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從普通留學(xué)生到國(guó)際醫(yī)藥學(xué)界的領(lǐng)軍人物
許瑞安教授是福建晉江人,其故鄉(xiāng)既是一個(gè)環(huán)山面海的漁、農(nóng)、僑村,山川攬勝,日月鐘華;又是一個(gè)文化底蘊(yùn)十分厚重的中國(guó)歷史文化名村一晉江福全。史載唐宋開(kāi)科取士以來(lái),全村進(jìn)士,舉人共20多人,出將入相,該村乃是我國(guó)最著名的抗倭歷史名城,明代曾在沒(méi)有官軍奧援下,孤城三次打敗入侵倭寇;許教授自幼沐浴于海洋文化和中原文化的交匯,其童年就在驚濤拍浪的變質(zhì)巖礁上外婆家的住屋度過(guò),大自然春風(fēng)造化孕育著他對(duì)萬(wàn)物之靈有著不盡迷思與眷戀;失學(xué),飽受天風(fēng)海濤的錘煉,不僅為日后的工作打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ),而且從科學(xué)態(tài)度、科學(xué)素養(yǎng)到人生目的都得到了良好的洗禮與升華,立志一生從事科研。
1983年許瑞安教授考上國(guó)家教育部公派出國(guó)留學(xué)。到了國(guó)外之后,他不僅迅速克服了獨(dú)自在異國(guó)他鄉(xiāng)求學(xué)所必然面臨的種種不適和不便,而且抓緊一切機(jī)會(huì)刻苦學(xué)習(xí),將絕大部分時(shí)間都泡在圖書(shū)館和實(shí)驗(yàn)室里。正是源于這種嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的治學(xué)精神和態(tài)度,1989年,他順利獲得了Otago大學(xué)的博士學(xué)位,之后又前往加拿大攻讀博士后。
完成學(xué)業(yè)后的許瑞安曾在國(guó)外多家著名的國(guó)際大學(xué)、科研機(jī)構(gòu)從事科研教學(xué)工作,先后出任過(guò)大學(xué)載體研究中心、神經(jīng)載體研究室主任的職務(wù)。從那時(shí)候起直到2005年年底歸國(guó),他主要從事的工作范疇包括病毒載體、分子醫(yī)學(xué)、分子藥物學(xué)的項(xiàng)目科研和教學(xué),還曾擔(dān)任過(guò)奧克蘭大學(xué)載體研究中心的主任和美國(guó)托馬斯?杰弗遜大學(xué)的神經(jīng)載體研究室主任。
在國(guó)外期間,許瑞安從1983年起開(kāi)始陸續(xù)發(fā)表專(zhuān)業(yè)學(xué)術(shù)論文,迄今為止已經(jīng)有超過(guò)百篇的重要學(xué)術(shù)文章發(fā)表,其中SCl論文就占到了七成以上,SCl影響影子總分超過(guò)400分。他在基因治療研究方面的部分工作發(fā)表于NatureMedicine【1998年第5期封面】、Science、PNAS等國(guó)際一流學(xué)術(shù)刊物,2005年發(fā)表在美國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)檢測(cè)雜志上的“Stabilityof lnfectiOUS rAAV vector stock”一文更是被世界衛(wèi)生組織選定為分子療法臨床應(yīng)用的主要參考文獻(xiàn)之一。2006年他在Histopathology雜志發(fā)表結(jié)腸癌治療一文,2011年入選結(jié)腸癌治療領(lǐng)域5年來(lái)TOP 10論文,且位居榜首。
許瑞安在學(xué)術(shù)上獲得的成果不僅在理論研究方面,更包括了技術(shù)實(shí)踐應(yīng)用領(lǐng)域。由他創(chuàng)新發(fā)明的專(zhuān)利成果達(dá)16項(xiàng),他是國(guó)際口服基因療法的主要奠基人和發(fā)明人之一,在分子藥物學(xué)、癌細(xì)胞與基因療法領(lǐng)域取得一系列的科研成果。
憑借著嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和堅(jiān)韌不拔的精神毅力,許瑞安從一名普通的留學(xué)生成長(zhǎng)為一位國(guó)際醫(yī)藥學(xué)界知名的科學(xué)家。
肩負(fù)重任,歸國(guó)奉獻(xiàn)
2005年,許瑞安回到家鄉(xiāng),為祖國(guó)的藥物研究事業(yè)貢獻(xiàn)才華和智慧。同年,他受聘于華僑大學(xué),并出任所長(zhǎng)、主任。由于許教授在分子醫(yī)學(xué)與基因治療研究領(lǐng)域內(nèi)的突出貢獻(xiàn)和成就,奠定了他在國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的學(xué)術(shù)地位,2007年受命,開(kāi)始負(fù)責(zé)組建分子藥物教育部工程研究中心的工作。他在任職國(guó)家教育部分子藥物工程研究中心主任、華僑大學(xué)分子藥物所所長(zhǎng)之外,還兼任了國(guó)際癌細(xì)胞與基因療法學(xué)會(huì)常務(wù)理事、國(guó)家科技部科技發(fā)展戰(zhàn)略專(zhuān)家/國(guó)際科技合作管理專(zhuān)家、國(guó)家教育部學(xué)位中心評(píng)審專(zhuān)家、福建省生物醫(yī)藥工程研究生培養(yǎng)基地負(fù)責(zé)人、廈門(mén)海洋與基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室主任、廈門(mén)市國(guó)際科技合作生物醫(yī)藥基地負(fù)責(zé)人、教授、博士生導(dǎo)師、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院榮譽(yù)教授、《中國(guó)臨床藥理學(xué)和治療學(xué)》編委、顧問(wèn),《中國(guó)海洋資源》特邀編委、中國(guó)海洋大學(xué)海洋藥物客座教授,山東大學(xué)兼職教授等職務(wù)。在國(guó)際上,許教授同時(shí)還是瑞典卡羅琳醫(yī)學(xué)院國(guó)際學(xué)術(shù)刊物lslet編委,美國(guó)International Panel of MedicalScience Monitor,我國(guó)World JournalOf Gastroenterology PharmacologyandTreatment編委、美、英、德、日、瑞典等國(guó)際18家Hepatology,Gene The rapy等SCI學(xué)術(shù)刊物審稿人、“行政院”臺(tái)北榮民總院榮譽(yù)教授、愛(ài)爾蘭國(guó)家自然基金評(píng)審專(zhuān)家、新西蘭食品科學(xué)技術(shù)研究院專(zhuān)業(yè)委員。
回到祖國(guó)之后,許瑞安教授將全部智慧和畢生對(duì)科學(xué)事業(yè)追求的所有熱忱投入到了我國(guó)的分子藥物與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究事業(yè)當(dāng)中。他負(fù)責(zé)組建了華僑大學(xué)分子藥物學(xué)研究所,帶領(lǐng)研究所的同仁以新藥研發(fā)為主旨,積極開(kāi)展了一系列工作,也由此揭開(kāi)了華僑大學(xué)藥學(xué)學(xué)科和生物醫(yī)學(xué)工程建設(shè)的序幕。
自2007年10月分子藥物教育部工程研究中心獲得教育部批準(zhǔn)立項(xiàng)、開(kāi)始建設(shè)以來(lái),在許瑞安教授的帶領(lǐng)下,該研究中心依托于華僑大學(xué),得到了迅速地成長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)了三年的建設(shè)時(shí)期,到2010年時(shí)研究中心已經(jīng)完善建立起了分子藥物、中藥復(fù)方、廈門(mén)市海洋與基因工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室三大藥物研究與開(kāi)發(fā)平臺(tái)。
早在1998年,許瑞安和During就曾經(jīng)首開(kāi)人類(lèi)口服基因療法的先河,在分子藥物領(lǐng)域做出了開(kāi)拓式的大膽創(chuàng)新并獲得了首創(chuàng)的成果?;貒?guó)后許教授繼續(xù)發(fā)揚(yáng)在這一領(lǐng)域內(nèi)的優(yōu)勢(shì),致力于口服基因藥物的研發(fā)工作,他負(fù)責(zé)研究的“rAAV基因藥物的口服吸收機(jī)制”獲得了2009年度國(guó)家自然科學(xué)基金資助。而由許瑞安和肖衛(wèi)東領(lǐng)軍的團(tuán)隊(duì),已經(jīng)建立起成熟的rAAV載體的產(chǎn)業(yè)化技術(shù)。
時(shí)至今日,在許瑞安教授的不懈努力和推動(dòng)下,占地500平方米的AAV載體中試生產(chǎn)車(chē)間已經(jīng)建成,可為國(guó)內(nèi)外各家生物醫(yī)藥研發(fā)單位提供各種類(lèi)型中試級(jí)別的AAV病毒載體。
推動(dòng)創(chuàng)新成果研究,建設(shè)人才培養(yǎng)體系
許瑞安教授是我國(guó)“863”“十五”肺癌基因療法課題組組長(zhǎng)、首席科學(xué)家,肝癌基因療法課題組副組長(zhǎng)、國(guó)家“863”“十一五”肺癌基因療法課題組首席科學(xué)家,在我國(guó)的癌癥與基因療法研究領(lǐng)域力盡所能。與此同時(shí),許瑞安并未滿(mǎn)足和止步于個(gè)人的研究成果創(chuàng)新,他在積極推動(dòng)產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和研究成果轉(zhuǎn)化、發(fā)展學(xué)科建設(shè)和人才培養(yǎng)等方面依舊付出了極大的心血和努力。由許教授帶領(lǐng)的分子藥物教育部工程研究中心
重視蛋白藥物的臨床應(yīng)用,迄今已建立多種小量蛋白的真核/原核表達(dá)系統(tǒng),并已有三個(gè)蛋白產(chǎn)品(Kallistatin,Cygb,Vasostatin)完成動(dòng)物實(shí)驗(yàn)并達(dá)到中試規(guī)模制備并純化成功,保證了較大量蛋白純品可用于藥物學(xué)、藥理學(xué)的探索,同時(shí)亦能滿(mǎn)足基因工程蛋白藥物開(kāi)發(fā)的臨床研究需要;其團(tuán)隊(duì)研發(fā)的基因重組FSH,還對(duì)婦女不孕具有確切臨床價(jià)值。目前已提交得到驗(yàn)證的抗病毒和抗感染藥物的專(zhuān)利申請(qǐng),中試、臨床試驗(yàn)和報(bào)批國(guó)家新藥的工作正在籌備中,并有望按照歐美標(biāo)準(zhǔn)在國(guó)外注冊(cè)和銷(xiāo)售。
與此同時(shí),基因藥物平臺(tái)申請(qǐng)的“肝纖維逆轉(zhuǎn)藥物”,利用具有特異的細(xì)胞靶向性的基因運(yùn)載系統(tǒng)攜帶具有抗氧化和抗炎癥雙重功能基因抑制星狀細(xì)胞激活達(dá)到防止肝硬化目的,顛覆了目前纖維化治療的傳統(tǒng)思路,具有巨大的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)潛力。在中藥研發(fā)的制備領(lǐng)域,工程中心目前也已經(jīng)擁有授權(quán)或已申請(qǐng)的中藥相關(guān)專(zhuān)利項(xiàng)目超過(guò)10項(xiàng);在合成藥物方面,中心開(kāi)發(fā)出了有效的抗癌藥物肉桂酸乙酯衍生物的綠色合成工藝,以成本低、綠色化、操作簡(jiǎn)單等特色為市場(chǎng)所看好;在海洋藥物領(lǐng)域,中心以東南沿海、臺(tái)灣海峽、東南亞海域有特殊功效的海洋分子藥物為研究對(duì)象,建設(shè)的海洋藥物研發(fā)平臺(tái)現(xiàn)如今已發(fā)展成為與廈門(mén)市政府共建的高校海洋藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。
學(xué)科建設(shè)是重中之重,根深才能樹(shù)大,許教授牢牢把握學(xué)科建設(shè)方向。在他的努力下,分子藥物工程研究中心2007年正式開(kāi)始建設(shè),2008年就開(kāi)始獨(dú)立招收醫(yī)學(xué)生物工程、分子藥物學(xué)、微生物生藥學(xué)和藥學(xué)方向碩士研究生,2009年福建省唯一的“福建省生物醫(yī)藥工程研究生創(chuàng)新培養(yǎng)基地”落戶(hù)分子藥物學(xué)研究所。如今他們已經(jīng)擁有了一個(gè)二級(jí)博士點(diǎn),3個(gè)碩士點(diǎn)1個(gè)專(zhuān)業(yè)碩士點(diǎn)以及完備的科研、教學(xué)團(tuán)隊(duì)還從美國(guó)賓州大學(xué)、英國(guó)牛津大學(xué)、香港大學(xué)的教授以及曾在輝瑞、默克等國(guó)際知名制藥公司承擔(dān)開(kāi)發(fā)工作的高級(jí)工程師中聘請(qǐng)了多位兼職教授或名譽(yù)教授。
