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1 食品安全與超級(jí)細(xì)菌
1.1 超級(jí)細(xì)菌
2010 年《柳葉刀》雜志首次報(bào)道南亞的 “超級(jí)細(xì)菌”,該菌攜帶具有泛耐藥性 NDM-1 基因,能對(duì)絕大多數(shù)抗生素耐藥;經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),英國(guó)衛(wèi)生部和美國(guó)疾控中心均提出攜帶 NDM-1 基因的細(xì)菌具有大范圍傳播和感染能力。目前,NDM-1 耐藥菌在印度腸細(xì)菌感染中達(dá) 1%-3%;在歐洲、非洲和澳大利亞等地亦已有報(bào)道;我國(guó)在 2011 年首次發(fā)現(xiàn)該類耐藥細(xì)菌,可見(jiàn)其感染范圍和感染率呈擴(kuò)增趨勢(shì)。耐藥性不改變致病菌的性狀,但可讓患者在感染后變得無(wú)藥可治。臨床微生物學(xué)傳統(tǒng)定義的“超級(jí)細(xì)菌”包括臨床上出現(xiàn)的多種耐藥菌,如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)、抗萬(wàn)古霉素腸球菌(VRE)以及耐多藥肺炎鏈球菌(MDRSP)等。與 NDM-1 耐藥菌相比,這些傳統(tǒng)的“超級(jí)細(xì)菌”檢出率更高,在感染性疾病中更多見(jiàn);其中,MRSA 是醫(yī)院內(nèi)最常見(jiàn)的病原菌之一,具有高發(fā)病率。據(jù)美國(guó) CDC 統(tǒng)計(jì),每年約數(shù)十萬(wàn)人因感染 MRSA 而住院治療,院內(nèi)感染的 MRSA 分離率已高達(dá) 80%以上,其多重耐藥的特性不但增加了治療的復(fù)雜性和難度,也增加了抗生素的消耗量和醫(yī)療費(fèi)用。
1.2 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是主要的食源性微生物,由其引起的食品中毒事件在革蘭氏陽(yáng)性菌中高居首位;據(jù)統(tǒng)計(jì),在美國(guó),由金葡菌引起的食物中毒占 33%,僅次于大腸桿菌;在 1983-1997 年間,每年約 18.5 萬(wàn)人發(fā)生葡萄球菌中毒,其中 1750 人住院,總醫(yī)療費(fèi)用達(dá) 15 億美元。金葡菌在加拿大占細(xì)菌性食物中毒的 45%,而在某些歐洲國(guó)家如匈牙利、芬蘭等則占 50%以上。在日本,1980-1999 年間共超過(guò)2500 起葡萄球菌中毒報(bào)道,受感染人數(shù)約 6 萬(wàn)人;而 2000 年因污染金葡菌引起的“雪印奶粉”事件則超過(guò) 14000人受感染。在我國(guó),每年由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒事件也是屢見(jiàn)不鮮。金葡菌也是典型的耐藥微生物,是潛在的“超級(jí)細(xì)菌”。1961 年 Jevons 在英國(guó)首次發(fā)現(xiàn)對(duì)甲氧西林耐藥的金葡菌(mrsa),MRSA 在 20 世紀(jì) 60 年代中期擴(kuò)展至歐洲及北美等地區(qū),逐漸成為世界范圍內(nèi)的主要醫(yī)院獲得性病原體;在 70 年代末急劇增多并遍及全球,其引起的感染性疾病與乙型肝炎,艾滋病同為當(dāng)今世界三大感染頑疾[15,16,19,20]。;而從 90 年代開(kāi)始,MRSA 更突破了以往在醫(yī)院中檢出的局限,進(jìn)一步在社區(qū)中被大量檢出,其菌株與耐藥特點(diǎn)也隨之發(fā)生變化。
1.3 MRSA的耐藥性
