明等[17]認(rèn)為: BMP與纖維蛋白制成的復(fù)合物,具有良好的骨誘導(dǎo)活性. 載體包容BMP等誘導(dǎo)因子可有效緩慢的釋放,以發(fā)揮其誘導(dǎo)作用. 余家闊等[18]認(rèn)為,在BMP誘導(dǎo)下,無論是幼稚軟骨細(xì)胞還是成熟軟骨細(xì)胞都有表達(dá)成骨細(xì)胞表型的趨勢. 目前認(rèn)為BMP是骨組織工程中促進成骨作用最重要的一種,近年來BMP作為一種有價值的生長因子越來越受到人們的重視,然而其誘導(dǎo)成骨的機制目前卻并不完全清楚. 但由于BMP在骨組織中含量極少且在體內(nèi)擴散很快,容易被蛋白酶所分解,因而不能在局部發(fā)揮持續(xù)刺激和誘導(dǎo)成骨作用,其誘導(dǎo)活性難以得到充分的發(fā)揮[19].
2.4轉(zhuǎn)移生長因子TGFβ是一種有多種功能的單鏈多肽,分子量為25ku,具有對骨組織、結(jié)締組織及免疫系統(tǒng)等細(xì)胞的調(diào)節(jié)功能,其調(diào)節(jié)作用包括細(xì)胞生長調(diào)節(jié)和分化誘導(dǎo)兩方面. 目前發(fā)現(xiàn)有5種亞型,分別為TGFβ1~TGFβ5. TGFβ廣泛存在于多種組織及轉(zhuǎn)化細(xì)胞中,其中以骨組織、血小板、軟骨組織中含量最豐富,而TGFβ受體在成骨細(xì)胞表達(dá)最多,表明TGFβ的主要作用是調(diào)節(jié)骨代謝. 有實驗表明TGFβ對膠原基因表達(dá)和膠原的合成具有促進作用. TGFβ可促進細(xì)胞增殖與分化,促進細(xì)胞外基質(zhì)合成,也是多種免疫細(xì)胞的自分泌或旁分泌的調(diào)節(jié)因子[20].
TGFβ為主要成骨因子之一,它誘導(dǎo)間充質(zhì)細(xì)胞合成軟骨特異性蛋白聚糖和Ⅱ型膠原,刺激成骨細(xì)胞的增殖及膠原合成. TGFβ在體外對成骨細(xì)胞的作用很復(fù)雜,部分取決于TGFβ的濃度、細(xì)胞密度、種系和成骨細(xì)胞的分化階段. 多數(shù)研究認(rèn)為TGFβ能抑制成骨細(xì)胞游離鈣的合成、增加成骨細(xì)胞分化以及成骨細(xì)胞膠原和ALP的表達(dá). TGFβ對成骨細(xì)胞生長有調(diào)控作用,這種作用在一定程度上表現(xiàn)為雙相性. 研究表明,含血清培養(yǎng)的成骨細(xì)胞,低濃度的TGFβ可以刺激細(xì)胞DNA和膠原合成,抑制ALP活性,刺激細(xì)胞生長;而高濃度則抑制膠原合成,對DNA合成無作用. 無血清培養(yǎng)的成骨細(xì)胞,高濃度TGFβ抑制ALP生成. 此外,也有研究表明,TGFβ促進骨髓源性和骨膜源性骨前體細(xì)胞趨化到骨軟骨損傷部位,進而增生、分化形成成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞 [21].
2.5成纖維細(xì)胞生長因子FGF是一種對中胚層和神經(jīng)外胚層細(xì)胞具有促有絲分裂作用的多肽生長因子. 它對成骨細(xì)胞具有促增殖作用,并且通過增殖骨細(xì)胞數(shù)目促進骨形成. FGF分為酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF)和堿性成纖維細(xì)胞生長因(bFGF)兩種. aFGF存在于骨細(xì)胞浸出物中,bFGF存在于牛和人的骨骼中,前者較后者低10倍. FGF是毛細(xì)血管增殖刺激劑,能夠促進毛細(xì)血管向斷端內(nèi)以及骨移植物中長入,使骨修復(fù)早期的組織中軟骨島數(shù)量增加,并使骨折斷端骨痂血管重建的時間提前,而且可以增加BMP的成骨量. 目前雖然FGF的作用機制還不是很清楚,但是可以肯定的是局部和全身應(yīng)用FGF可以促進骨形成. bFGF是一種內(nèi)源性多肽生長因子,有試驗表明它能有促進中胚層和神經(jīng)外胚層細(xì)胞有絲分裂的作用 [22].
2.6血小板源性生長因子PDGF 首先在血小板中發(fā)現(xiàn),分子量為28~35 ku,由兩個多肽鍵A和B組成異二聚體,在體外具有促進纖維細(xì)胞生長的作用,對所有起源于間葉細(xì)胞包括成骨細(xì)胞既能促進骨形成,又能刺激骨吸收,起雙向調(diào)節(jié)作用[23]. PDGF還對中胚層細(xì)胞有促有絲分裂作用,它對人和鼠成骨細(xì)胞及其細(xì)胞系均有促有絲分裂作用. 同時它還是一個強力趨化因子,對人和鼠組織中的成骨細(xì)胞有強烈的趨化作用. PDGF 是由血小板、巨噬細(xì)胞和骨細(xì)胞合成,貯存于骨基質(zhì)中. 它在創(chuàng)傷愈合中起重要作用,稱為“創(chuàng)傷因子”. 其主要功能是誘導(dǎo)成骨細(xì)胞和骨祖細(xì)胞分裂,對于培養(yǎng)的成骨細(xì)胞有強烈的趨化作用,能刺激膠原合成. Canalis等[24]發(fā)現(xiàn): PDGF有與IGFⅠ同樣的作用,能刺激鼠骨DNA及膠原合成,但是PDGF也具有促使膠原降解的性能.