作為中心領(lǐng)軍人物的許教授不僅是科技部科技發(fā)展戰(zhàn)略專(zhuān)家,還是國(guó)際知名的分子藥物學(xué)家,在他的主持或策劃下,工程研究中心僅立項(xiàng)建設(shè)期間就申請(qǐng)獲得各類(lèi)國(guó)家、省部級(jí)、市級(jí)課題22項(xiàng),而且大力加強(qiáng)國(guó)際間科技合作與學(xué)術(shù)交流;與新西蘭皇家科學(xué)院合作的“核糖開(kāi)關(guān)及其在基因治療的應(yīng)用”已獲得新西蘭政府和國(guó)家科技部的資助;2011年與美國(guó)伊利諾伊大學(xué)芝加哥分校藥學(xué)院聯(lián)合建立培養(yǎng)一本一碩一博體系。從今年起開(kāi)始招收本科生。全體師生們眾志成城,同心同德,努力把教育部分子藥物工程中心建成了一個(gè)分子醫(yī)藥基礎(chǔ)研究、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和成果轉(zhuǎn)化一條龍的基地,涉及分子醫(yī)學(xué),分子藥物,醫(yī)用口服病毒納米顆粒,藥物合成,轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué),海洋基因藥物,天然藥物等多門(mén)學(xué)科,同時(shí)為國(guó)內(nèi)培養(yǎng)和凝聚了分子藥物領(lǐng)域里的大批技術(shù)創(chuàng)新型人才。
與此同時(shí),許教授極力推崇產(chǎn)學(xué)研相結(jié)合,先后與中僑藥業(yè)、福建太平洋藥業(yè),沈陽(yáng)天一藥業(yè)等簽訂項(xiàng)目合作、轉(zhuǎn)化及技術(shù)培訓(xùn)協(xié)議;該團(tuán)隊(duì)2009年研發(fā)的硫酸沙丁胺醇口腔崩解片、藥物中間體等項(xiàng)目的研發(fā)和成果轉(zhuǎn)化投放市場(chǎng),每年產(chǎn)值均超2,000萬(wàn)。
如今的分子藥物教育部工程研究中心已形成一支囊括多學(xué)科、從基礎(chǔ)研究至產(chǎn)業(yè)化的完整的產(chǎn)學(xué)研研發(fā)鏈條。許瑞安教授介紹說(shuō):“在這個(gè)鏈條上,我們可以獨(dú)立設(shè)計(jì)基因藥物載體、蛋白藥物和靶向基因藥物,可以對(duì)病毒載體和基因工程蛋白進(jìn)行中試規(guī)模生產(chǎn),還可以承擔(dān)或獨(dú)立進(jìn)行新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)與市場(chǎng)化,滿(mǎn)足臨床藥物研發(fā)和接受企業(yè)委托項(xiàng)目的需要。”
以什么理念和方法面對(duì)癌癥,一直是大家關(guān)心和困擾的問(wèn)題。醫(yī)家一直追求癌癥的早診斷、早治療。患者又多持“除惡務(wù)盡”的心態(tài),恨不得癌腫一日離己而去。這就鑄成人們認(rèn)識(shí)治療癌癥的誤區(qū),使醫(yī)患兩家易把“斬草除根”視作最佳方法。而且按現(xiàn)有倫理和道德觀念,患者家人一般處在焦躁氛圍中,也不情愿地選擇“拼一下”,接下來(lái)便接受了手術(shù)、放化療等治療。
事實(shí)是一味追求手術(shù)切除和攻毒抗癌的結(jié)果并不樂(lè)觀。有人在“中國(guó)腫瘤戰(zhàn)略防治研討會(huì)”上指出,“總體生存期尚處于低水平狀態(tài)……”對(duì)患者來(lái)說(shuō),磨難和痛苦接踵而至,可以想象患者痛苦的內(nèi)心世界,人財(cái)兩空者又何其多也!
當(dāng)看到本來(lái)自覺(jué)身體健壯,正常工作,僅因例行體檢而知患上癌癥,接著數(shù)月便死去,死的那么容易讓你無(wú)法理解。對(duì)此,許多醫(yī)生的心情也只有無(wú)奈:難道這是我們想要的臨床結(jié)果?捫心自問(wèn),病人假若不去體檢,情況如何……醫(yī)生的責(zé)任是解除患者疾苦,如果做不到這一點(diǎn),功過(guò)將何以評(píng)說(shuō),能用科研來(lái)搪塞和自我安慰嗎!面對(duì)現(xiàn)狀,不少專(zhuān)家感慨,醫(yī)療的目的是讓患者好好活著。可見(jiàn)深入探索新的腫瘤防治理論和防治理念是何等重要。
經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期醫(yī)學(xué)實(shí)踐、結(jié)合中醫(yī)理論,我形象地將主要采取手術(shù)、放化療、攻毒等法,旨在一味追求攻殺腫瘤的方法,稱(chēng)之為“霸道治癌”。與之區(qū)別,本著前賢“仁心仁術(shù)”、“無(wú)為而治”、“不治而治”、“不藥而愈”的傳統(tǒng)思想,循安撫鼓勵(lì),“順其自然”,不刻意剿殺……結(jié)合西醫(yī)對(duì)癥與支持療法,我引導(dǎo)腫瘤患者“以靜應(yīng)動(dòng)”,樹(shù)立與腫瘤長(zhǎng)期“和平共處”帶病延年理念。這種綜合的心理、藥物、康復(fù)等治療理念和實(shí)踐方法,我稱(chēng)之為“王道治癌”。經(jīng)過(guò)多年臨床取得令人滿(mǎn)意的效果。
我還客觀地指出“霸道”治癌的現(xiàn)狀和弊端。進(jìn)而結(jié)合中國(guó)國(guó)情,對(duì)國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家推重的機(jī)體重要抗癌機(jī)制——原發(fā)癌轉(zhuǎn)移到機(jī)體其他部位時(shí)要經(jīng)歷數(shù)月至數(shù)年的“休眠期”說(shuō),進(jìn)行了創(chuàng)新性論述,提出了較“休眠期”說(shuō)更具積極科學(xué)的腫瘤防治“相持期”說(shuō),并通過(guò)對(duì)“相持期”的論述,闡述了“王道治癌”的具體方法。在“相持期”,力求讓癌癥患者與癌瘤長(zhǎng)期和平共處、帶病延年。
古往今來(lái),人們及醫(yī)學(xué)界對(duì)疾?。ㄓ绕涫侵匚<膊。┚暈槭異翰簧獾摹暗満Α?,有病就要求醫(yī)吃藥,醫(yī)生則以治病用藥自居,均信奉一個(gè)“治”字。故而,人們常將自己與疾病的關(guān)系比之如“農(nóng)夫和蛇” “東郭先生和狼”不可憐憫,務(wù)必除惡務(wù)盡,于是,善良的“東郭先生”才總是被世人“責(zé)備”。
即便醫(yī)學(xué)著述提及“帶瘤生存”,也都是作為說(shuō)明療效觀察的時(shí)間概念進(jìn)行表述的。如提到“療效觀察”, 說(shuō)“帶瘤生存半年”,也只是在褒揚(yáng)治療手段的成果。
本人在臨床中體會(huì)到“與癌和平共處,帶瘤延年”應(yīng)是人類(lèi)應(yīng)該接受的自然現(xiàn)象,而不必刻意將“瘤”置于死地而后快?!稗r(nóng)婦和蛇”未必要你死我活,要改變思維,要倡導(dǎo)人與癌瘤“和平共處”。一般聽(tīng)來(lái),這似乎是說(shuō)“農(nóng)婦和蛇要和平共處……”是的,16年前在國(guó)內(nèi)最早發(fā)表“王道治癌”說(shuō),簡(jiǎn)直是天方夜譚,不可思議。直至2011年4月國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)界在南京召開(kāi)首屆關(guān)于“王道思想”服務(wù)于現(xiàn)代社會(huì)的全國(guó)性研討會(huì),才予理解。“王道治癌,與癌和平共處”說(shuō)與學(xué)界實(shí)現(xiàn)資源共享已歷時(shí)15年之多,相信在腫瘤防治及提升患者生存信心、意志和生活質(zhì)量等方面,或應(yīng)產(chǎn)生了一定的影響。
時(shí)至今日,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)也開(kāi)始對(duì)腫瘤重新認(rèn)識(shí),美國(guó)醫(yī)學(xué)家威爾什告誡:“對(duì)無(wú)害的腫瘤進(jìn)行手術(shù)和化療,不僅無(wú)益,反而有害,甚至帶來(lái)嚴(yán)重后遺癥,即使對(duì)有害腫瘤過(guò)早診治也非全部有益?!比揽拱﹨f(xié)會(huì)已指導(dǎo)意見(jiàn),建議60歲以上人群應(yīng)慎用手術(shù)和放化療治療。
至于“手術(shù)并發(fā)癥”這一“老生常談”問(wèn)題,近期更引人注目,黃志強(qiáng)院士指出:“如肝門(mén)膽管癌手術(shù)現(xiàn)在越做越多,切除率達(dá)70%,死亡率很高,病人生存率并未延長(zhǎng)?!蹦[瘤專(zhuān)家湯劍猷最近亦呼吁重視癌癥的“過(guò)度治療”問(wèn)題。
本人在1996年論文指出:實(shí)際上生命又是極堅(jiān)強(qiáng)的,像蘇武、白毛女……精神緊張是致病情加重的重要原因已為醫(yī)界共識(shí),可霸道治療給癌癥患者造成的深刻影響卻常被漠視。誠(chéng)然矢志斗癌無(wú)可非議,但作為個(gè)體則應(yīng)十分謹(jǐn)慎。其中兩敗俱傷者太多了,人們除置身斗爭(zhēng)之中難道別無(wú)他途嗎?君不見(jiàn)與惡人為鄰與毒蛇為伴相安無(wú)事者亦不乏其人。在一定時(shí)間與癌相持和平共處并力爭(zhēng)延續(xù)這一時(shí)間的可能性難道不存在嗎?患者能用平常心將癌癥以一些普通疾病視之,在本應(yīng)屬自己的時(shí)間里獲人生之樂(lè),難道不比讓患者在霸道治療下受盡煎熬更有意義嗎?唯應(yīng)強(qiáng)調(diào)的是:醫(yī)者仁術(shù),一切以病人為本,以關(guān)愛(ài)理解為前提。正如哲人圖姆斯所言:“那種不理解病患痛苦的性質(zhì)的醫(yī)學(xué)治療,不僅無(wú)法減輕病人的痛苦,而且其本身也常成為患者痛苦的根源?!?/p>
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)亦不清楚“休眠期”之具體時(shí)間。而且?guī)缀跛袑?duì)此研究的學(xué)者都認(rèn)為:處于休眠期的癌細(xì)胞是不發(fā)生裂變和增殖的,許多患者正是在此階段接受了手術(shù)等治療。顯然丟掉休眠期概念宣稱(chēng)某方法可延長(zhǎng)患者生存期是失實(shí)的……哈佛大學(xué)霍夫曼根教授指出:“當(dāng)切除處于休眠期的癌時(shí),患者機(jī)體的抗癌成分也喪失殆盡,平衡即被打破,發(fā)生癌轉(zhuǎn)移也難以避免了”。有學(xué)者告誡:“若再一味追求對(duì)癌的切除率,至少對(duì)某些患者說(shuō)要付出沉重的代價(jià)。”
“休眠期”稱(chēng)“相持期”更為確切,因?yàn)榭茖W(xué)家至今不知從癌形成之始至威脅個(gè)體生命時(shí)之時(shí)間是多少,卻已有發(fā)現(xiàn)癌而自然緩解現(xiàn)象之報(bào)道。應(yīng)賦予“相持期”更深刻含義,相持期對(duì)患者來(lái)說(shuō)不僅是走向死亡,更是走向勝利的關(guān)鍵時(shí)期……在“相持期”只講“斗殺”,無(wú)論對(duì)西醫(yī)抑或中醫(yī)說(shuō)均是不可取的。
我常對(duì)病家說(shuō),腫瘤自身與機(jī)體保護(hù)機(jī)制的關(guān)系就像是橘肉與橘皮的關(guān)系,人類(lèi)自我免疫能力是偉大的,起碼在癌形成之始,自身保護(hù)能力已開(kāi)始對(duì)其監(jiān)控了,盡管此時(shí)自己察覺(jué)不到,最新設(shè)備也檢查不到。至今醫(yī)學(xué)也無(wú)能力在隔著或不損傷橘子皮情況下去挖掉全部橘肉,更不必說(shuō)已發(fā)生轉(zhuǎn)移的情況了。
為鼓勵(lì)患者帶癌生存信心,我還講了一個(gè)自己常思考的現(xiàn)象:自然界中小樹(shù)苗是極少長(zhǎng)疙瘩(腫瘤)的,可老樹(shù)沒(méi)有幾棵不長(zhǎng)的,尤其是千年老樹(shù),疙瘩摞疙瘩,有的樹(shù)心都空了,可它仍頑強(qiáng)活著,葉綠枝茂。人類(lèi)何嘗不是如此堅(jiān)強(qiáng)。我們?yōu)槭裁床豢梢苑催^(guò)來(lái)想,腫瘤也可能是生命物體在其生命過(guò)程中的必然現(xiàn)象,或云是其可以長(zhǎng)壽的標(biāo)志呢?