MRSA 從首次發(fā)現(xiàn)至今 50 余年中,其耐藥范圍不斷擴(kuò)大,耐藥程度也日益嚴(yán)重。上世紀(jì) 80 年代,慶大霉素是一般治療 MRSA 感染的有效藥物,而目前 MRSA 對(duì)其耐藥率已超過(guò) 50%;同期,MRSA 對(duì)曾經(jīng)的保留用藥氟喹諾酮類藥物高度敏感,但當(dāng)前 80%以上的 MRSA 對(duì)其耐藥。研究發(fā)現(xiàn),MRSA 耐藥的主要原因是其攜帶的 mecA 基因編碼的一種對(duì) β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物具低親和力的青霉素結(jié)合蛋白 PBP2a;mecA 是一個(gè)外源基因,來(lái)自凝固酶陰性葡萄球菌或腸球菌屬,通過(guò)轉(zhuǎn)座子或 R 質(zhì)粒轉(zhuǎn)到原本敏感的金葡菌中,并整合在染色體第 10 節(jié)段上,該基因組島被稱為葡萄球菌染色體盒(SCCmec)。PBP2a 蛋白分子量為 78kD,當(dāng)金葡菌固有的 PBPs 被 β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物結(jié)合失活后,PBP2a 能替代其發(fā)揮轉(zhuǎn)肽酶的功能,促進(jìn)細(xì)胞壁合成,從而產(chǎn)生耐藥性[22]。根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)標(biāo)準(zhǔn),金葡菌在檢出 mecA 基因或者 PBP2a蛋白時(shí)即可定義為 MRSA;但菌株的耐藥程度有所差異,其主要包括兩大類:相對(duì)敏感型菌株和高度耐藥型菌株。在培養(yǎng)基鑒定菌株耐藥時(shí),為克服表型的異質(zhì)性,傳統(tǒng)方法采用不易降解,MRSA 異質(zhì)性相對(duì)較低的苯唑西林,通過(guò)適當(dāng)培養(yǎng)條件如在 30℃或 35℃培養(yǎng),提高培養(yǎng)基 NaCl 濃度 ( 2 %~4 %),強(qiáng)化耐藥性表達(dá),延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間,來(lái)提高準(zhǔn)確性[24]。近年來(lái),新型耐藥整合子元件在 MRSA 中大量發(fā)現(xiàn),成為 MRSA 耐藥性發(fā)展的新特點(diǎn)。整合子是一種存在于細(xì)菌質(zhì)?;蛉旧w上具有移動(dòng)性的基因捕獲和表達(dá)的遺傳單位,在革蘭氏陰性菌中被廣泛報(bào)道,介導(dǎo)對(duì)多種抗生素的耐藥性,成為革蘭氏陰性菌中耐藥性泛濫的主要原因[25-28]。然而在革蘭氏陽(yáng)性菌中一直鮮有報(bào)道。筆者根據(jù)對(duì) 2001 年-2006 年間華南地區(qū)的 MRSA 耐藥性研究表明[5,6,29-32],第一類整合子在 MRSA 中普遍存在,但分離率低于常見(jiàn)報(bào)道的革蘭氏陰性菌,為 46.6%(122/262),遠(yuǎn)低于常見(jiàn)院內(nèi)感染微生物如銅綠假單胞菌(一般報(bào)道為 80%以上)等;同時(shí),前期研究顯示,第一類整合子系統(tǒng)存在與否,對(duì)紅霉素、慶大霉素、四環(huán)素和甲氧芐啶-磺胺甲唑等抗生素的耐藥性具有顯著影響。然而,這些抗生素均具有較長(zhǎng)的歷史,并非治療 MRSA 感染的常用藥物,甚至多年前已退出醫(yī)院常用藥物行列。例如,四環(huán)素自 1948 年問(wèn)世至今超過(guò) 60 年,是應(yīng)用最多、最廣泛的廣譜抗菌素;后來(lái)發(fā)現(xiàn)其對(duì)牙齒、指甲與鞏膜等具有嚴(yán)重副作用,隨后在臨床使用中逐漸淘汰。慶大霉素同樣由于具有較大副作用在多年前已退出治療的一線藥物。因此,近年來(lái)流行MRSA 中出現(xiàn)的對(duì)這些抗生素耐藥性可能不由臨床環(huán)境中抗生素選擇壓力所產(chǎn)生??赡苡捎谶@些藥物在畜牧業(yè)中仍被大量應(yīng)用,因此在 MRSA 中出現(xiàn)的對(duì)這些藥物的耐藥性,這也暗示了畜牧業(yè)中抗生素的濫用造成了微生物在向“超級(jí)細(xì)菌”進(jìn)化,這已經(jīng)成為食品安全中的一個(gè)重要的潛在問(wèn)題。
2 MRSA的檢測(cè)