2.7類胰島素生長因子IGF家族由兩種相關(guān)多肽組成,即IGFⅠ和IGFⅡ. 它們是骨基質(zhì)中最富含的生長因子,兩者有相似的結(jié)構(gòu)和體外作用,但在體內(nèi)生物學(xué)效應(yīng)不同. IGFI 在細(xì)胞增殖及細(xì)胞外基質(zhì)合成代謝中具有重要作用. Throp等[25]研究證實了IGFⅠ和TGFβ具有相互作用以促進細(xì)胞增殖、膠原及蛋白聚糖合成的作用.
IGFⅡ是重要的細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)劑,能刺激骨細(xì)胞的增生、增加骨細(xì)胞的分化和I型膠原合成. Strong等[26]發(fā)現(xiàn)IGFⅡ能在正常人骨細(xì)胞培養(yǎng)中24 h 內(nèi)增加原膠原mRNA 2~4 倍.
綜上所述,細(xì)胞因子不過是眾多因子中研究較為成熟的幾個,如何把這些因子的作用應(yīng)用于組織工程中,才是我們研究生長因子的目的. 什么樣的方法才能使細(xì)胞因子的活性在組織工程中發(fā)揮最好的作用還要進一步探討.
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關(guān)鍵詞 高中物理教學(xué) 情感認(rèn)知 價值觀
中圖分類號:G633.7
文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
文章編號:1002-7661(2011)08-0084-02
在學(xué)生成長與發(fā)展的進程中,決定學(xué)生命運的不僅僅是具體的知識技能,還包括科學(xué)的情感態(tài)度與正確的價值觀,只有將兩者通過合理的教學(xué)激發(fā)轉(zhuǎn)化為學(xué)生切實的學(xué)習(xí)動力,才能徹底改變學(xué)生對學(xué)習(xí)的懼怕感、厭惡感,使他們變被動為主動地傾向于自主學(xué)習(xí)、實踐學(xué)習(xí),用充分的學(xué)習(xí)熱情、積極的生活態(tài)度、正確的價值觀看待人生的奮斗與進取,并最終成為一名德才兼?zhèn)涞膭?chuàng)新型人才。
一、情感認(rèn)知與價值觀培養(yǎng)的深刻內(nèi)涵
在新課程改革體系的發(fā)展進程中,高中物理教學(xué)的最根本任務(wù)便是切實提高學(xué)生的綜合學(xué)習(xí)素養(yǎng)。而作為形成科學(xué)學(xué)習(xí)素養(yǎng)核心要素的情感態(tài)度與價值觀則成為高中物理教師首要的培養(yǎng)目標(biāo)。受應(yīng)試教育制度的深遠(yuǎn)影響,我國的傳統(tǒng)物理教學(xué)更注重對基礎(chǔ)知識的傳授,沒能用生動的情境教學(xué)、豐富的教學(xué)手段使來源于實踐的教學(xué)活動激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)物理的熱情,而是以機械式的教學(xué)方式將物理知識固定于狹隘的知識體系框架中,體現(xiàn)了傳統(tǒng)教育方式的弊端。例如,學(xué)生在剛剛升入中學(xué)階段,無不對物理學(xué)科充滿了好奇心理,他們被豐富的實驗器材、與生活貼近的物理現(xiàn)象所吸引,因此在課堂中積極活躍、興趣十足。隨著物理課程教學(xué)的深入開展,學(xué)生們的學(xué)習(xí)熱情則被紛繁復(fù)雜、抽象客觀的物理原理與公式所牽絆,一旦考試成績欠佳,便會逐步喪失學(xué)習(xí)物理的積極性,久而久之則產(chǎn)生了厭學(xué)的情緒。由此不難看出,學(xué)生的積極情感是需要培養(yǎng)與激勵的,一旦缺乏精神食糧,便會使學(xué)生的學(xué)習(xí)過程充滿了枯燥、充滿了懊惱與恐懼。因此,新時期的高中物理教學(xué)唯有注重學(xué)生認(rèn)知能力與情感發(fā)展的協(xié)調(diào)統(tǒng)一,用一體化的教學(xué)方式將情感教育與價值觀培養(yǎng)作為物理教學(xué)的重要內(nèi)容之一,才能真正使學(xué)生在良好的情感教育規(guī)范之下形成科學(xué)學(xué)習(xí)的價值觀并以求實創(chuàng)新的自主學(xué)習(xí)熱情促進自我的終身發(fā)展。
二、高中物理教學(xué)開展情感態(tài)度與價值觀培養(yǎng)的科學(xué)策略
情感態(tài)度及價值觀的培養(yǎng)并不是獨立的教學(xué)環(huán)節(jié),更不能拋開專業(yè)學(xué)科的教育內(nèi)容,因此高中物理教學(xué)只有將其與每一次的教學(xué)實踐活動充分融合,使科學(xué)的思想教育指導(dǎo)理論教學(xué),通過對學(xué)生內(nèi)心活動的調(diào)節(jié)培養(yǎng)他們自主創(chuàng)新的學(xué)習(xí)態(tài)度、科學(xué)求實的探究精神才能最終使學(xué)生形成表里如一、內(nèi)外一致的綜合學(xué)習(xí)素養(yǎng)。
1.從認(rèn)知培養(yǎng)入手,強化學(xué)生形成積極的認(rèn)知態(tài)度
認(rèn)知態(tài)度是人們基于評價思維形成的觀點與信念,具體的表現(xiàn)形式為贊成認(rèn)知與反對認(rèn)知。在高中物理教學(xué)中教師應(yīng)通過科學(xué)的認(rèn)知培養(yǎng)促進學(xué)生形成正面的、積極的、熱情的認(rèn)知態(tài)度,從而使之在物理學(xué)習(xí)中轉(zhuǎn)變固有觀念、提升學(xué)習(xí)信心,以敬仰與信服之情感認(rèn)可教師的教學(xué)與引導(dǎo)。例如在學(xué)習(xí)實踐中,學(xué)生常常出現(xiàn)學(xué)得容易、做得難;記得容易、忘得快的現(xiàn)象,久而久之他們面對困難的物理學(xué)習(xí)失去了繼續(xù)探究的勇氣與信心,產(chǎn)生了消極的抵觸情緒。這時,高中教師應(yīng)通過敏銳的洞察思維,深刻認(rèn)識到學(xué)生學(xué)習(xí)情緒的變化,及時發(fā)現(xiàn)學(xué)生認(rèn)知態(tài)度的差別變換,從而有目的、有針對性的用科學(xué)的教學(xué)方案設(shè)計,通過答疑解惑、排憂解難的創(chuàng)新教學(xué)手段與課程教學(xué)的緊密對接,樹立學(xué)生學(xué)習(xí)物理的信心并形成積極向上的學(xué)習(xí)認(rèn)知態(tài)度。
2.從情感培養(yǎng)入手,塑造學(xué)生自我監(jiān)控與調(diào)節(jié)意識的形成