青少年德育工作提供新的契機(jī)。在生物知識(shí)的教學(xué)和技能的訓(xùn)練中要滲透德育教育。教師要在教學(xué)中實(shí)現(xiàn)科學(xué)性和思想性的統(tǒng)一,在潛
移默化中對(duì)學(xué)生進(jìn)行政治導(dǎo)向、情感陶冶、意志培養(yǎng)、道德規(guī)范。中學(xué)生物學(xué)科擔(dān)負(fù)著促進(jìn)學(xué)生全面發(fā)展、培養(yǎng)社會(huì)主義建設(shè)合格人才
的任務(wù)。生物教師既要教書(shū),又要育人。
關(guān)鍵詞:生物教學(xué);德育教育;滲透;
重視生物課的德育功能,掌握生物學(xué)科思想教育的特點(diǎn)和方法,才能增強(qiáng)思想教育的效果。
一、把“三熱愛(ài)”教育貫穿于教學(xué)全過(guò)程
對(duì)學(xué)生的思想教育,應(yīng)始終堅(jiān)持把愛(ài)黨、愛(ài)國(guó)、愛(ài)社會(huì)主義的教育放在首位,貫穿于教學(xué)的全過(guò)程。教育內(nèi)容不僅包括謳歌黨的豐功偉績(jī),贊頌社會(huì)主義祖國(guó)的繁榮昌盛及社會(huì)主義制度的優(yōu)越,還應(yīng)包括國(guó)情教育和黨的基本路線、方針和政策的教育。生物學(xué)科在這方面有著自己的優(yōu)勢(shì)。
例如,植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)和自然資源、生態(tài)環(huán)境保護(hù)教育,生理衛(wèi)生中的計(jì)劃生育教育,以及緒論課等,就含有許多“三熱愛(ài)”教育的內(nèi)容,應(yīng)進(jìn)一步充實(shí)并寫(xiě)成相對(duì)穩(wěn)定的德育教材,重點(diǎn)講授。如在開(kāi)始學(xué)習(xí)生物課時(shí),介紹我國(guó)明朝李時(shí)珍編著的《本草綱目》,它不僅是藥物學(xué)專(zhuān)著,也是植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)、礦物學(xué)專(zhuān)著。李時(shí)珍對(duì)植物的分類(lèi)方法比西方植物分類(lèi)創(chuàng)始人林耐提出的方法要早一個(gè)世紀(jì)?!侗静菥V目》這部巨著被稱(chēng)為“東方藥學(xué)巨典”,譯成了十幾種文字。這些材料能讓學(xué)生了解我國(guó)古代生物學(xué)研究的成就和對(duì)世界的巨大貢獻(xiàn),激起強(qiáng)烈的愛(ài)國(guó)主義熱情。
在學(xué)科教學(xué)中滲透思想教育在時(shí)間上要把握適度,一般不宜太長(zhǎng)。實(shí)踐證明,只要所選的內(nèi)容貼切,結(jié)合得好,即使三言?xún)烧Z(yǔ),也能取得較好的效果。
二、聯(lián)系思想實(shí)際進(jìn)行有針對(duì)性的思想教育
要使德育工作真正取得成效,必須熟悉和了解學(xué)生,知道他們的樂(lè)趣和苦惱,摸清他們思想上存在的問(wèn)題,才能對(duì)癥下藥。
學(xué)習(xí)目的不明確,缺乏遠(yuǎn)大理想,是當(dāng)前學(xué)生中普遍存在的問(wèn)題。由此表現(xiàn)出兩種傾向:成績(jī)差的同學(xué),認(rèn)為升學(xué)無(wú)望,不如早打工早掙錢(qián),因而厭學(xué)情緒嚴(yán)重;成績(jī)好的同學(xué),目標(biāo)只瞄準(zhǔn)中考,只知埋頭苦讀,社會(huì)上的事情很少關(guān)心。這兩種傾向?qū)е聦W(xué)生對(duì)生物科表現(xiàn)出不同程度的不重視,前者認(rèn)為打工經(jīng)商用不著學(xué)生物,后者則認(rèn)為生物科中考成績(jī)滿(mǎn)分只有30分,花過(guò)多的時(shí)間去學(xué)習(xí)不合算。
在生物教學(xué)中解決學(xué)生的思想問(wèn)題,一要使學(xué)生明確生物學(xué)科與社會(huì)主義經(jīng)濟(jì)發(fā)展的關(guān)系,了解諸如環(huán)境、糧食、人口、能源等重大問(wèn)題都與生物學(xué)密切相關(guān)?,F(xiàn)代生物無(wú)論從廣度還是從深度上,都與其他學(xué)科有著交錯(cuò)滲透的關(guān)系。在教學(xué)的不同階段,要結(jié)合教材內(nèi)容,具體地闡述這種關(guān)系。例如,結(jié)合植物部分的教學(xué),介紹植物在環(huán)境保護(hù)中的作用,教育學(xué)生要綠化環(huán)境,自覺(jué)愛(ài)護(hù)一草一木;結(jié)合動(dòng)物學(xué)部分的教學(xué),介紹青蛙、鳥(niǎo)類(lèi)的益處,提倡愛(ài)護(hù)動(dòng)物,不要亂捕濫殺;結(jié)合人體部分的教學(xué),介紹環(huán)境污染對(duì)人體健康造成的危害,使學(xué)生認(rèn)識(shí)到保護(hù)環(huán)境就是保護(hù)每一個(gè)人自身的健康。二要充分介紹我國(guó)在生物科學(xué)研究上的新成就,培養(yǎng)學(xué)生的民族自豪感,使學(xué)生從小樹(shù)立趕超世界先進(jìn)水平的雄心壯志。同時(shí),針對(duì)在部分同學(xué)中存在的過(guò)分向往西方國(guó)家生活方式的傾向,配合理想教育,在教學(xué)中要有意識(shí)地培養(yǎng)學(xué)生樹(shù)立掌握科學(xué)知識(shí)報(bào)效祖國(guó)的思想。可結(jié)合教材講述一些生物學(xué)家的愛(ài)國(guó)事跡,使學(xué)生認(rèn)識(shí)到理想和追求是事業(yè)成功最根本、最持久的動(dòng)力,只有明確了為誰(shuí)而學(xué)、為什么而學(xué),才會(huì)始終保持奮發(fā)向上的激情。
三、以科學(xué)家的優(yōu)秀品質(zhì)激勵(lì)學(xué)生努力進(jìn)取
科學(xué)家是科學(xué)成果的創(chuàng)造者,是科學(xué)史的譜寫(xiě)者。讓學(xué)生了解科學(xué)家和科學(xué)史,是生動(dòng)而富有成效的德育手段。我們不可能要求每個(gè)學(xué)生都去當(dāng)科學(xué)家,但科學(xué)家的理想、情操、膽識(shí)、毅力、勤奮和創(chuàng)造力等方面的優(yōu)秀品質(zhì),是值得每一個(gè)人學(xué)習(xí)和效仿的。
介紹科學(xué)家和科學(xué)史,一定要有目的性和針對(duì)性。能否做到這一點(diǎn),關(guān)鍵仍然在于教師對(duì)學(xué)生的思想動(dòng)態(tài)是否心中有數(shù)。例如,教師在和學(xué)生接觸中,發(fā)現(xiàn)有不少學(xué)生為成績(jī)上不去而苦惱,并由此產(chǎn)生自卑情緒。為了激勵(lì)學(xué)生勇于進(jìn)取,教師在教學(xué)中介紹達(dá)爾文、童第周時(shí),要特別突出強(qiáng)調(diào)他們?cè)趯W(xué)生時(shí)代都不是令人羨慕的優(yōu)等生,但他們都以持久的愛(ài)好、刻苦的精神和堅(jiān)忍不拔的毅力獲得了成功。針對(duì)部分同學(xué)生物科成績(jī)不錯(cuò),但對(duì)數(shù)理化學(xué)習(xí)有畏難情緒,甚至有放棄不學(xué)的情況,在介紹分子遺傳學(xué)的發(fā)展史時(shí),講述分子遺傳學(xué)的奠基人孟德?tīng)栒且驗(yàn)榫哂袌?jiān)實(shí)的數(shù)學(xué)基礎(chǔ),才使他能對(duì)豌豆的性狀遺傳進(jìn)行了有效的統(tǒng)計(jì)和分析,從而發(fā)現(xiàn)了基因的分離和自由組合規(guī)律。針對(duì)部分同學(xué)重理論輕實(shí)踐、在實(shí)驗(yàn)中不注重觀察的現(xiàn)象,可反復(fù)強(qiáng)調(diào)生物學(xué)的研究成果,幾乎全部都是通過(guò)詳細(xì)觀察和科學(xué)分析取得的。
【摘要】 目的從生物利用性角度評(píng)價(jià)含朱砂中成藥中汞的潛在健康風(fēng)險(xiǎn)。方法火焰原子吸收法(FAAS)測(cè)定含朱砂中成藥總汞含量,體外消化透析法模擬人體胃腸消化,氫化物發(fā)生—原子熒光光譜法(HG-AFS)檢測(cè)得到含朱砂中成藥中汞生物利用性相關(guān)數(shù)據(jù)。結(jié)果6種常用含朱砂中成藥在人工胃液中汞溶出率在0.14%~1.96%范圍內(nèi),小腸階段汞可接受率為0.003 8%~0.011 7%?;诠谌梭w的半衰期和蓄積中毒量,反推導(dǎo)出含朱砂中成藥中汞元素的安全閾值為每人每天0.099 mg。結(jié)論綜合考慮6種常用含朱砂中成藥的汞含量水平、服用劑量、服用頻次等,說(shuō)明口服含朱砂中成藥引起汞暴露的安全風(fēng)險(xiǎn)性較低。
【關(guān)鍵詞】 生物利用性; 體外消化透析法; 含朱砂中成藥; 安全閾值; 汞
Abstract:ObjectiveTo introduce mercury bioaccessibility for risk assessment of Chinese patent medicines containing cinnabar. MethodsTotal mercury from Chinese patent medicines containing cinnabar was determined by FAAS. In vitro digestion and dialysis method was adopted to simulate the conditions of gastric compartment and intestinal compartment and dialysate fractions were collected and quantified by the means of HG-AFS. ResultsIn the gastric compartment, the solubility of mercury from six common Chinese patent medicines containing cinnabar ranged from 0.14%~1.96%; in the intestinal compartment, mercury bioaccessibility (0.003 8%~0.011 7%) was found for all the samples. The toxic threshold level of mercury was 0.099 mg/(person·day) for the case of Chinese patent medicines containing cinnabar on the basis of available data on mercury (cumulative toxic dose and half-life) in the body. ConclusionTaking into consideration on mercury level and intake of Chinese patent medicines containing cinnabar, the potential health risk seems to be low.