常規(guī)方法對(duì) MRSA 的檢測(cè)包括:苯唑西林紙片擴(kuò)散法,乳膠凝集試驗(yàn)和苯唑西林瓊脂篩選方法。最近,臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)推薦使用的頭孢西丁紙片擴(kuò)散法檢測(cè) MRSA[33],以及還有一些其他的檢測(cè)方法。常規(guī)培養(yǎng)液檢測(cè)方法通常具有很高靈敏度,但是對(duì)于此方法高的靈敏度伴隨的是檢測(cè)速度相對(duì)比較慢。
2.1 紙片擴(kuò)散法
紙片擴(kuò)散法包括苯唑西林和頭孢西丁紙片擴(kuò)散法,其步驟一般包括制備菌液、接種平板、貼藥敏紙片、培養(yǎng)等。前者把菌株在 1μg 苯唑西林 MH 瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn),抑菌圈在 35℃經(jīng)過(guò) 24 小時(shí)培養(yǎng)確定;其抑菌圈大小是根據(jù) CLSI(2008)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判斷:抑菌環(huán)直徑≤10 mm 為耐藥,11-12 mm 為中介,≥13 mm 為敏感;當(dāng)抑菌圈直徑在 11~12 mm 時(shí)判斷為中間,需加做 mecA 或 PBP2a 的檢測(cè)以證實(shí)是否為 MRSA。該方法最大優(yōu)點(diǎn)是快速、簡(jiǎn)便、價(jià)格便宜,易被檢驗(yàn)人員接受。在合適的抗生素、pH、及培養(yǎng)溫度、菌液的濃度、培養(yǎng)基厚度等條件下,該方法檢測(cè) MRSA 是可行的。它對(duì) MRSA 檢出敏感性、特異性較高,仍不失為目前臨床微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)篩檢 MRSA 方法之一。但由于多種因素的影響,從表型上進(jìn)行診斷,其結(jié)果略欠準(zhǔn)確,致使其特異性低于其他方法。許多研究均發(fā)現(xiàn)頭孢西丁紙片法相比于苯唑西林紙片法具有更好的靈敏度[34-36]。該法把菌株在帶有 30μg 的苯唑西林 MH 瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行試驗(yàn),抑菌圈是 35℃經(jīng)過(guò) 16-18 小時(shí)培養(yǎng)確定:根據(jù)CLSI(2008)標(biāo)準(zhǔn):抑菌環(huán)直徑≤21 mm 為耐藥,≥22 mm 為敏感。該方法優(yōu)點(diǎn)同樣是快速、簡(jiǎn)便、價(jià)格便宜,并且靈敏度高于苯唑西林紙片法。Priya Datta[32]等發(fā)現(xiàn),頭孢西丁的紙片法具有 98.5%的靈敏度和 100%的特異性,而苯唑西林紙片法的是 91.4%的靈敏度和 99.2%的特異性。但是作為 CLSI 所推薦的標(biāo)準(zhǔn),在檢測(cè) MRSA時(shí)如果與一些其它方法補(bǔ)充可以不會(huì)有 MRSA 的漏檢。苯唑西林紙片擴(kuò)散法對(duì)于 MRSA 異質(zhì)性耐藥檢測(cè)較為困難,而頭孢西丁能誘導(dǎo) mecA 基因表達(dá) PBP2a,能更好地檢出異質(zhì)性耐藥菌株。
2.2 苯唑西林瓊脂篩選
MH 培養(yǎng)基加 NaCl(40 g/L)加苯唑西林(6 μg/ml),將菌液(0.5 麥?zhǔn)蠞岫?畫(huà)線在培養(yǎng)皿上 35°C 培養(yǎng) 24 h,只要平皿有菌生長(zhǎng),即使是一個(gè)菌落也判斷為 MRSA,敏感度為 100%。與常規(guī)方法相比在 MRSA 檢測(cè)上并無(wú)顯著性,但對(duì)于其它葡萄球菌,瓊脂篩選法有較高的陽(yáng)性率,因此尤其適用于多種葡萄球菌中 MRSA 的檢測(cè)。該法操作方法簡(jiǎn)便、實(shí)驗(yàn)成本低,一個(gè)平板可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品,檢出率高,較為實(shí)用,可用于 MRSA的常規(guī)檢測(cè);尤其當(dāng)多種檢測(cè)方法結(jié)果不一致時(shí),應(yīng)以瓊脂篩選為準(zhǔn)。