情感培養(yǎng)是人們基于認(rèn)知對象在認(rèn)識態(tài)度基礎(chǔ)上通過評價產(chǎn)生的一種內(nèi)心體驗,例如贊同、喜歡、反對、厭惡等。在高中物理教學(xué)實踐中,教師應(yīng)從情感培養(yǎng)教育入手,使學(xué)生掌握對學(xué)習(xí)態(tài)度的自我掌控與調(diào)節(jié)能力,從而最終形成化被動為主動的自主探究與創(chuàng)新學(xué)習(xí)能力。例如,學(xué)生在進行物理動力學(xué)知識的學(xué)習(xí)中,容易將牛頓定律混淆,在受力分析與外力計算的問題上由于掌握不好求解要領(lǐng)而無法得出正確的計算結(jié)果,長此以往容易導(dǎo)致消極學(xué)習(xí)情緒的產(chǎn)生。這時物理教師應(yīng)針對學(xué)生的學(xué)習(xí)情感偏差有針對性的開展輔導(dǎo),使學(xué)生參與到共同分析之中,促進其理清頭緒,弄清楚解題的難點在哪里,是什么因素混淆了解題思路。接下來教師可有針對性的選擇一些動力學(xué)題型,循序漸進地鍛煉學(xué)生加強解題能力,針對不同的問題選擇合理的解題方案并最終掌握萬變不離其宗的解題要點。學(xué)生在教師耐心的鼓勵、引導(dǎo)與互動教學(xué)之下,逐步找回了學(xué)習(xí)物理的信心,并充分意識到焦躁的情感不利于學(xué)習(xí)水平的提升。在面臨學(xué)習(xí)困境之時,只有有意識的自我調(diào)節(jié),耐心地找到問題所在,與教師形成積極的良性溝通才能正確樹立在學(xué)習(xí)活動中的自我監(jiān)控與調(diào)節(jié)意識,并促進自身在良好情感教育之下健康成長與快速提升。
3.從行為傾向引導(dǎo)入手,促進學(xué)生形成正確的認(rèn)知態(tài)度與良好的學(xué)習(xí)行為
為了探討漿樣樹突狀細(xì)胞(PDC)在單倍體相合造血干細(xì)胞移植術(shù)后重建的特點及其與慢性移植物抗宿主?。╟GVHD)和患者復(fù)發(fā)的關(guān)系,采用流式細(xì)胞術(shù)對19例白血病患者移植后外周血樹突狀細(xì)胞(DC)亞群晚期重建進行動態(tài)監(jiān)測,并將其與患者cGVHD 和復(fù)發(fā)的關(guān)系進行分析。結(jié)果顯示: 白血病患者髓樣樹突狀細(xì)胞(MDC)、MDC1和DC百分比和絕對細(xì)胞數(shù)以及MDC/PDC比率均低于正常對照(P0.05);MDC/PDC于移植后120天時已達(dá)到正常對照組水平(P=0.602)。發(fā)生cGVHD 患者移植后120天PDC比例高于未發(fā)生組 ;患者復(fù)發(fā)后MDC1比例及數(shù)值下降,而MDC2和PDC比例及數(shù)值略回升。結(jié)論:白血病患者單倍體相合造血干細(xì)胞移植前外周血DC比例、絕對數(shù)及MDC/PDC比率均減少;移植后MDC/PDC比率恢復(fù)較快 ;各亞群比例和數(shù)量在移植后9月后基本恢復(fù)正常;且恢復(fù)情況與慢性移植物抗宿主病發(fā)生和患者復(fù)發(fā)相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】 單倍體相合造血干細(xì)胞移植; 漿樣樹突狀細(xì)胞; 慢性移植物抗宿主?。?白血病復(fù)發(fā)
Investigation of Plasmacytoid Dendritic Cell Reconstitution and Its Relationship with cGVHD and Relapse after Haploidentical Hematopoietic Stem Cell Transplantation
Abstract
To investigate the characteristics and significance of reconstitution of peripheral blood plasmacytoid dendritic cell (PDC) precursors after allogeneic human leukocyte antigen mismatched/ haploidentical hematopoietic stem cell transplantation, and its relationship with chronic graft versus host disease(cGVHD)and relapse, 19 patients with leukemia were enrolled for this study. Peripheral blood dendritic cell (DC) subsets of patients and healthy controls were detected by flow cytometry, and the correlations between reconstitution of DC and cGVHD, relapse were analyzed. The results showed that compared with healthy subjects, patients with leukemia had a significantly decreased proportion and absolute number of myeloid dendritic cell (MDC) , MDC1 , DC and the ratio of MDC/PDC (P0.05), besides the proportion of PDC which reached to healthy controls levels at 1 year(P =0.494). Compared with levels before relapse, the proportions of MDC1, MDC, DC and the ratio of MDC/PDC were lower, but proportions of MDC2 and PDC were slightly higher after relapse. Patients with a 'high' PDC recovery profile had an improved cumulative incidence of cGVHD in contrast to patients with a 'low' PDC recovery profile on day 120 after transplantation (P=0.007). It is concluded that compared with healthy subjects, de novo leukemia patients have a significantly decreased proportion and absolute number of DC and the ratio of MDC/PDC before haploidentical hematopoietic stem cell transplantation; while ratio of MDC/PDC can be normalized with relative rapidity, the proportions of all DC subsets reached to normal levels on the whole at 9 months after transplantation, and also recovery level of DCs is correlated with occurrence of cGVHD and relapse.