Key words:Bioavailability; In vitro digestion and dialysis method; Chinese patent medicines containing cinnabar; Toxic threshold; Mercury
朱砂又名丹砂、辰砂,是一味傳統(tǒng)中藥,主治安神定驚、明目解毒,其主要成分為硫化汞。在中成藥中,含有朱砂的品種占10%;在兒科中成藥中,含朱砂的品種占到了20.32%?!吨袊?guó)藥典》(2005年版Ⅰ部)正文中收載含朱砂的內(nèi)服成方制劑44種?!吨袊?guó)藥典》對(duì)萬(wàn)氏牛黃清心丸、保赤散等7種含朱砂中成藥附有朱砂含量測(cè)定一項(xiàng)(硫氰酸鹽容量分析法),并且對(duì)硫化汞的含量指標(biāo)做了具體規(guī)定[1]。但是,含朱砂中成藥中重金屬汞含量偏高,引起了人們對(duì)此類(lèi)中成藥服用安全性的擔(dān)憂(yōu)[2~4]。礦物類(lèi)中藥至今沒(méi)有相應(yīng)的安全質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[5],許多國(guó)家對(duì)中藥都采用食品重金屬限量標(biāo)準(zhǔn)來(lái)衡量其服用安全性。隨著中藥國(guó)際化進(jìn)程日益加快和人們健康意識(shí)的迅速提高,如何合理科學(xué)地對(duì)傳統(tǒng)礦物藥的服用安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)已經(jīng)成為當(dāng)前亟待解決的問(wèn)題。
眾所周知,含朱砂中成藥中汞元素主要以硫化汞形態(tài)存在,硫化汞是強(qiáng)化學(xué)惰性的,其溶解性很差[6]。從生物利用性(bioavailability)角度看,汞的全量并不能反映出人體吸收代謝汞的水平,只有一部分的汞能經(jīng)過(guò)消化吸收后進(jìn)入體內(nèi)。因此,評(píng)價(jià)中成藥中汞的安全性非常有必要進(jìn)行生物利用性方面研究。生物利用性是食品營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境化學(xué)領(lǐng)域中的概念,被定義為存在于一定基體中的目標(biāo)物經(jīng)口腔攝取后能夠到達(dá)體循環(huán)的部分,可分為以下3個(gè)過(guò)程:①經(jīng)口服攝入后,從基體釋放到人體胃腸消化道的部分,即文獻(xiàn)中常常出現(xiàn)的生物可接受性(bioaccessibility);②生物可接受部分穿過(guò)腸上皮細(xì)胞后被人體吸收的部分;③人體吸收部分經(jīng)過(guò)肝臟代謝后最終進(jìn)入體循環(huán)和機(jī)體組織的部分。因此,廣義的生物利用性等于以上3個(gè)過(guò)程生物可利用率的總乘積。在消費(fèi)品安全性評(píng)價(jià)方面,一般把生物可接受部分看作口服生物利用性的指標(biāo),因?yàn)樗从吵隽爽F(xiàn)實(shí)的最壞風(fēng)險(xiǎn)性[7]。
在參考體外消化法在食品[8~11]、環(huán)境土壤[12,13]、玩具[14]、含礦物類(lèi)中成藥[15~17]等方面研究成果的基礎(chǔ)上,本文采用體外消化透析法對(duì)幾種常用含朱砂中成藥中汞的生物利用性進(jìn)行了研究,建立了人體內(nèi)汞中毒劑量反推模型,對(duì)6種含朱砂中成藥中汞的健康風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了評(píng)價(jià)。
1 材料與儀器
1.1 儀器TAS-990火焰原子吸收分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),AFS-820雙道原子熒光光度計(jì)(北京吉大小天鵝儀器有限公司);GWA-UN Pure Water System(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)。
1.2 試劑與藥品 Hg標(biāo)準(zhǔn)貯備液:(國(guó)家鋼鐵材料測(cè)試中心鋼鐵研究總院);K2Cr2O7,KBH4,NaHCO3,NaOH,HgCl為AR級(jí)試劑,HClO4、H2SO4、HNO3、H2O2、HCl為GR級(jí)試劑,實(shí)驗(yàn)用水為GWA-UN Pure Water System制備的電阻率為18.2 MΩ超純水。胃蛋白酶(上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,BR);胰蛋白酶(上海楷洋生物技術(shù)有限公司,BR);豬膽鹽(上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,BR);D22mm透析袋(Beijing siyu biotechnology Co., Ltd),截留分子量(Molecular Weight Cut-off, MWCO)8 000~14 000。含朱砂中成藥購(gòu)自??谑兴幤烦?,其中包括大蜜丸1種(同仁安神丸),水蜜丸1種(天王補(bǔ)心丸),膠囊劑1種(復(fù)方蘆薈膠囊),水丸劑1種(仁丹),散劑2種(兒科七里散,紫雪)。
1.3 樣品制備對(duì)大蜜丸、水蜜丸、水丸,取20粒,剪碎或研碎成小塊混勻;對(duì)膠囊劑、散劑,取不少于20粒,倒出粉末狀內(nèi)容物混勻;最后,將以上樣品置于密封袋中,保存于干燥器中備用。
2 方法
2.1 體外消化透析法參照Miller[8]、Cámara[9]及龐京團(tuán)[15]等所述體外消化透析實(shí)驗(yàn)體系各項(xiàng)參數(shù),并進(jìn)行了適當(dāng)?shù)馗膭?dòng),實(shí)驗(yàn)步驟如下:將0.25 g樣品和25 ml pH=1.5的鹽酸溶液,加入到50 ml離心管中,用1 mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為1.5,再加入0.16 g/ml的胃蛋白酶液0.5 ml,旋緊蓋子,整個(gè)實(shí)驗(yàn)體系在密閉環(huán)境下振蕩100 min[(37±1)℃,80 r/min,下同]。將裝有5.1 ml 0.2 mol/L NaHCO3溶液的透析袋(長(zhǎng)10 cm,直徑22 mm)放入胃模擬消化物(pepsin digest)中,連續(xù)振蕩約45 min后,模擬環(huán)境pH為5.0。最后,在小腸模擬環(huán)境中加入胰液—膽鹽混合物2.5 ml,持續(xù)振蕩100 min。振蕩結(jié)束后,將透析袋從離心管中取出,收集透析液于PTFE內(nèi)杯中,消解后待測(cè),同樣方法作氯化汞和空白全過(guò)程對(duì)照,所得樣品均采用原子熒光光譜法測(cè)定。
2.2 中成藥汞含量的測(cè)定 火焰原子吸收光譜法(FAAS)測(cè)汞已有不少文獻(xiàn)報(bào)道,比如FAAS對(duì)汞精礦電氧化浸出液[18]、工業(yè)硫酸[19]、抗缺氧藏藥[20]、報(bào)春花及冬葵[21]中汞含量的測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)參考王志華等[22]的方法采用HNO3-H2SO4-HClO4(4∶1∶1)體系高壓密封消解中成藥,優(yōu)化儀器工作條件后(見(jiàn)表1),F(xiàn)AAS法測(cè)定復(fù)方蘆薈膠囊中的汞含量為(11.62±0.3)%(n=3,P=0.95),與龐京團(tuán)等[23]汞量法測(cè)定結(jié)果(11.70±0.4)%基本一致,表明本方法在準(zhǔn)確度、精密度上均滿(mǎn)足測(cè)試要求,可用于含朱砂口服中成藥中汞含量的測(cè)定。
2.3 數(shù)據(jù)處理 中成藥中汞的胃腸階段溶出率、生物可接受率的計(jì)算參考文獻(xiàn)[15,23]。
3 結(jié)果與討論
3.1 中成藥中汞的生物利用性含朱砂中成藥中汞的生物利用性結(jié)果見(jiàn)表2。在人工胃液中除天王補(bǔ)心丸、復(fù)方蘆薈膠囊的汞溶出率較高外,其它中成藥的溶出率在0.14%~0.67%;在小腸階段,汞的透析率以同仁安神丸最高(0.011 7%),其次為仁丹(0.009 0%)、天王補(bǔ)心丸(0.007 7%)、兒科七厘散(0.006 7%)、紫雪(0.004 0%)和復(fù)方蘆薈膠囊(0.003 8%)。含朱砂中成藥中溶出汞遠(yuǎn)低于汞總量,這說(shuō)明大部分汞都是以難溶形式存在;經(jīng)過(guò)小腸模擬消化后的可透析汞量更低,除同仁安神丸外,生物可接受率都小于0.01%,大大低于胃階段溶出率,這可能是由于透析過(guò)程只允許分子量小于透析膜MW的物質(zhì)通過(guò),模擬消化過(guò)程中汞與蛋白酶或者胰液-膽鹽結(jié)合形成復(fù)合物后就很難通過(guò)透析膜。
目前文獻(xiàn)報(bào)道的體外消化法的各實(shí)驗(yàn)參數(shù)還未統(tǒng)一,所采用的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)各有特點(diǎn),涉及到人工胃腸消化液組成和pH值、液固比、經(jīng)口腔攝入物質(zhì)在胃腸道駐留時(shí)間、目標(biāo)元素測(cè)定前所采用的分離方法等[25]。以目標(biāo)元素在測(cè)定前所采用分離方法為例,文獻(xiàn)報(bào)道有離心、0.45 μm膜過(guò)濾、透析等,比如Camara等[9]分別采用透析法和離心法對(duì)學(xué)生常用膳食搭配中的Ca、Fe、Zn、Cu生物利用性的研究,Iris Koch等[17]離心法對(duì)牛黃解毒片中的砷生物利用性的研究,褚卓棟等[24]膜過(guò)濾法得到了六神丸、醫(yī)癇丸等7種添加朱砂中成藥中汞的生物可接受性數(shù)據(jù),龐京團(tuán)等[15]確定了透析法測(cè)定朱砂中汞的生物利用性的實(shí)驗(yàn)條件,并將該方法推廣到了含朱砂中成藥汞生物利用性的研究[11]。透析不僅可以起到分離目標(biāo)物的作用還能模擬食物從胃到小腸生理pH值逐漸變化的過(guò)程,即將裝有5.1 ml 0.2 mol/L NaHCO3(經(jīng)酸度滴定實(shí)驗(yàn)計(jì)算得到)放入胃模擬消化物中,因此,本文采用了透析法[8,9,15]。表1 火焰原子吸收分光光度計(jì)工作參數(shù)表2 六種含朱砂口服中成藥中汞的生物利用性
3.2 對(duì)含朱砂口服中成藥的安全性評(píng)價(jià)根據(jù)日本熊本和新瀉水俁病患者所攝入有毒魚(yú)貝的汞濃度和估計(jì)攝入量而推算出體內(nèi)100 mg的蓄積量為中毒劑量[26]。此外,邊振考等[27]也曾報(bào)道人體汞蓄積中毒量為100 mg。甲基汞安全閾值研究[28]已有文獻(xiàn)報(bào)道,汞在人體內(nèi)半衰期為65~70 d[29],本文以汞的中毒劑量和半衰期來(lái)反推出日攝入汞的安全閾值。為計(jì)算簡(jiǎn)單此處以70 d計(jì),設(shè)日攝入含朱砂中成藥中生物可接受汞量為m(單位mg),服用f天后,人體內(nèi)蓄積汞量N可表示為:
N=m[(12)f-070+(12)f-170+……+(12)170+(12)070] ①人體表現(xiàn)汞中毒時(shí),人體內(nèi)蓄積汞含量N=100 mg,則有m[(12)f-070+(12)f-170+……+(12)170+(12)070]=100 mg對(duì)上式進(jìn)行求和化簡(jiǎn)可得下式:100m-100m×2170+2170=2-f70 ②要使人體汞中毒,則該方程必須有解m。因?yàn)?-f70>0,則100m-100m×2170+2170>0 ③2170≈1.01由③求得m>0.99 mg,故當(dāng)f趨向于無(wú)窮大時(shí),最小汞中毒量為0.99 mg,考慮到人體攝入汞的其它來(lái)源,取其10倍的安全系數(shù),則為0.099 mg ,即攝入含朱砂中成藥過(guò)程中,汞生物可接受量超過(guò)0.099 mg將對(duì)人體存在較大中毒風(fēng)險(xiǎn)。