但是該法耗時(shí)長(zhǎng),此外 Swenso 等發(fā)現(xiàn)在異質(zhì)耐藥菌株進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)該方法敏感性下降,特異性降低且出現(xiàn)邊緣性MIC;Diedere等發(fā)現(xiàn)CHROM瓊脂篩選具有 97.1%的敏感性和 99.2%的特異性,如果篩選周期到由 24 小時(shí)變?yōu)?48 小時(shí),菌落敏感性將會(huì)增加到 100%。
2.3 乳膠凝集試驗(yàn)
凝集試驗(yàn)是一種快速、操作簡(jiǎn)便的免疫學(xué)診斷方法,在臨床快速 MRSA 診斷方面應(yīng)用廣泛。其原理是抗 PBP2a 單克隆抗體致敏的乳膠顆粒與 MRSA 的膜蛋白提取物作用,如產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的凝集顆粒證實(shí)有PBP2a 存在,判斷其為 MRSA。其它還有一些檢測(cè)存在于細(xì)胞膜內(nèi) PBP2a 的乳膠試劑,這類檢測(cè)需要裂解細(xì)胞。代表的試劑盒包括 PBP2’Test(Oxoid)、MASTALEX -MRSA(Mast)和 MRSAScreen(Denka Seiken)。研究表明該方法的敏感性≥97%[41-43],而 Datta 等[36]報(bào)道其具有 100%的敏感性和 99.2%的特異性。同時(shí),該方法具有與 mecA 基因檢測(cè)相關(guān)性好、快速簡(jiǎn)便、特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn),且不需特殊儀器和技術(shù),尤其適合用于 MRSA 早期檢測(cè),可作為 PCR 法的替代方法;但檢測(cè)成本較高。
2.4 分子生物學(xué)診斷方法
自上世紀(jì)90年代起,分子生物學(xué)方法在微生物檢測(cè)中逐漸取代傳統(tǒng)方法,主要包括PCR、熒光定量PCR與各種新型核酸擴(kuò)增技術(shù)等。與常規(guī)“金標(biāo)準(zhǔn)”方法相比,PCR技術(shù)具有較大優(yōu)勢(shì)。首先,在耗時(shí)方面,由于常規(guī)方法基于細(xì)菌培養(yǎng),因此增菌以及選擇性培養(yǎng)耗時(shí)可長(zhǎng)達(dá)3天,但PCR由于檢出限低,樣品中微量的菌體足以啟動(dòng)擴(kuò)增反應(yīng),因此在從樣品處理到培養(yǎng)的時(shí)間可大為縮減。由于PCR具有高特異性,因此以上方法的增菌與細(xì)菌培養(yǎng)(LB培養(yǎng)基)階段,與“金標(biāo)準(zhǔn)”相比,耗時(shí)可降低12-24h。其次,細(xì)菌鑒定操作方面,“金標(biāo)準(zhǔn)”方法在細(xì)菌培養(yǎng)后,常需通過(guò)血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)鑒定,而PCR通過(guò)選取特異的分子靶點(diǎn),結(jié)果特異性高;該方法在鑒定金葡菌特異基因的同時(shí),以所有葡萄球菌的靶點(diǎn)為內(nèi)參,可信度更高。
再次,PCR方法的高靈敏度和特異性,有助于解決“金標(biāo)準(zhǔn)”方法中假陰性和低敏感度的問(wèn)題。筆者等以orfX為檢測(cè)靶點(diǎn),建立針對(duì)MRSA的檢測(cè)方法,該方法已被證明是一個(gè)簡(jiǎn)單,快速,特異,敏感的檢測(cè)方法,對(duì)于食品檢測(cè),醫(yī)院等機(jī)構(gòu)對(duì)MRSA快速鑒定具有重要意義,在未來(lái)發(fā)展中對(duì)簡(jiǎn)化檢測(cè)方法的改進(jìn)具有深遠(yuǎn)的意義。此外,筆者等[44]建立的多重PCR體系,針對(duì)16SrRNA、femA和mecA基因,可用于MRSA檢測(cè)。