Key words
haploidentical hematopoietic stem cell transplantation; plasmacytoid dendritic cell; chronic graft versus host disease; leukemia relapse
目前同種異基因造血干細(xì)胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, AlloHSCT)供者主要為HLA完全相合的同胞或非親緣供者(HLAmatched sibling donor, MSD or HLAmatched unrelated donor, MUD),在一些應(yīng)用HLA不完全相合供者的移植中,供者的T淋巴細(xì)胞絕大部分已在體外去除[1-4]。我們的研究已證實,GIAC體系(即G:粒細(xì)胞集落刺激因子, I: 強免疫抑制劑, A:抗胸腺球蛋白, C: 外周血與骨髓聯(lián)合)不需要進行體外T淋巴細(xì)胞去除,急慢性GVHD發(fā)生率、移植相關(guān)死亡率、復(fù)發(fā)率,以及兩年無病生存率和總生存率均與同期配型完全相合患者相似,從而使HLA不完全相合親緣供者(HLAmismatched family donor, MFD)移植/單倍體相合造血干細(xì)胞移植(haploidentical hematopoietic stem cell transplantation)的方法得到改進,成功跨越HLA屏障,但我們這一體系成功的機制還未完全清楚[5-8]。樹突狀細(xì)胞(dendritic cells, DC)是專職的抗原呈遞細(xì)胞(antigen presenting cells, APC),不僅能夠顯著刺激初始型T細(xì)胞(naive T cells)進行增殖, 充當(dāng)機體免疫反應(yīng)的始動者,而且可以通過調(diào)節(jié)T細(xì)胞的類型使機體產(chǎn)生免疫激活或免疫耐受[9];慢性GVHD的發(fā)生需要供受者APC共同參與[10-13]。此外,宿主APC是運輸已致敏的供者T細(xì)胞和NK至靶組織所必需的。HLA完全相合造血干細(xì)胞移植后DC的重建可影響cGVHD和復(fù)發(fā),HLA不合/單倍體相合造血干細(xì)胞移植后DC的晚期重建目前很少報道;未去T淋巴細(xì)胞模式下DC重建研究未見報告。對此我們進行研究,以了解DC重建與cGVHD、復(fù)發(fā)是否相關(guān)。
中國實驗血液學(xué)雜志 J Exp Hematol 2007; 15(2)漿樣樹突狀細(xì)胞重建與人類白細(xì)胞抗原不合/單倍體相合造血干細(xì)胞移植慢性移植物抗宿主病/復(fù)發(fā)關(guān)系初探
材料和方法
對象
患者 從2005年2月至2006年4月間,對在北京大學(xué)人民醫(yī)院血液病研究所行HLA不完全相合單倍體移植的19位患者和12例健康親緣供者進行研究?;颊吣行?4例,女性5例,中位年齡21(12-51)歲。19例患者中急性髓性白血病5例,急性B淋巴細(xì)胞白血病6例,慢性髓性白血病7例,骨髓增生異常綜合癥/急性髓性白血病1例。 所有患者在進入研究前均簽署知情同意書,供者標(biāo)本在獲取前均得到本人同意,本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。
供者 所有供者均為親緣供者,移植前進行HLA配型,HLAA、B位點檢測方法為低分辨方法,Ⅱ類抗原采用高分辨方法。依據(jù)HLA配型相合程度、年齡、性別以及健康狀況選擇供者。其中3/6個位點不合10例,2/6個位點不合7例,1/6個位點不合2例。
預(yù)處理方案
阿糖胞苷(cytarabine, AraC)4 g/(m2·d)×2天,馬利蘭(busulfan, Bu) 4 mg/(kg·d)×3天,環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide, Cy)1.8 g/(m2·d)×2天,甲基環(huán)己亞硝脲(simustine, MeCCNU) 250 mg/(m2·d)×1天,抗人胸腺球蛋白(antihuman thymus globulin, ATG) 2.5 mg/(kg·d)×4天。
供者動員及造血干細(xì)胞采集
所有患者均接受供者經(jīng)GCSF動員后采集的骨髓和外周血干細(xì)胞聯(lián)合移植。所有供者接受重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhGCSF)5 μg/(kg·d),連續(xù)皮下注射5-6天。第4天采集骨髓, 有核細(xì)胞要求達(dá)(3-4)×108/kg;第5-6天應(yīng)用COBE血細(xì)胞分離機采集同一供者外周血干細(xì)胞,循環(huán)總量10 L,總單個核細(xì)胞達(dá)(3-4)×108/kg。
移植物抗宿主病預(yù)防和治療
應(yīng)用環(huán)孢菌素A+霉酚酸酯+短程甲氨喋呤方案。環(huán)孢菌素A 2.5 mg/(kg·d)靜脈滴注,移植前9天至腸道功能恢復(fù)正常后改為口服,一般用至移植后9-12月;霉酚酸酯0.5 g每12小時1次,口服,移植前10天至植活后減半,后漸停藥;甲氨喋呤移植后1天15 mg/m2,移植后3、6、11天10 mg/m2。cGVHD根據(jù)受累器官和廣泛程度分為局限型和廣泛型。局限型cGVHD 包括局限的皮膚損害和(或) 本病所致的肝臟損害。廣泛型cGVHD 有下述二者之一加上另外4 項中任意3 項:①皮膚全身廣泛受損; ②病理證實局部皮膚病變并兼有cGVHD 的肝損害。另外4 項包括:肝臟病理呈慢性重癥肝炎或肝硬化,眼部干燥(Schirmer 試驗濕度僅5 mm) ,唾液腺或口腔粘膜有本病病理,任何其他的靶器官受損 。發(fā)生cGVHD后根據(jù)情況加用皮質(zhì)激素、CsA、MMF、FK506、依木蘭等治療。
植活監(jiān)測