據(jù)2003年糧食及農(nóng)業(yè)組織/世界衛(wèi)生組織聯(lián)合食物添加劑專(zhuān)家委員會(huì)(JECFA)的建議,汞的每周可容忍攝入量(provisional tolerable weekly intakes, PTWIs)為5 g/kg(BW)[30],其含義為按每公斤體重計(jì)算,每周可容忍攝入汞量為5 g。若以人體平均體重70kg計(jì)算得到每日可容忍攝入汞量(tolerable daily intake, TDI )為0.050 mgHg。由人體內(nèi)汞中毒劑量反推導(dǎo)出的理論安全閾值與JECFA 建議TDI值處在同一數(shù)量級(jí)水平,可見(jiàn)其作為汞暴露安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)指標(biāo)具備合理性。實(shí)驗(yàn)所用的6種含朱砂口服中成藥每日最大生物可接受汞量見(jiàn)表3,其中,同仁安神丸的日最大攝入汞量已非常接近安全劑量,其他5種中成藥則要低1~2個(gè)數(shù)量級(jí)。因此,若嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)標(biāo)明劑量(注意:兒童需減量服用)短期服用情況下,由口服含朱砂中成藥引起汞暴露的安全風(fēng)險(xiǎn)性比較低。表3 6種含朱砂口服中成藥相關(guān)信息
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關(guān)鍵詞 電噴霧 質(zhì)譜 定性分析 藥物代謝 蛋白質(zhì)研究
近年來(lái),隨著醫(yī)藥的不斷發(fā)展,天然藥物化學(xué)中天然產(chǎn)物的提取產(chǎn)物,藥物分析中生物體內(nèi)的代謝研究,還有生物化學(xué)中具有生理活性的多肽和蛋白質(zhì),逐漸成為當(dāng)前研究熱點(diǎn)[1];后基因組學(xué)的蛋白組學(xué),在目前也顯得相當(dāng)活躍,而其中很多高極性、難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定的大分子有機(jī)化合物出現(xiàn),對(duì)其檢測(cè)有難度。質(zhì)譜作為一種分析檢測(cè)手段已經(jīng)出現(xiàn)幾十年,電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)也已發(fā)展十幾年,成為一種通用質(zhì)譜技術(shù),它所涵蓋的分析應(yīng)用領(lǐng)域極其廣泛,電噴霧質(zhì)譜的出現(xiàn)解決不揮發(fā)和熱不穩(wěn)定等化合物的分析,應(yīng)用于中、高極性的化合物,可以檢測(cè)的分子質(zhì)量范圍從300~2000u的小分子化合物到分子質(zhì)量超過(guò)15000u的生物大分子[2],對(duì)于蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子在電噴霧質(zhì)譜中容易形成多電荷峰,分子量測(cè)定準(zhǔn)確度高,現(xiàn)今電噴霧質(zhì)譜成為藥學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域重要的標(biāo)志性工具,在定性腫瘤差異蛋白方面更是重要的工具,擁有良好的前景。
1 電噴霧質(zhì)譜特點(diǎn)
1.1 電噴霧質(zhì)譜的發(fā)展
電噴霧和質(zhì)譜成功地結(jié)合,是由Dole及其合作者在1968年中首次闡述;1984年Yamashita和Fenn發(fā)表的論文更清晰地闡述電噴霧電離機(jī)理,并認(rèn)為可以用作液質(zhì)聯(lián)用(LC/MS)的接口;20世紀(jì)90年代,儀器制造和實(shí)際應(yīng)用都表現(xiàn)出高速增長(zhǎng)和全面發(fā)展的態(tài)勢(shì)。1989年,報(bào)告ESI離子源與傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜聯(lián)用成功范例;1991年,Sin,Boyle和Whitehouse報(bào)道電噴霧/飛行時(shí)間質(zhì)譜,實(shí)現(xiàn)更高的準(zhǔn)確度,更高的分辨率;隨后離子阱電噴霧質(zhì)譜、電噴霧-四級(jí)桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜儀(ESI-Q-TOF-MS)為代表的儀器在各行業(yè)應(yīng)用開(kāi)來(lái)。
1.2 電噴霧過(guò)程
將溶于極性、揮發(fā)性溶劑(如甲醇,乙腈,丙酮等)的樣品溶液通過(guò)電噴針傳輸,在電場(chǎng)作用下形成泰勒錐,在電噴針尖部形成霧狀正或負(fù)離子富集,液滴通過(guò)溶劑的揮發(fā)逐漸縮小,其表面上的電荷密度不斷增大;當(dāng)電荷之間的排斥力克服表面張力時(shí),液滴分裂,產(chǎn)生單個(gè)多電荷離子;生出的樣品氣相離子經(jīng)質(zhì)量分析器分析,從而測(cè)出它們的質(zhì)荷比[3~6] 。
1.3 電噴霧電離的優(yōu)勢(shì)
電噴霧電離為一種軟電離方式,即給樣品較小的電離能量,可以得到不穩(wěn)定化合物的分子離子峰,且譜圖簡(jiǎn)單,主要用于定性分析。Loo等 [7]歸納出電噴霧質(zhì)譜的4“S”特點(diǎn):即靈敏( Sensitivity)、快(Speed) 、專(zhuān)一(Specificity),并能直接給出化學(xué)計(jì)量比(stoichiomotry)。電噴霧質(zhì)譜的成功在于2個(gè)重要的部分,電噴霧提供相對(duì)簡(jiǎn)單的方法使非揮發(fā)性的溶劑形成氣態(tài),與此同時(shí)質(zhì)譜提供更直接、靈敏度好的檢測(cè)[8]。電噴霧質(zhì)譜可以檢測(cè)阿摩爾級(jí)別濃度的樣品[2],并且ESI可在一級(jí)質(zhì)譜(MS)條件下獲得很強(qiáng)的待測(cè)物準(zhǔn)分子離子峰,并且可借助MSn(n=2~10)對(duì)準(zhǔn)分子離子進(jìn)行多級(jí)裂解,進(jìn)而獲得更為豐富的結(jié)果信息[9]。ESI已成為一種成熟、高靈敏、快速的質(zhì)譜技術(shù)。比較質(zhì)譜的離子源(見(jiàn)表1),可以看出ESI的優(yōu)勢(shì)所在。
2 近期電噴霧質(zhì)譜進(jìn)展
近年來(lái),電噴霧質(zhì)譜已經(jīng)不限于小分子的檢測(cè),伴隨著蛋白組學(xué)、基因組學(xué)的發(fā)展,帶動(dòng)生物大分子分析的發(fā)展。蛋白等大分子化合物樣品量少,不適合過(guò)于復(fù)雜的預(yù)處理過(guò)程,很多專(zhuān)家致力于提高該技術(shù)的離子化效率及減少樣品預(yù)處理過(guò)程,能對(duì)復(fù)雜基體中的分析物進(jìn)行簡(jiǎn)單、快速、實(shí)時(shí)分析。新發(fā)展出極低流速下的電噴霧質(zhì)譜,被稱(chēng)為納升電噴霧質(zhì)譜(nanoESI/MS),電噴霧流速采用納升級(jí)流速,流速低,產(chǎn)生的液滴體積小,穩(wěn)定液流的流量越低,則電離效率幾乎隨之成比例地提高,對(duì)于蛋白樣品量小的物質(zhì)可以減少樣品消耗量,又不會(huì)減弱信號(hào)強(qiáng)度,導(dǎo)致去溶劑化效率、離子化效率及離子轉(zhuǎn)移至分析器的效率都比常規(guī)ESI源高,而且噴霧穩(wěn)定性好[10]。對(duì)于電噴霧電離方式也發(fā)展出電噴霧解吸電離DESI、電噴霧萃取電離EESI 等,表2中按先后順序總結(jié)電噴霧電離方式的發(fā)展。這些電離方式大多不經(jīng)過(guò)樣品預(yù)處理,可以進(jìn)行實(shí)時(shí)、快速的質(zhì)譜分析。
電噴霧的首要問(wèn)題是樣品的高純度,因?yàn)橐恍┎患兊奈镔|(zhì)易導(dǎo)致毛細(xì)管?chē)婌F堵塞。近些年來(lái),為避免ESI 堵塞,出現(xiàn)一些非毛細(xì)管?chē)娚浼夹g(shù),這些技術(shù)利用不同的材料尖端形成電噴霧,如銅線及不銹鋼針,用放電針為材料,直接離子化,避免毛細(xì)管堵塞現(xiàn)象,樣品損失也減少,更適合微量樣品的檢測(cè)。最近,紙、牙簽等尖端噴霧技術(shù)都成功地用于復(fù)雜混合樣品的分析,使紙兼有導(dǎo)電和分離的作用,這項(xiàng)技術(shù)可以檢測(cè)很多組織,對(duì)于醫(yī)藥中穿刺活檢都可以進(jìn)行檢測(cè),使得檢測(cè)更方便、快捷[11]。
電噴霧質(zhì)譜一般與液相質(zhì)譜聯(lián)用較多,進(jìn)行分離鑒定,而一些新的液相色譜( LC) 分離技術(shù),例如超高效液相色譜( UPLC) 和快速高分離液相色譜( RRLC),研究新液相色譜和電噴霧質(zhì)譜的連接,更好、更快地完成醫(yī)藥測(cè)定鑒定過(guò)程。郭小芳等[12]采用RRLC-ESI-MS方式在20min測(cè)定生物堿類(lèi)成分,馬長(zhǎng)振等[13]用UPLC-ESI-MS測(cè)定白茅根的分析,僅在35min內(nèi)完成鑒定工作。這些新出現(xiàn)的電噴霧質(zhì)譜都為更好、更快、更高效地進(jìn)行分離鑒定做出積極貢獻(xiàn)。
3 電噴霧質(zhì)譜在醫(yī)藥中的應(yīng)用
3.1 定性分析藥物及天然產(chǎn)物
電噴霧質(zhì)譜可以進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜,電噴霧軟電離方式,導(dǎo)致一級(jí)全掃描質(zhì)譜中主要得到的是分子離子峰,這種分子離子峰能反映被測(cè)物組成的分子量信息;二級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜(MS2)可直接對(duì)粗分離物中的已知成分進(jìn)行快速鑒定,還可以對(duì)樣品中具有相同生藥來(lái)源的未知化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)。這為天然產(chǎn)物的物質(zhì)組成分析提供一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏的方法,簡(jiǎn)化繁瑣的分離、純化過(guò)程[14]。
天然產(chǎn)物是新藥開(kāi)發(fā)的重要部分,目前使用的很多藥物都直接或間接來(lái)自天然產(chǎn)物。許國(guó)旺等[15]人采用傅里葉變換電噴霧質(zhì)譜用于鑒定丙二?;藚⒃碥?,加入甲酸銨流動(dòng)相進(jìn)行優(yōu)化,選定濃度為15mM,譜圖效果最好,電噴霧為負(fù)離子模式,丙二?;藚⒃碥盏亩嗉?jí)質(zhì)譜具有特征的中性丟失信息,中性丟失44,根據(jù)此特點(diǎn),可用于該類(lèi)化合物的定性分析,而最終測(cè)定結(jié)果均通過(guò)準(zhǔn)確質(zhì)量驗(yàn)證,實(shí)驗(yàn)測(cè)定值與理論值偏差小于2ppm,提供準(zhǔn)確、靈敏的方法。張道來(lái)等[16]人采用正離子模式,在60min內(nèi)鑒定羅氏車(chē)盤(pán)車(chē)樣品的13種化合物,還對(duì)刺身皂苷進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)證明高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜法能克服皂苷類(lèi)物質(zhì)分子內(nèi)由于寡糖鏈存在導(dǎo)致難鑒別的困難,對(duì)于皂苷類(lèi)化合物的鑒別及結(jié)構(gòu)分析中顯示越來(lái)越重要的作用。李娟等[17]等對(duì)青蒿素類(lèi)藥物的質(zhì)譜裂解特征進(jìn)行分析,采用注射泵直接進(jìn)樣,正離子分析模式,對(duì)準(zhǔn)離子峰進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)解離(CID) 研究,更好、更快地研究青蒿素的代謝以及結(jié)構(gòu)分析。大黃類(lèi)化合物也是天然產(chǎn)物,馬小紅等[18]采用正負(fù)離子全掃描,同樣進(jìn)行CID二級(jí)掃描,負(fù)離子掃描得到譜圖更清晰,更好地做好特征分析。胡楊等[19]等發(fā)現(xiàn)采用負(fù)離子模式,川穹質(zhì)譜響應(yīng)度高,進(jìn)而對(duì)川穹進(jìn)行化學(xué)成分分析。吳茱萸也是傳統(tǒng)中藥,高鵬等[20]采用正負(fù)離子模式分別研究裂解方式,并發(fā)現(xiàn)負(fù)離子的響應(yīng)更高、定量更好,對(duì)今后半萜吲哚類(lèi)生物堿的鑒定檢測(cè)提供一定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。李麗等[21]利用電噴霧質(zhì)譜分析鑒定防風(fēng)中的未知成分,采用正離子模式。