除具有常規(guī)PCR的優(yōu)點(diǎn)外,多重PCR能在同一次PCR反應(yīng)和凝膠電泳分析中,完成多個(gè)靶基因的檢測(cè),在簡(jiǎn)便性、耗時(shí)方面具有較大優(yōu)勢(shì);本實(shí)驗(yàn)建立的多重PCR方法,結(jié)果證實(shí)其能對(duì)葡萄球菌、金葡菌及關(guān)鍵耐藥因子進(jìn)行檢測(cè)與鑒定。該方法特異靈敏、簡(jiǎn)便快捷,同時(shí)具有適應(yīng)面廣,易于推廣和應(yīng)用等優(yōu)點(diǎn)。1995年出現(xiàn)的以標(biāo)記特異性熒光探針為特點(diǎn)的熒光定量PCR技術(shù),實(shí)行完全閉管式操作,不僅能大大減少擴(kuò)增產(chǎn)物的污染機(jī)會(huì),提高檢測(cè)的特異性,且可通過(guò)計(jì)算機(jī)自動(dòng)分析對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行精確定量提高檢測(cè)的靈敏度,完全克服了普通PCR的缺點(diǎn),且該方法操作簡(jiǎn)便迅速,適用于大樣本量的篩查該方法可用于檢測(cè)葡萄球菌及腸毒素。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)檢測(cè)技術(shù)相比,分子檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)κ称分杏泻ξ⑸飳?shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的檢測(cè);與普通的PCR相比,實(shí)時(shí)熒光定量PCR可以在PCR反應(yīng)過(guò)程中直接檢測(cè)熒光信號(hào),無(wú)需配膠、電泳等步驟,可以更加快速有效地鑒別出MRSA,且可以對(duì)靶位基因進(jìn)行定量檢測(cè)。Warren等[45]通過(guò)特定目標(biāo)的一種熒光分子信標(biāo)探針與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交,用實(shí)時(shí)熒光PCR法直接從鼻咽拭子標(biāo)本中快速檢測(cè)MRSA,其敏感性為91.7%,特異性為93.5%,82.5%能顯示陽(yáng)性,97.1%能顯示陰性,其中拭樣處理和檢測(cè)時(shí)間僅為1.5小時(shí)。
Oh等通過(guò)Xpert MRSA檢測(cè)體系,在2小時(shí)內(nèi)完成MRSA檢測(cè);Xpert MRSA測(cè)試法是一種快速,敏感,臨床上有用的檢測(cè)方法,利用SCCmec上一段特異性序列,特別適用于早期MRSA的檢測(cè)。Liu等[47]通過(guò)使用一種新的集成微流體系統(tǒng)可以檢測(cè)活MRSA、敏感金葡菌和其它病原體,該微流體系統(tǒng)已被證明具有100%的MRSA檢測(cè)特異性;從樣品預(yù)處理到熒光觀察,可自動(dòng)化在2.5小時(shí)內(nèi)完成。Stenholm等[48]用一種即時(shí)檢測(cè)的雙光子激發(fā)熒光檢測(cè)技術(shù)對(duì)243株MRSA進(jìn)行檢測(cè),其中99.0%的MRSA真陽(yáng)性樣品所需時(shí)間小于14小時(shí),該法主要優(yōu)點(diǎn)包括簡(jiǎn)單的檢測(cè)程序,試劑消耗低,以及高流量能力。近年來(lái)有多重新型核酸技術(shù)被報(bào)道,其中環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)技術(shù)是在2000年由Notomi等發(fā)明的一種體外等溫?cái)U(kuò)增特異核酸片段的技術(shù)[49,50]。自問(wèn)世以來(lái),數(shù)年間已被廣泛應(yīng)用于生物安全、疾病診斷、食品分析及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。