所有患者均于移植后6天始接受rhGCSF 5 μg/(kg·d),連續(xù)皮下注射至嗜中性粒細(xì)胞絕對計數(shù)(absolute neutrophil count, ANC)≥2.0×109/L。連續(xù)3天 ANC≥0.5×109/L被認(rèn)為白細(xì)胞植入;脫離血小板輸注7天,血小板≥20×109/L被認(rèn)為血小板植入。移植后行骨髓形態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)檢查、HLA DNA分型及DNA指紋圖(北京市公安局物證所進行)檢查證實供者植入情況,每例患者均采用2種或以上指標(biāo)。
流式細(xì)胞術(shù)檢測分析
單克隆抗體及其他試劑 抗CD14,CD19PerCP及陰性對照單克隆抗體,溶血素均購自美國Becton Dickinson公司;抗BDCA1PE( Mouse IgG2a, clone: AD58E71)、抗BDCA2FITC (Mouse IgG1, clone: AC1441)、抗BDCA3APC(Mouse IgG1, clone: AD514H121 )單克隆抗體均購自德國美天旎公司。
細(xì)胞表面標(biāo)記 每管取新鮮抽取的EDTA抗凝血至少100 μl,分別加入各種抗體及陰性對照抗體10 μl ,4℃避光孵育15分鐘;加溶血素2 ml室溫避光10分鐘,溶解紅細(xì)胞;然后300×g離心5分鐘,棄上清,用PBS將標(biāo)記細(xì)胞洗滌2次;加入含1%多聚甲醛PBS 200 μl, 固定后24小時內(nèi)上流式細(xì)胞儀檢測。
流式細(xì)胞儀檢測 流式細(xì)胞儀為FACSort型(Becton Dickinson 公司產(chǎn)品,裝備雙激光管),應(yīng)用Cellquest 軟件進行數(shù)據(jù)分析。采用四色熒光標(biāo)記活細(xì)胞膜,每份標(biāo)本獲取(1-2.5)×105個細(xì)胞,用FSC/SSC設(shè)門畫出有核細(xì)胞群R1,以去除細(xì)胞碎片和死細(xì)胞;二維點圖顯示R1內(nèi)細(xì)胞,設(shè)CD14、CD19 PerCP陰性細(xì)胞群為R2,顯示R2群細(xì)胞,分析BDCA2 FITC陽性及BDCA1PE, BDCA3APC陽性細(xì)胞,即分別為PDC和MDC1、MDC2 ,并計算DC、MDC1、MDC2以及PDC占有核細(xì)胞的百分比。
統(tǒng)計學(xué)處理
實驗數(shù)據(jù)應(yīng)用統(tǒng)計軟件SPSS 10.0進行分析,連續(xù)變量采用非參數(shù)MannWhitney U檢驗,cGVHD的發(fā)生率評估應(yīng)用KaplanMeier曲線,P
結(jié)
果
病人特點
19位患者和12例健康親緣供者納入本研究,HLA配型3/6不合10例,2/6不合7例,1/6不合2例。發(fā)生cGVHD 11例,其中局限型7例,廣泛型4例;復(fù)發(fā)2例,死亡5例,余無病生存。具體情況見表1。
外周血DC前體細(xì)胞晚期重建
正常對照組和患者移植前的DC及其亞群 12例來源于健康供者的外周血標(biāo)本被作為對照組。白血病患者預(yù)處理前MDC1、MDC及DC在白細(xì)胞中所占百分比較正常對照組明顯減低,分別為MDC1 0.03% vs 0.435%; MDC 0.045% vs 0.645%和DC 0.125% vs 0.76% (P均0.05,無統(tǒng)計學(xué)差異。各DC亞群的絕對值與百分比相類似,分別為MDC1 1.33/μl vs 26.7/μl; MDC 1.52/μl vs 35.56/μl 和 DC 7.89/μl vs 42.66/μl, 均較正常對照組明顯減低,差異具有顯著性(P0.05); MDC/PDC比率為0.50 vs 4.21, 差異具有顯著性(P=0.001)。
患者移植后DC亞群晚期重建 患者移植后晚期(移植后>100天)外周血DC各亞群的重建基本同步,各亞群在白細(xì)胞中所占比例隨移植后時間推移逐漸恢復(fù)正常。如表2所示除移植后9月時PDC在白細(xì)胞所占比例為0.08%(0.04%-0.11%),仍略低于正常對照組,兩者有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.016)外,余各亞群所占比例均于移植后9月時恢復(fù)到正常對照水平,無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)?;颊咭浦埠笸砥冢ㄒ浦埠?100天)外周血DC各亞群數(shù)量的重建與比例重建基本相似,各亞群重建亦基本同步且亞群的數(shù)量與比例隨時間推移逐漸恢復(fù)正常。如表3所示DC各亞群數(shù)量均于移植后9月時恢復(fù)到正常對照水平,與正常對照組無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。MDC/PDC比率如前所述已于移植后30天時達(dá)到正常對照組水平,移植后晚期此趨勢未出現(xiàn)改變,各時間點與正常對照組相比均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
DC前體細(xì)胞晚期重建與cGVHD的關(guān)系
我們的研究顯示,移植100天后所有患者的 cGVHD的累計發(fā)生率為57.89%(11/19)。移植后120天患者PDC中位絕對值為1.142/μl,我們以此值為分界點將患者分為高PDC組和低PDC組。高PDC組(PDC >1.142/μl) 9例患者中8例曾經(jīng)發(fā)生 cGVHD,cGVHD的累計發(fā)生率為89.89% (8/9);低PDC組(PDC ≤1.142/μl)10例患者中僅有3例發(fā)生cGVHD,cGVHD的累計發(fā)生率為30 %( 3/10),明顯低于高PDC組。應(yīng)用KaplanMeier曲線進行分析,兩組之間差異顯著(P=0.007)(附圖)。
我們對移植后120天的MDC/PDC也做了分組分析,結(jié)論和PDC相似,低MDC/PDC組cGVHD的累計發(fā)生率為明顯低于高MDC/PDC組,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.068)。
Figure KaplanMeier plot of cumulative incidence of cGVHD by DC group at day 120 after transplantation. Log rank P=0.007.