而對(duì)于抗生素,廖瓊峰等[22]人研究慶大霉素采用電噴霧正離子模式,對(duì)其碎片峰進(jìn)行分析,二級(jí)離子打碎,打碎脫去C環(huán)(氨基葡萄糖)碎片,說(shuō)明C環(huán)與脫氧鏈霉胺之間的碳-氧鍵容易斷裂,可更好地用于今后慶大霉素定性和定量分析。抗生素在食品中的應(yīng)用近年來(lái)也大受關(guān)注,采用UPLC/MS/MS,乙腈、七氟丁酸水溶液作為流動(dòng)相,采用正離子電噴霧模式,多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)(MRM),僅需時(shí)3min,精確度、準(zhǔn)確度良好。方東升[23]利用電噴霧質(zhì)譜為軟電離方式,在全掃描一級(jí)質(zhì)譜圖上主要得到的是分子離子峰,通過(guò)分析直接得到化合物的分子量,從而推測(cè)出金霉素樣品中的雜質(zhì)成分,快速地對(duì)金霉素進(jìn)行監(jiān)控。朱侃等[24]采用質(zhì)譜等一系列方式測(cè)定頭孢克洛的結(jié)構(gòu),采用正離子模式得到頭孢克洛的特征峰和純度?;艏邀惖萚25]采用ESI-Q-TOF-MS青霉素類(lèi)抗生素、頭孢菌素類(lèi)抗生素及喹諾酮類(lèi)藥物進(jìn)行穩(wěn)定性研究。顯示出快速穩(wěn)定、所需樣品少等優(yōu)點(diǎn),為今后電噴霧質(zhì)譜在抗生素方面的應(yīng)用做一定基礎(chǔ)研究。
電噴霧質(zhì)譜在中藥配伍方面也有很重要的影響,越皓等[26]人研究附子不同配伍藥對(duì)生物堿的影響和附子中雙酯型生物堿毒性,研究配伍減毒使其更好地發(fā)揮藥效作用,通過(guò)分析生附子水煎液的電噴霧質(zhì)譜圖,可以看出生附子中主要的3類(lèi)生物堿(雙酯型、單酯型和脂類(lèi)生物堿),以及其他小分子的化合物,然后分別和各種藥材配伍測(cè)定驗(yàn)證,烏頭堿類(lèi)生物堿在電噴霧條件下形成的離子峰相對(duì)強(qiáng)度與其物質(zhì)的量成正比例關(guān)系,電噴霧質(zhì)譜圖中各離子的相對(duì)豐度可以說(shuō)明對(duì)應(yīng)離子的相對(duì)含量變化,來(lái)看清雙酯型是否減少,是否有配伍無(wú)毒性。甘遂甘草配伍[27]研究水煎液中巨大戟二萜醇型化合物在質(zhì)譜中離子強(qiáng)度的變化,對(duì)萜醇類(lèi)能更好地檢測(cè)。中藥黃芪與當(dāng)歸配伍采用正離子模式一級(jí)掃描,得到特征峰后進(jìn)行二級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜分析,碰撞能量20%~40%,查看異丙酮類(lèi)的成分變化,質(zhì)譜譜圖清晰、準(zhǔn)確、靈敏度高[28]。閆靜等[29]根據(jù)生物堿類(lèi)化合物具有較強(qiáng)質(zhì)子親和勢(shì)的特點(diǎn),利用電噴霧質(zhì)譜在電噴霧電離條件下極易形成質(zhì)子化分子,進(jìn)行馬錢(qián)子與甘草的配伍測(cè)定,測(cè)定出有毒的成分降低。綜上,利用電噴霧質(zhì)譜技術(shù)可以很好地說(shuō)明中藥的配伍原則。
3.2 現(xiàn)代藥物代謝和藥物動(dòng)力學(xué)
ESI電離特別溫和,成為分析不穩(wěn)定共軛代謝物的適合方法,確定藥物在體內(nèi)的代謝,以評(píng)估藥物的安全性、有效性。ESI電離技術(shù)效率高,可以獲得更低的檢測(cè)下限,可以用于范圍更大的結(jié)構(gòu)類(lèi)型。Karthick Vishwanathan
等[30]人運(yùn)用電噴霧質(zhì)譜測(cè)定人血漿中的莫西沙星,運(yùn)用洛美沙星做內(nèi)標(biāo),定量限為1ng/mL,能更好地檢測(cè)出代謝產(chǎn)物,定量采用正離子模式,因?yàn)榇嬖诎被屯?,很容易質(zhì)子化,而且檢測(cè)時(shí)間短,僅用4min,時(shí)間短,靈敏度高。李秋莎等[31]應(yīng)用LC-MS/MS法研究茶多酚在大鼠體內(nèi)的多組分藥動(dòng)學(xué),運(yùn)用負(fù)離子模式,特異性很高,分析樣品僅需4min,大大縮短分析時(shí)間,LLOQ能達(dá)到5ng/mL,檢測(cè)靈敏度得以提高。
萬(wàn)益群等[32]對(duì)人體尿液中黃蝶呤與異黃蝶呤進(jìn)行測(cè)定,蝶呤類(lèi)化合物采用電噴霧質(zhì)譜起到雙重定性的作用,通過(guò)選擇離子來(lái)進(jìn)行定量,能提高靈敏度,2種蝶呤正離子信號(hào)較負(fù)離子信號(hào)相對(duì)強(qiáng)的多,經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明,黃蝶呤與異黃蝶呤在ESI+模式中全掃描質(zhì)譜以離子峰[M+H]+穩(wěn)定存在,采用健康人和癌癥的尿液,分別進(jìn)行定量分析,方法快捷、準(zhǔn)確。
ESI離子源能電離80%~90% 的化合物,屬于通用型離子源,適用于多組分篩選[33]。沈保華等[34]用電噴霧質(zhì)譜對(duì)血液及尿液中及其代謝物的篩選及確證,采用正離子電噴霧,測(cè)定56種化合物絕大部分最低檢測(cè)限小于0.1ng/mL,建立包含及其代謝物共61種化合物的精確相對(duì)分子質(zhì)量數(shù)據(jù)庫(kù)分析方法,Jun Qian等測(cè)定紫杉醇在人血漿中的藥代動(dòng)力學(xué),0.3mL血漿,定量下限為1ng/mL。
馬海英等[35]檢測(cè)糞中黃山藥總皂苷及其代謝產(chǎn)物。整體給予大鼠灌服黃山藥總皂苷于給藥后不同時(shí)間,采集尿及血清樣品,用ESI- MS檢測(cè)吸收入血成分,測(cè)定時(shí)選擇負(fù)離子方式檢測(cè),先用全掃描一級(jí)質(zhì)譜方式獲得待測(cè)物的準(zhǔn)分子離子峰[M- H]–,離子源溫度為120℃,然后用ESI- MSn離子阱技術(shù)對(duì)準(zhǔn)分子離子峰及其碎片離子峰進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜分析,獲得相應(yīng)的子離子質(zhì)譜圖。
高博彥等[36]測(cè)定復(fù)方酸棗仁湯的血漿代謝情況,在負(fù)離子模式下,僅進(jìn)樣10μL,在60min內(nèi),梯度洗脫,5%~90%乙腈溶液,檢測(cè)到各色譜峰在負(fù)離子模式下的分子離子峰[M-H]–、[M+Cl]–,由分子峰測(cè)定可能的分子量,推斷一定的結(jié)果,對(duì)比原有成分和人血吸收成分,有些許不同,含皂苷類(lèi)的物質(zhì)如酸棗仁,一般以原型或者苷元形式存在,一些含揮發(fā)油的物質(zhì)入血較少。
周麗君等[37]測(cè)定注射用艾普拉唑鈉用丁螺環(huán)酮作為內(nèi)標(biāo),用比格犬做實(shí)驗(yàn),最低濃度可以達(dá)到5μg/L,且在5min內(nèi)出峰,采用電噴霧質(zhì)譜簡(jiǎn)單快捷,特異性好,進(jìn)行血藥濃度的測(cè)定,與劑量呈線性。
陳永婧等[38]利用高分辨電噴霧四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜,正離子掃描模式對(duì)膀胱癌血清和尿液代謝組學(xué)進(jìn)行研究,對(duì)潛在的標(biāo)志物進(jìn)行篩選、鑒定,對(duì)代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析,對(duì)于電噴霧質(zhì)譜而言非??旖?、方便。楊杰等[39]研究小柴胡湯對(duì)抑郁的影響,收集尿液,收集血液,正負(fù)離子同時(shí)掃描,看是否能應(yīng)用于現(xiàn)在流行的抑郁疾病。
3.3 蛋白質(zhì)方法
電噴霧特點(diǎn)在于可產(chǎn)生大分子化合物(肽,蛋白質(zhì))的多電荷離子,根據(jù)不同電荷數(shù)離子的質(zhì)荷比可準(zhǔn)確計(jì)算大分子化合物的分子質(zhì)量和分析復(fù)雜生物介質(zhì)中的樣品,跟傳統(tǒng)的質(zhì)譜相比,擴(kuò)大檢測(cè)的Mr 范圍,提高靈敏度,根據(jù)馬安德等研究多肽的相對(duì)分子量問(wèn)題,用電噴霧質(zhì)譜測(cè)定蛋白質(zhì)和多膚的相對(duì)分子質(zhì)量,精確度可達(dá)到0.10%~0.01%。遠(yuǎn)比精度只有大約5%的聚丙烯酞膝凝膠電泳、凝膠過(guò)濾、蔗糖密度離心法等經(jīng)典的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定技術(shù)更快捷、更精確[40]。它還可與高效液相色譜(HPLC) 和高效毛細(xì)管電泳(CE) 等高效的分離方法相連接,結(jié)合2種系統(tǒng)分離和高靈敏、高準(zhǔn)確度的優(yōu)點(diǎn),擴(kuò)大質(zhì)譜在生物領(lǐng)域的應(yīng)用[7]。
電噴霧質(zhì)譜對(duì)于鑒定凝膠電泳所分離的蛋白質(zhì)提供有力的分析手段,通常途徑是采用雙向電泳的方式,分離出的斑點(diǎn)用胰蛋白酶酶解、提取,再用ESI-MS進(jìn)行測(cè)定。孫明忠等[41]采用雙向膠內(nèi)差異凝膠電泳檢測(cè)2,4-二硝基苯磺酸刺激人角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT反應(yīng)情況,選取的膠條做質(zhì)譜分析,膠條的等電點(diǎn)、分子量和質(zhì)譜分析的等電點(diǎn)、分子量基本吻合,進(jìn)而繼續(xù)對(duì)肽段進(jìn)行研究。曾嶸等[42]結(jié)合雙向電泳,測(cè)定膠內(nèi)人肝癌細(xì)胞的蛋白組學(xué),覆蓋率達(dá)到72.5%,通過(guò)正常的肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞進(jìn)行比對(duì)。牟芝蓉等檢測(cè)維甲酸誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化有關(guān)蛋白質(zhì),用毛細(xì)管液相色譜和納升電噴霧源串聯(lián)的質(zhì)譜。所有測(cè)定均在正離子方式下進(jìn)行,經(jīng)檢測(cè)質(zhì)量準(zhǔn)確度小于0.1。何曉光[43]采用電噴霧質(zhì)譜,正離子噴霧模式,篩選鑒定卵巢癌細(xì)胞乳源調(diào)節(jié)肽,為腫瘤等一系列因素提供治療手段和依據(jù)。郭曄等[44]也用凝膠電泳和電噴霧質(zhì)譜的方法對(duì)兒童急性淋巴細(xì)胞白血病的差異細(xì)胞蛋白進(jìn)行分析測(cè)定。而對(duì)于N端封閉,測(cè)序儀不能很好地測(cè)序蛋白,電噴霧質(zhì)譜可以結(jié)合軟件更好地完成測(cè)序工作?,F(xiàn)在更多采用免疫共沉淀方法(CO-IP)結(jié)合ESI-MS查看蛋白質(zhì)之間的相互作用。電噴霧質(zhì)譜允許在混合蛋白中蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)之間的反應(yīng),如乳清蛋白[45],用電噴霧質(zhì)譜結(jié)合有關(guān)生化技術(shù)可以進(jìn)行氨基酸序列分析、蛋白質(zhì)翻譯后修飾的結(jié)構(gòu)推斷等。孫偉等[46]對(duì)牛血清蛋白和馬細(xì)胞色素C進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn),采用5%~30%的乙腈洗脫梯度,使得胰酶酶切多肽更好地鑒定出來(lái);進(jìn)行重復(fù)性實(shí)驗(yàn)時(shí),主要洗脫峰的保留時(shí)間差別不超過(guò)1min,表明重復(fù)性良好;并研究豐度抑制與高豐度蛋白分子量之間的關(guān)系,驗(yàn)證高豐度蛋白導(dǎo)致豐度抑制多,結(jié)合質(zhì)譜數(shù)據(jù)依賴(lài)的鑒定技術(shù),導(dǎo)致高豐度的蛋白重復(fù),低豐度可能檢測(cè)不到,檢測(cè)結(jié)果冗余蛋白較多。
在應(yīng)用質(zhì)譜做蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)、鑒定肽實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,離子帶電荷數(shù)受實(shí)驗(yàn)條件影響,比如說(shuō),儀器所使用的電壓,還有溶液的濃度和流速等等。明顯的是,ESI過(guò)程中肽的性質(zhì)會(huì)很大程度地影響電荷數(shù),比如說(shuō)氨基酸數(shù)目和種類(lèi)還有肽的形成等,ESI中肽電荷數(shù)量可以擴(kuò)大質(zhì)譜儀的檢測(cè)極限[47]。