該方法在簡(jiǎn)便、快速、特異性和靈敏度方面具有顯著優(yōu)勢(shì)。LAMP反應(yīng)的靈敏度也極高,其靈敏度可達(dá)常規(guī)PCR的10-100倍(檢出限是常規(guī)PCR的1/100~1/10拷貝數(shù))。因此,對(duì)細(xì)菌進(jìn)行檢測(cè)時(shí)LAMP法在培養(yǎng)時(shí)間和所需基因拷貝數(shù)等方面具有較大優(yōu)勢(shì)。筆者曾過(guò)對(duì)118株葡萄球菌進(jìn)行16SrRNA、femA和mecA三個(gè)特異性靶點(diǎn)的LAMP檢測(cè)[3],其中,16SrRNA-LAMP均檢測(cè)為陽(yáng)性,靈敏度與陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均為100%;而PCR則只檢測(cè)其中113株葡萄球菌陽(yáng)性,靈敏度與陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為95.8%與100%。對(duì)65株金葡菌和53株凝固酶陰性葡萄球菌,femA-LAMP的靈敏度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值與陰性預(yù)測(cè)值分別為98.5%、100%與98.1%;而PCR則相應(yīng)為92.3%、100%與91.4%。對(duì)70株甲氧西林耐藥菌和48株敏感菌,mecA-LAMP的靈敏度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值與陰性預(yù)測(cè)值分別為94.3%、100%與92.3%;而PCR則分別為87.1%、100%與84.2%。同時(shí),筆者利用MRSA中的特異靶點(diǎn)orfX,建立一種針對(duì)MRSA的快速檢測(cè)技術(shù)。通過(guò)對(duì)116株對(duì)照菌株進(jìn)行驗(yàn)證,顯示該技術(shù)的特異性為100%,能有效針對(duì)MRSA進(jìn)行特異檢測(cè)。應(yīng)用該技術(shù)檢測(cè)667株葡萄球菌,包括566株MRSA、25株MSSA、53株MRCNS與23株MSCNS,結(jié)果顯示,靈敏度達(dá)98.4%(557/566),而與之平行對(duì)比的PCR技術(shù)則僅為91.7%(519/566),陽(yáng)性預(yù)測(cè)值與陰性預(yù)測(cè)值分別為100%和92.7%[51]。此外,筆者利用金葡菌中的特異femA基因,建立一種針對(duì)金葡菌的LAMP快速檢測(cè)體系。通過(guò)應(yīng)用于432株金葡菌(118株臨床與314株食源性菌株)的檢測(cè)鑒定,結(jié)果顯示,檢出率為98.4%,檢出限為100 fg DNA/Tube與104CFU/ml[52]。
3 結(jié)論
綜上所述,抗生素濫用是重要的食品安全問(wèn)題,其引起的后果不應(yīng)局限于食物中殘留的微量抗生素,而應(yīng)擴(kuò)展至由其引起的細(xì)菌耐藥性乃至超級(jí)細(xì)菌問(wèn)題。在典型的食源性微生物金葡菌中,耐藥性較為普遍。其中,MRSA 除引起多起食物中毒事件外,同時(shí)也是潛在的超級(jí)細(xì)菌。該類菌株的新型耐藥特點(diǎn)顯示其耐藥性發(fā)展和進(jìn)化可能由大量歷史較久、在臨床已淡出的抗生素在畜牧業(yè)中的濫用影響并決定;但其具體的分子機(jī)制有待進(jìn)一步深入研究。目前,國(guó)內(nèi)外科研工作者已針對(duì) MRSA 菌株的檢測(cè)開(kāi)發(fā)出了許多適用方法,其中LAMP 法由于具有簡(jiǎn)便、快速、特異性強(qiáng)和靈敏度高等優(yōu)勢(shì),已獲得越來(lái)越多的關(guān)注,顯示出較好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
作者:鄧陽(yáng) 劉曉晨 李冰 李琳 徐振波 單位:華南理工大學(xué) 美國(guó)馬里蘭大學(xué)生物醫(yī)學(xué)科學(xué)系