患者移植后復(fù)發(fā)前后DC亞群變化
本研究過程中有2例患者出現(xiàn)復(fù)發(fā),監(jiān)測其復(fù)發(fā)前后外周血DC各亞群的變化,結(jié)果顯示復(fù)發(fā)后各亞群比例及數(shù)量向患者移植前趨勢轉(zhuǎn)化。MDC1、MDC、總DC的比例及數(shù)量均較移植前下降,MDC2和PDC較復(fù)發(fā)前上升趨勢(表4,表5)。
討
論
AlloHSCT是血液惡性疾病及代謝性疾病的有效乃至唯一治療手段[5]。移植后供者造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)在患者體內(nèi)重建,這可使患者移植后達(dá)到完全治愈,但同時也可導(dǎo)致移植物抗宿主病等移植相關(guān)并發(fā)癥,從而使移植的療效受到嚴(yán)重影響[14]。眾所周知,樹突狀細(xì)胞起源于骨髓CD34+造血干細(xì)胞,廣泛分布于除腦之外的全身各臟器;DC在天然性和獲得性免疫應(yīng)答中均有重要的作用[9],但DC在移植后發(fā)生的免疫事件中的作用未完全清楚[15],關(guān)于DC的研究始終是移植免疫研究的熱點,日益受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。人體內(nèi)DC的研究由于其數(shù)量很少,僅占外周單個核細(xì)胞的1% 以下,且缺乏特異性表面標(biāo)志而不易進行。目前,外周血前體DC的識別主要通過許多譜系抗體陰性(lin-),如CD3、CD14、CD19和CD56陰性且HLADR、CD4 或CD33 陽性來實現(xiàn)。許多研究已證實,DC細(xì)胞并非單一的細(xì)胞群,至少可將其分為兩群細(xì)胞,CD123bright CD11c- PDC和CD123dim CD11cbright MDC。最近的研究顯示,CD1c (BDCA1), BDCA2, BDCA3和BDCA4 單克隆抗體可以快速、方便、有效地分離DC[16],且其表達(dá)不被化療及GCSF治療下調(diào)[17]。
cGVHD 是alloHSCT后長期存活患者的主要并發(fā)癥,不僅嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量,也是其非復(fù)發(fā)死亡的主要原因。在alloHSCT 后存活半年以上的病人中有60%-80%會出現(xiàn)cGVHD,尤其是非親緣供者、HLA 不完全相合的親屬供者的異體外周血干細(xì)胞移植不斷增加,以及非清髓移植后供者淋巴細(xì)胞的輸注,使得cGVHD的發(fā)生率增加[18] 。cGVHD 的發(fā)病機理尚不完全清楚, cGVHD 可能為一種Th2 疾病, Th2 細(xì)胞可通過釋放IL4、IL5、IL6和IL10等細(xì)胞因子,誘導(dǎo)B 細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生抗體,發(fā)揮體液免疫效應(yīng), 在cGVHD 發(fā)病中都分別起主導(dǎo)作用[19]。Arpinati等[11]和Porta等[15]發(fā)現(xiàn)移植后6個月時,出現(xiàn)cGVHD的患者PDC數(shù)量明顯減少, Clark等[10]和Lamb等[20]研究顯示,cGVHD患者DC均來源于供者,而宿主來源的DC僅在無cGVHD患者中發(fā)現(xiàn),這提示混合DC嵌合可能誘導(dǎo)耐受或無能;同時還發(fā)現(xiàn)移植后出現(xiàn)cGVHD的患者PDC數(shù)量明顯增高,我們的研究結(jié)果與此相似。患者移植后cGVHD的累計發(fā)生率為57.89%(11/19),將移植后120天患者PDC中位絕對值1.142/μl作為分界點將患者分為高PDC組和低PDC組兩組。高PDC組(PDC >1.142/μl) 9例患者中8例曾經(jīng)發(fā)生 cGVHD,cGVHD的累計發(fā)生率為89.89% (8/9);低PDC組(PDC ≤1.142/μl)10例患者中僅有3例發(fā)生cGVHD,cGVHD的累計發(fā)生率為30%(3/10),明顯低于高PDC組,應(yīng)用KaplanMeier曲線進行分析,兩組之間差異顯著(P=0.007)。
DC是專職的抗原呈遞細(xì)胞,可以呈遞具有細(xì)胞遺傳學(xué)異常的白血病細(xì)胞,尤其是DC1,通過誘導(dǎo)Th1發(fā)育促進抗腫瘤免疫。白血病患者DC數(shù)量減少,尤其是DC1數(shù)量減少,導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞獲得免疫逃逸。Reddy等[21]發(fā)現(xiàn)植入時低DC數(shù)量與清髓和非清髓移植后復(fù)發(fā)相關(guān);我們的研究顯示,患者移植前DC各亞群在白細(xì)胞中所占比例及數(shù)量較正常對照組減低,尤其以MDC1減少明顯;復(fù)發(fā)后患者各亞群在白細(xì)胞中所占比例及數(shù)量向患者移植前趨勢轉(zhuǎn)化——MDC1、MDC、DC及MDC/PDC較復(fù)發(fā)前下降,而MDC2及PDC較復(fù)發(fā)前略有上升,這提示復(fù)發(fā)可能與DC誘導(dǎo)抗腫瘤免疫減弱有關(guān)。