4 展望
醫(yī)藥生物領(lǐng)域迅速發(fā)展,電噴霧質(zhì)譜的應(yīng)用會(huì)更加發(fā)揮它相應(yīng)作用。如何保證樣品損失量少和分析速度快、分析量多是發(fā)展方向。為推斷化學(xué)合成藥物雜質(zhì)結(jié)構(gòu)提供有效依據(jù);為現(xiàn)有藥物含量測(cè)定提供標(biāo)準(zhǔn);對(duì)藥物代謝研究痕量成分提供準(zhǔn)確定量要求;對(duì)于更復(fù)雜成分的中藥提供檢測(cè)手段,解決一定的分析難點(diǎn);對(duì)基因重組蛋白及蛋白組的研究等,在這些方面,電噴霧質(zhì)譜有重要理論和實(shí)際應(yīng)用意義[48]。
目前電噴霧質(zhì)譜的應(yīng)用還存在一些問(wèn)題,譬如對(duì)于大分子樣品消耗較大,分析時(shí)間長(zhǎng),蛋白重復(fù)性不好,小分子低豐度蛋白經(jīng)常漏檢等。如何更快、更好地[49]建立高通量的藥物篩選方法、尋找以致病蛋白為靶點(diǎn)的藥物前體分子提供新的手段[50]、建立藥物毒性安全方案等等,以便更好地服務(wù)醫(yī)藥行業(yè)是今后需要提升的方面。
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[關(guān)鍵詞]民族生態(tài)學(xué);人類(lèi)學(xué);美國(guó)
[作者]付廣華,中央民族大學(xué)民族學(xué)專(zhuān)業(yè)博士生、廣西民族問(wèn)題研究中心助理研究員。北京,100081
[中圖分類(lèi)號(hào)]C95.05 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1004-454X(2011)01-0069-007
美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)指的是誕生于美國(guó)生態(tài)人類(lèi)學(xué)中的一種獨(dú)特方法,它試圖從認(rèn)知的視角探討不同的民族與其自然環(huán)境之間的相互關(guān)系。自從20世紀(jì)五六十年代以來(lái),該學(xué)科在歐美國(guó)家得到了較快發(fā)展,甚至在20世紀(jì)六七十年代成為生態(tài)人類(lèi)學(xué)中主要的學(xué)術(shù)思潮之一。至20世紀(jì)80年代初期,蘇聯(lián)學(xué)術(shù)界也以民族(ethos)為研究中心發(fā)展起另一種民族生態(tài)學(xué)研究的理論框架,我們稱(chēng)之為“蘇/俄式民族生態(tài)學(xué)”。由于中國(guó)當(dāng)時(shí)恢復(fù)了與蘇聯(lián)的密切關(guān)系,因此中國(guó)民族生態(tài)學(xué)的發(fā)展初期深受蘇聯(lián)學(xué)術(shù)框架的影響。與此同時(shí),美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)研究也開(kāi)始影響到中國(guó)的植物學(xué)界和民族學(xué)界,從而開(kāi)啟了最早的中國(guó)民族生態(tài)學(xué)研究。然而,由于同時(shí)受到美、蘇兩種學(xué)術(shù)傳統(tǒng)的影響,中國(guó)民族生態(tài)學(xué)界對(duì)兩者之間的區(qū)別與聯(lián)系一直未能澄清,這給學(xué)科的發(fā)展帶來(lái)了一定的隱憂(yōu)。有鑒于此,我們希望此文能夠增加國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)的認(rèn)識(shí),亦為促進(jìn)民族生態(tài)學(xué)在中國(guó)的發(fā)展略盡綿薄之力。
一、概念界定
作為一個(gè)新的學(xué)科領(lǐng)域,民族生態(tài)學(xué)的概念仍在不斷的修正中,這也正表明其研究魅力所在。術(shù)語(yǔ)“民族生態(tài)學(xué)”于1954年為康克林(Harold Conklin)首創(chuàng)??悼肆衷诜坡少e的哈努諾人(Hanunoo)中進(jìn)行的植物命名方法的語(yǔ)義學(xué)研究證實(shí)了民族植物分類(lèi)的等級(jí)本質(zhì),真正洞察了人類(lèi)對(duì)自然資源的認(rèn)知。不過(guò),康克林與其追隨者一樣,只是花費(fèi)很大力氣去記述植物和動(dòng)物名稱(chēng)的清單以及它們的文化使用口],未能延伸到更深層次的研究。20世紀(jì)60年代以后,人類(lèi)學(xué)家日益對(duì)理解人群自己的感受及他們對(duì)世界的解釋感興趣,因此他們對(duì)人類(lèi)活動(dòng)的動(dòng)因和后果感興趣的程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于人類(lèi)活動(dòng)對(duì)環(huán)境影響的興趣。于是以人們自己的世界概念模型為重點(diǎn),產(chǎn)生了被稱(chēng)為“認(rèn)知人類(lèi)學(xué)”的領(lǐng)域。鑒于其在方法論上的貢獻(xiàn),人類(lèi)學(xué)家們有時(shí)也稱(chēng)之為“新民族志”(New Ethnography)或“民族科學(xué)”(Ethnoscience)。剛剛誕生的民族生態(tài)學(xué)與這一領(lǐng)域不謀而合,在借鑒其方法的過(guò)程中,逐漸成為這一領(lǐng)域的一個(gè)組成部分。
在簡(jiǎn)單了解民族生態(tài)學(xué)的發(fā)展脈絡(luò)之后,我們接著來(lái)探討民族生態(tài)學(xué)的概念界定。雖然康克林沒(méi)有就“民族生態(tài)學(xué)”一詞給出明確的概念界定,但后來(lái)的生態(tài)人類(lèi)學(xué)者多次試圖去框定“民族生態(tài)學(xué)”。下面我們就較有代表性的四種界定予以分析,然后結(jié)合來(lái)自其他學(xué)科學(xué)者的意見(jiàn),力爭(zhēng)對(duì)民族生態(tài)學(xué)的概念界定有比較清晰的認(rèn)識(shí)。
美國(guó)人類(lèi)學(xué)家福勒(Catherine Fowler)是較早地試圖從理論上總結(jié)民族生態(tài)學(xué)發(fā)展歷程的學(xué)者。早在1977年,她在為《生態(tài)人類(lèi)學(xué)》寫(xiě)作的“民族生態(tài)學(xué)”專(zhuān)章中敘述了民族生態(tài)學(xué)的歷史、概念、方法論、招致的批評(píng)以及其他方面的民族生態(tài)學(xué)研究。正是在這一專(zhuān)章中,福勒把民族生態(tài)學(xué)描述為:一種關(guān)注本土人環(huán)境概念的獨(dú)特的人類(lèi)生態(tài)學(xué)進(jìn)路,它主要采納民族科學(xué)的方法,嘗試證實(shí)對(duì)應(yīng)環(huán)境的本土術(shù)語(yǔ)系統(tǒng)與那些概念化之間的條理關(guān)系。從福勒的上述界定可以看出,民族生態(tài)學(xué)在當(dāng)時(shí)僅僅是人類(lèi)學(xué)的人類(lèi)生態(tài)學(xué)的一個(gè)分支。對(duì)福勒來(lái)說(shuō),其關(guān)鍵在于要從被研究群體的自觀點(diǎn)(own point of view)去看問(wèn)題,這樣民族生態(tài)學(xué)就變成了一個(gè)群體從其自觀出發(fā)的生物相互聯(lián)系的觀念。福勒還指出,雖然民族生態(tài)學(xué)因缺乏關(guān)注其方法的行為含義而招致了許多批評(píng),但它卻始終堅(jiān)持自身能夠更完全和完整地描述土著人與其環(huán)境之間的相互關(guān)系。
在福勒之后,布羅修斯(J.Peter Brosius)等人對(duì)民族生態(tài)學(xué)有一個(gè)更為清晰的界定。他們認(rèn)為民族生態(tài)學(xué)(ethnoeeology)是民族科學(xué)的一個(gè)亞學(xué)科,它研究的是傳統(tǒng)群體如何組織和分類(lèi)他們的環(huán)境知識(shí)和環(huán)境過(guò)程(pp.187-188)。布羅修斯等人在文章中認(rèn)為,民族生態(tài)學(xué)的一個(gè)重要方面就是描述和呈現(xiàn)文化內(nèi)觀的知識(shí),而不能止步不前。就像弗雷克(Charles O.Frake)所言,“民族志學(xué)者不能僅僅滿(mǎn)足于西方科學(xué)式的文化生態(tài)系統(tǒng)元素的分類(lèi)。他必須像他們自己所理解的那樣按照被研究者民族科學(xué)的種類(lèi)去描述其環(huán)境”。由于該文著眼于如何運(yùn)用民族生態(tài)學(xué)去探討傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)知識(shí),而不是重在民族生態(tài)學(xué)理論上的探討,因此這篇文章的最大貢獻(xiàn)也許在于指出了本土知識(shí)系統(tǒng)中分享的民間智慧和個(gè)體經(jīng)驗(yàn)組合的動(dòng)態(tài)性和復(fù)雜性本質(zhì)。當(dāng)然,布羅修斯等人在文章中亦指出,在以后的民族生態(tài)學(xué)研究中,要把研究的注意點(diǎn)從名詞轉(zhuǎn)向動(dòng)詞。因?yàn)閯?dòng)詞本身暗示著過(guò)程和其語(yǔ)言認(rèn)知,它對(duì)人類(lèi)適應(yīng)的概念化也十分重要。
當(dāng)代英國(guó)生態(tài)人類(lèi)學(xué)家米爾頓(Kay Miltort)認(rèn)為,“ethnoecology”一詞中“ethno”這個(gè)前綴的意思同“folk”差不多,指的是從被研究者的角度(主位的)界定的而不是從分析者的角度(客位的)界定的知識(shí)領(lǐng)域。這樣,關(guān)于某一社會(huì)的被研究者對(duì)植物界的民族分類(lèi),便成為“民族植物學(xué)”,進(jìn)而類(lèi)推出“民族動(dòng)物學(xué)”、“民族醫(yī)學(xué)”以及“民族生物學(xué)”等。從這個(gè)意義上講,“民族生態(tài)學(xué)”區(qū)別于所謂科學(xué)“生態(tài)學(xué)”,它研究的是特定文化傳統(tǒng)的環(huán)境知識(shí),而這些知識(shí)只在那個(gè)特定的文化語(yǔ)境中才是有效的。因此民族生態(tài)學(xué)有助于理解傳統(tǒng)群體與其所處環(huán)境的互動(dòng)過(guò)程,從而地方生態(tài)治理提供本土經(jīng)驗(yàn)和智慧。
不難看出,上述概念界定基本上都限制在“民族科學(xué)”的語(yǔ)境內(nèi),因此我們今天看來(lái)可能會(huì)覺(jué)得上述界定似乎跟人類(lèi)學(xué)界最新的理論發(fā)展沒(méi)有什么聯(lián)系。其實(shí),面對(duì)人類(lèi)學(xué)的后現(xiàn)代時(shí)代,民族生態(tài)學(xué)家們多多少少總會(huì)有所觸動(dòng)的。如美國(guó)民族生態(tài)學(xué)家納扎雷(Virginia D.Nazarea)在1999年出版的《民族生態(tài)學(xué)》一書(shū)中就指出:民族生態(tài)學(xué)是一種看待人類(lèi)與自然世界關(guān)系的方式,只不過(guò)強(qiáng)調(diào)認(rèn)知在框定行為中所起的作用罷了。她認(rèn)為,作為對(duì)自然環(huán)境的解釋、認(rèn)知和使用的系統(tǒng)的考察,民族生態(tài)學(xué)不再忽視文化的代表的與直接的方面的歷史與政治基礎(chǔ),也不再把塑造知識(shí)系統(tǒng)和最終實(shí)踐的分布、獲取和權(quán)力問(wèn)題拒之門(mén)外。民族生態(tài)學(xué)應(yīng)該最大化利用其比較優(yōu)勢(shì),結(jié)合事無(wú)巨細(xì)的田野工作,充分意識(shí)到歷史、權(quán)力和風(fēng)險(xiǎn)在塑造環(huán)境解釋、管理和妥協(xié)的重要性。這樣一來(lái),民族生態(tài)學(xué)就會(huì)在跨學(xué)科研究中做出重大貢獻(xiàn),甚至成為保護(hù)、可持續(xù)性和平等研究領(lǐng)域的倡行者。從納扎雷的上述論述中,我們亦可約略看出,民族生態(tài)學(xué)也在與時(shí)俱進(jìn)中,它不僅堅(jiān)持其原有的方法論利器,而且還勇于吸收布迪厄等人的知識(shí)、權(quán)力、風(fēng)險(xiǎn)的新思想,從而為民