總之,隨著HLA 不合/單倍體相合HSCT不斷增加, 深入探討各種移植合并癥發(fā)生機制,將有助于新的預(yù)防及治療方案的發(fā)現(xiàn)。
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關(guān)鍵詞:領(lǐng)域性原則藝術(shù)教育應(yīng)用
談到藝術(shù),最為大眾所熟悉的無疑是音樂、美術(shù)、戲劇等,關(guān)于如何進行藝術(shù)教育,這當(dāng)中涉及到很多原則,例如情景原則、媒介原則、領(lǐng)悟原則等。學(xué)習(xí)了解一門藝術(shù),可以從兩個層面來對其進行學(xué)習(xí)理解,其一就是從藝術(shù)的表明手法來去理解,其二指藝術(shù)中所含有的一種意境。如何去做好藝術(shù)教育工作,需要能夠根據(jù)這兩方面來探討。藝術(shù)是一種人的內(nèi)心情感的表達(dá),每一個人對于藝術(shù)具有不同的感受,這就體現(xiàn)了個人的領(lǐng)悟感的區(qū)別,被稱之為領(lǐng)悟性原則,其是藝術(shù)教育的一種原則。在藝術(shù)教育中,每個人對于同一種藝術(shù)中所看到的、所聽到的都與每個人個體有一定的關(guān)聯(lián),對此,在進行藝術(shù)教育中,可以利用好領(lǐng)悟性原則這一特點,對個人進行好的引導(dǎo)。本文就關(guān)于領(lǐng)域性原則,關(guān)于領(lǐng)悟性原則在藝術(shù)教育中的應(yīng)用進行簡要分析。
一、關(guān)于領(lǐng)悟性的原則
關(guān)于藝術(shù)教育,主要是個人對藝術(shù)的感悟和轉(zhuǎn)化,從而完成對藝術(shù)的自我學(xué)習(xí)掌握。在進行藝術(shù)教育的教學(xué)過程中,教育者要有目的的去向?qū)W習(xí)者們傳遞藝術(shù)中的感悟類信息,讓學(xué)習(xí)者能夠領(lǐng)會到藝術(shù)中的獨特的涵義,這是學(xué)習(xí)藝術(shù)的一個重要前提。藝術(shù)分很多類別,諸如音樂、美術(shù)、戲劇舞臺表演等,首先可以從音樂藝術(shù)的角度來談起中所包含的領(lǐng)悟性原則,音樂能夠用來傳遞個人的情感表達(dá),對于學(xué)習(xí)者來說首先必須具備接受的能力和水平,這是保證學(xué)好音樂的前提,這就是領(lǐng)悟性原則。在進行藝術(shù)教育中,教師需要通過藝術(shù)向?qū)W習(xí)者們闡明清楚其中所包含的各種情感信息,引發(fā)學(xué)生進一步學(xué)習(xí)的主觀興趣,同時提高學(xué)生對藝術(shù)教育的掌握和領(lǐng)悟。藝術(shù)能夠陶冶人的情操,這同樣需要一個人通過自身的感悟知覺去體會藝術(shù)中所包含的感情,這也同樣涉及到領(lǐng)悟性原則。因此,領(lǐng)悟性原則對提高學(xué)生學(xué)習(xí)藝術(shù)的興趣和能力具有非常重要的作用,同時是達(dá)到好的藝術(shù)教育教學(xué)效果的關(guān)鍵一步。
二、藝術(shù)教育與領(lǐng)悟性原則的聯(lián)系
每個人都有自己對外部事物的感受,藝術(shù)源于生活,同樣能夠引發(fā)每個人獨特的感悟感受,藝術(shù)教育是領(lǐng)悟性教育。對于音樂,我們可以發(fā)現(xiàn),剛出生的小朋友,當(dāng)聽到出現(xiàn)的音樂時都會表現(xiàn)一定的興奮,生活中的個人當(dāng)在節(jié)日中聽到一些喜慶的歌曲時,會受到音樂的感染感受到節(jié)日的節(jié)日的喜悅,又當(dāng)個人聽到悲哀的音樂時,會情不自禁的受到悲傷情緒的感染,這些都是個人的內(nèi)心情感感觸與音樂藝術(shù)作品的碰撞。又有對于美術(shù)類作品,當(dāng)看到一些大師的作品時,每個人都會有其自己的感受和對作品的想法,這就涉及到個人的自我領(lǐng)悟性區(qū)別。又或者對一些戲劇舞臺的表演,當(dāng)看到一些戲劇作品,每個人會有發(fā)自內(nèi)心的開心的感受,當(dāng)看到一些悲劇性表演時,又會有悲傷的感覺,這同樣是個人的領(lǐng)悟性機制感受的不同。對于以上這些,就源于每個個人所天生具有的內(nèi)部自我感悟特性,每個人都具有自我對藝術(shù)的領(lǐng)悟性,因而使得在面對藝術(shù)時,能夠感受到藝術(shù)中所包含的獨特的意義,同時引發(fā)個人的共鳴。以上,這也就是藝術(shù)教育同領(lǐng)悟性原則的所具有的聯(lián)系。在進行藝術(shù)教育中,最為重要的任務(wù)就是需要讓學(xué)習(xí)者能夠首先對藝術(shù)有一定的感悟,能夠感受到藝術(shù)背后所蘊涵的基本意義,從這就可以發(fā)現(xiàn)領(lǐng)悟性原則同藝術(shù)教育之間的聯(lián)系。
三、領(lǐng)悟性教育在藝術(shù)教育中的應(yīng)用
藝術(shù)是一種情感方式的表達(dá),通過一定的媒介方式將所想的感情表達(dá)出來,達(dá)到一種情感的認(rèn)同。藝術(shù)主要通過感受來進行交流表達(dá),也就是通過個人對藝術(shù)的自我領(lǐng)悟性來展現(xiàn)對藝術(shù)的理解。創(chuàng)造藝術(shù)的人通過把其內(nèi)心對生活的感受通過藝術(shù)的手法表現(xiàn)出來,這其中包含了藝術(shù)創(chuàng)作者的內(nèi)心感受。每個人在學(xué)習(xí)或欣賞這些藝術(shù)作品時,能夠通過其個人的領(lǐng)悟力來對這些作品進行把握,通過自身的感受來對藝術(shù)作品進行理解和感受,感受藝術(shù)創(chuàng)作者們賦予藝術(shù)中的深深地細(xì)膩的情感,來引起人們的共鳴,從而真正達(dá)到懂得藝術(shù)作品的真正內(nèi)涵。藝術(shù)教育不同于別的教育,它沒有一個公式的套式去學(xué)習(xí)它,而是通過一種非常自由的方式讓每一個人去學(xué)習(xí)它。就藝術(shù)教育的本質(zhì)來說,學(xué)習(xí)者首先要對藝術(shù)教育中的作品能夠有所感悟,能夠通過藝術(shù)作品來體會到其中所要表達(dá)的內(nèi)涵,能夠從中獲得共鳴。首先要做到這一步,也是最為關(guān)鍵的一步,就需要領(lǐng)悟性原則來達(dá)到這關(guān)鍵的一步,只有能夠感受到作品中的情感方式,能夠理解通過何種手法來表現(xiàn)何種情感,才能夠自己通過運用藝術(shù)語言表達(dá)自己的感受和情感。
四、如何更好發(fā)揮領(lǐng)悟性原則對藝術(shù)教育的作用
1.重視關(guān)于藝術(shù)教育中的個人感悟和個人領(lǐng)悟關(guān)于藝術(shù)教育,需要掌握教育的方法,正如前面所說,關(guān)于藝術(shù)教育,不能同傳統(tǒng)的教育方式等同,而是要采用其獨特的教育方式。關(guān)于藝術(shù)教育,首先第一步是要讓學(xué)習(xí)者能夠進行到藝術(shù)的世界中來,通過播放或者展現(xiàn)一些藝術(shù)作品,讓學(xué)習(xí)者們自己去感受它,通過個人的感受去領(lǐng)會藝術(shù)的內(nèi)涵,這就需要發(fā)揮領(lǐng)悟性原則的價值。領(lǐng)悟性原則比較抽象,不過這對于藝術(shù)教育是必不可少的一步。藝術(shù)創(chuàng)作者通過把其內(nèi)心的感受通過藝術(shù)的手法表現(xiàn)出來,從而形成了多種多樣的藝術(shù)世界,供觀者欣賞,學(xué)習(xí)者首先通過對這些藝術(shù)作品中的情感進行感受,然后再逐漸發(fā)現(xiàn)通過采用何種方式來對對何種感情進行表達(dá),從而轉(zhuǎn)換為自己的個人領(lǐng)悟,這樣才能真正理解藝術(shù)的內(nèi)涵以及藝術(shù)的創(chuàng)造方式手法。領(lǐng)悟性原則每個人都有其獨特的感悟,它與個人經(jīng)歷等有關(guān),很難通過某種客觀的方式去解釋,同樣很難通過某種客觀標(biāo)準(zhǔn)評價,但好的藝術(shù)作品正是通過其所傳遞的意蘊,為人所感知,這也正是藝術(shù)教育取得成功效果的重要標(biāo)志。通過學(xué)習(xí)者對其所含的意蘊進行領(lǐng)會,然后轉(zhuǎn)而學(xué)習(xí)通過一定的方式來對自己的感受進行藝術(shù)性的表達(dá),通過作為藝術(shù)教育者對其進行一定的指導(dǎo)和糾正,這樣才能真正地創(chuàng)作出好的藝術(shù)作品來。2.加強對藝術(shù)性教育中技巧的運用和重視在藝術(shù)教育中,領(lǐng)悟性原則非常重要,同時也要重視學(xué)習(xí)者對藝術(shù)技巧的掌握和手法的理解。領(lǐng)悟性原則是首要原則,同時也正是借助藝術(shù)技巧的表達(dá),才能把個人的感悟通過藝術(shù)手法表現(xiàn)出來,從而創(chuàng)造好的藝術(shù)作品。在藝術(shù)教育中,不同藝術(shù)有著其獨特的技巧和手法,通過一定的媒介方式將個人情感感悟表現(xiàn)出來,完成藝術(shù)的創(chuàng)作性表達(dá)。對此,要將技巧同領(lǐng)悟性原則結(jié)合起來,這樣對達(dá)到好的藝術(shù)教育更有效果。
五、結(jié)束語
終上所述,需要明白藝術(shù)教育中領(lǐng)悟性原則的重要性,在教育者進行藝術(shù)教育中,首先需要讓學(xué)習(xí)者們感悟藝術(shù)作品中的情感表達(dá),領(lǐng)悟到整個作品的風(fēng)格和情調(diào),同時加以藝術(shù)表達(dá)的方式,將自己的情感通過一定的藝術(shù)方式表現(xiàn)出來,這就是藝術(shù)教育的成功。
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