族生態(tài)學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展指明了前進(jìn)的方向。
與上述人類(lèi)學(xué)家不同,植物學(xué)、生物學(xué)、生態(tài)學(xué)等其他學(xué)科學(xué)者的界定卻有著一定的差別。民族植物學(xué)家馬丁(Martin)認(rèn)為,民族生態(tài)學(xué)包括所有的描述地方性群體與其自然環(huán)境相互關(guān)系的研究,因此它包含了民族生物學(xué)、民族植物學(xué)、民族醫(yī)藥學(xué)以及民族動(dòng)物學(xué)等諸多亞學(xué)科。無(wú)獨(dú)有偶,墨西哥生態(tài)學(xué)家托萊多(Victor M.Toledo)也傾向于擴(kuò)大民族生態(tài)學(xué)的研究范疇,他認(rèn)為民族生態(tài)學(xué)可以被界定為一種跨學(xué)科的研究進(jìn)路,它旨在探索人類(lèi)群體如何通過(guò)信仰和知識(shí)的屏幕來(lái)看待自然,以及人類(lèi)自身形象上如何使用或管理自然資源。無(wú)論怎么表述,人類(lèi)學(xué)以外的學(xué)者也都想把“民族生態(tài)學(xué)”這一理論工具延為己用,希望通過(guò)這種跨學(xué)科的探討來(lái)充實(shí)自己的專(zhuān)題研究。
我們認(rèn)為,民族生態(tài)學(xué)是民族科學(xué)的一個(gè)亞領(lǐng)域,它研究的是特定文化傳統(tǒng)的人們所擁有的生態(tài)知識(shí)。這種研究最初僅僅在生態(tài)人類(lèi)學(xué)界流行,更像是一種觀察人與環(huán)境關(guān)系的視野或方法。只有在發(fā)展到一定階段以后,特別是民族植物學(xué)、民族動(dòng)物學(xué)、民族醫(yī)藥學(xué)等亞學(xué)科促生后,民族生態(tài)學(xué)才向一門(mén)總括式學(xué)科的方向發(fā)展。值得注意的是,與上述“美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)”截然不同的是?!疤K/俄式民族生態(tài)學(xué)”則大致在研究范疇上等同于生態(tài)人類(lèi)學(xué),“學(xué)科的主要任務(wù)是研究族群或族共同體在所居住地區(qū)的自然條件和社會(huì)文化條件下謀取生存的傳統(tǒng)方式和特點(diǎn),當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)對(duì)人體產(chǎn)生的影響,族群或族共同體同大自然作斗爭(zhēng)的特點(diǎn)及對(duì)自然界的影響,它們合理利用自然資源的傳統(tǒng),民族生態(tài)系統(tǒng)形成和發(fā)揮職能作用的規(guī)律等等。”由于中國(guó)民族學(xué)界也曾深受蘇聯(lián)的影響,因此中國(guó)的民族生態(tài)學(xué)一開(kāi)始就是民族問(wèn)題研究的一個(gè)重要組成部分,指的是以民族為中心的生態(tài)學(xué)方面的研究。它與生態(tài)民族學(xué)(人類(lèi)學(xué))研究對(duì)象大致相同,并且其理論方法有進(jìn)一步融合的趨勢(shì)。在當(dāng)代中國(guó)的學(xué)科分類(lèi)范疇中,“民族生態(tài)學(xué)”成為民族學(xué)下面自主設(shè)置的二級(jí)學(xué)科,其培養(yǎng)模式與各分支民族學(xué)人類(lèi)學(xué)學(xué)科相似。據(jù)我們所知,目前國(guó)內(nèi)名為“民族生態(tài)學(xué)”的博士點(diǎn)有兩處:一是托庇于云南大學(xué)民族學(xué)研究院,走的是民族學(xué)人類(lèi)學(xué)的培養(yǎng)路線,大致等同于生態(tài)人類(lèi)學(xué)或生態(tài)民族學(xué);另一個(gè)誕生于中央民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,走的是生態(tài)學(xué)的培養(yǎng)路線,實(shí)質(zhì)上是“民族地區(qū)的生態(tài)學(xué)研究”。
二、理論預(yù)設(shè)
凡是熟悉民族生態(tài)學(xué)發(fā)展歷程的人們都知道,民族生態(tài)學(xué)與認(rèn)知人類(lèi)學(xué)有著密切的關(guān)系,甚至可以說(shuō)是其一分支學(xué)科。按照丹德拉德(Roy D'Andrade)的界定,認(rèn)知人類(lèi)學(xué)是關(guān)于人類(lèi)社會(huì)與人類(lèi)思想關(guān)系的研究。認(rèn)知人類(lèi)學(xué)家研究的是人們?cè)谏缛褐腥绾螛?gòu)想和思考那些組成他們的世界的物和事(p.1)。由于認(rèn)知人類(lèi)學(xué)非常關(guān)注分類(lèi)、認(rèn)知以及文化的內(nèi)涵,這使民族生態(tài)學(xué)也深受其影響,從而使得學(xué)科發(fā)展中始終存在著兩個(gè)基本的理論預(yù)設(shè):
1、人類(lèi)與環(huán)境的互動(dòng)很大程度上要受到其認(rèn)知狀況(思想、知識(shí)和語(yǔ)言)的影響;
長(zhǎng)期以來(lái),由于受到薩丕爾一沃爾夫假說(shuō)的影響,不少人類(lèi)學(xué)家認(rèn)為語(yǔ)言是一個(gè)用來(lái)組織經(jīng)驗(yàn)的概念體系,它不僅迫使人們接受一定的世界觀,而且決定了人們的思維模式,從而決定了人們的行為準(zhǔn)則。因此,使用不同語(yǔ)言的人具有不同的概念體系,因此也就具有不同的世界觀、思維模式、行為規(guī)范和文化。到20世紀(jì)50年代后期,人類(lèi)學(xué)家借鑒了語(yǔ)言學(xué)家派克的觀點(diǎn),提出要以文化持有者的內(nèi)部眼光去了解和記錄文化,要把文化主位(emie,即文化負(fù)荷者的觀點(diǎn))和文化客位(erie,即文化研究者的看法)區(qū)分開(kāi)來(lái)。上述兩種語(yǔ)言學(xué)思想是影響認(rèn)知人類(lèi)學(xué)發(fā)展歷程的重要思潮之一。
作為認(rèn)知人類(lèi)學(xué)的分支領(lǐng)域,民族生態(tài)學(xué)顯然也深受薩丕爾一沃爾夫假說(shuō)和派克語(yǔ)言學(xué)觀點(diǎn)的影響,甚至在學(xué)科內(nèi)部形成了對(duì)應(yīng)的理論預(yù)設(shè)。民族生態(tài)學(xué)家們認(rèn)為,人類(lèi)是一個(gè)特殊的物種,他不像其他物種那樣,他具有思維、知識(shí)和語(yǔ)言,因此這些文化元素必然會(huì)對(duì)其與自然環(huán)境互動(dòng)的行為施加影響。人們不會(huì)直接地對(duì)環(huán)境起反應(yīng),而只能對(duì)那些他們意識(shí)到的且語(yǔ)言中已標(biāo)示的動(dòng)植物做出反應(yīng)。在面對(duì)環(huán)境刺激時(shí),人們會(huì)在已有世界觀的圖式下調(diào)動(dòng)其已有的知識(shí)體系,從而做出適應(yīng)性的行為。對(duì)此,瓦伊達(dá)(Andrew P.Vayda)和拉帕波特(Roy A.Rappaport)曾經(jīng)在“操作的”環(huán)境和“認(rèn)知的”環(huán)境之間做出了著名的區(qū)分。所謂“操作的”環(huán)境,即所有環(huán)境因素的綜合,不管這些因素是否得到理解;而“認(rèn)知的”環(huán)境則指的是一個(gè)特殊群體的人們所意識(shí)到和理解的環(huán)境。在某種意義上講,“操作的環(huán)境”和“認(rèn)知的環(huán)境”之間的區(qū)分更像是對(duì)來(lái)自派克的主位和客位方法的一種模仿。
為了洞察土著人的思想、知識(shí)和語(yǔ)言對(duì)外部環(huán)境世界的影響,民族生態(tài)學(xué)家經(jīng)常從語(yǔ)義和分類(lèi)的角度考察土著人的生物分類(lèi)體系。他們不厭其煩地收集植物、動(dòng)物、昆蟲(chóng)、土壤、疾病等方面的土著術(shù)語(yǔ)資料,然后按照生物分類(lèi)學(xué)的發(fā)展或按照一般化水平對(duì)術(shù)語(yǔ)進(jìn)行等級(jí)上的安排。通過(guò)揭示土著生物分類(lèi)背后的組織原則,民族生態(tài)學(xué)家們聲稱(chēng)克服外來(lái)者強(qiáng)加于土著人既有結(jié)構(gòu)的傾向是可能的。但是,大部分的研究?jī)H僅停留在“成分分析”上,很少能夠進(jìn)一步去思考。事實(shí)上,結(jié)構(gòu)化了的動(dòng)植物分類(lèi)不僅反映了其環(huán)境世界觀,而且這種世界觀影響到分類(lèi)結(jié)構(gòu)本身乃至人類(lèi)行為。這也招致了許多批評(píng),因此不少研究成果被批評(píng)者們稱(chēng)為“民族語(yǔ)義學(xué)”或者“民族分類(lèi)學(xué)”,而不能夠升華到“民族生態(tài)學(xué)”的范疇中去。
2、由于社會(huì)的、歷史的、文化的和環(huán)境的因素差異,不同群體的人們對(duì)其所處的外部世界的解釋會(huì)有所不同。
當(dāng)今世界生活著各式各樣不同的群體。他們采取狩獵一采集、園圃農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)、精耕農(nóng)業(yè)以及工業(yè)化農(nóng)業(yè)等不同的生計(jì)方式。由于生計(jì)方式的差別,他們形成了與之相適應(yīng)的環(huán)境觀。不同民族的環(huán)境觀會(huì)因?yàn)樯鐣?huì)、歷史、文化的原因而有所差異,同時(shí)自然環(huán)境因素也在一定程度上影響不同民族對(duì)他們所處的外部環(huán)境的認(rèn)知。當(dāng)然,這也并不是說(shuō),每個(gè)文化或社會(huì)看待外部的環(huán)境會(huì)一定有著完全截然不同的看法。人類(lèi)學(xué)的田野研究一再表明,不同群體的人們?cè)谙嗨频淖匀坏乩項(xiàng)l件下,可能會(huì)發(fā)展出相似的文化特質(zhì),從而在文化面貌上具備一定的相似性。
米爾頓的地球變暖案例很好地說(shuō)明了這一問(wèn)題:來(lái)自西方世界的科學(xué)家們說(shuō)世界正在逐漸變暖,人類(lèi)的活動(dòng),特別是那些向大氣釋放某些氣體的活動(dòng)是造成地球變暖的原因。雖然大家同處于一個(gè)地球,但是,來(lái)自其他文化的人們可能否認(rèn)地球變暖在發(fā)生。或者,如果他們承認(rèn)有變暖現(xiàn)象,他們可能歸因于神靈的行動(dòng)或神圣造物主。或者承認(rèn)人類(lèi)要負(fù)一部分責(zé)任,他們認(rèn)為地球變暖是某個(gè)更高主宰施加的懲罰,因?yàn)樗麄兊纳鐣?huì)未能尊奉古老的傳統(tǒng)。之所以對(duì)地球變暖這一外部事件的解釋會(huì)有如此不同,不僅因?yàn)樗麄兂ι畹淖匀簧鷳B(tài)環(huán)境有著較大的區(qū)別,而且因?yàn)樗麄兣c自然相處的不同方式的差異直接影響到他們所處的社會(huì)文化。雖然我們并不能否認(rèn)其中存在的文化建構(gòu)的因素存在,但是這些差異巨大的解釋肯定是跟其社會(huì)文化和自然生態(tài)差異有著千絲萬(wàn)縷的聯(lián)系的。
這一理論預(yù)設(shè)與民族生態(tài)學(xué)的發(fā)展息息相關(guān)。由于不同群體的人們對(duì)其外部世界的解釋(認(rèn)知)會(huì)有所不同,當(dāng)然所有的解釋可能都不乏合理的元素,但只有本土人才會(huì)對(duì)畢生相處的環(huán)境做出最為合理的判斷,才會(huì)有最為準(zhǔn)確的解釋。這樣的理論預(yù)設(shè)促進(jìn)了民族生態(tài)學(xué)的傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)研究的拓展。著名民族生態(tài)學(xué)家波西(Darrell A.Posey)等人更是認(rèn)為本土生態(tài)知識(shí)(indigenous ecological knowledge)的研究亦即民族生態(tài)學(xué)。因此在某種程度上,我們可以說(shuō),傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)研究是民族生態(tài)學(xué)區(qū)別于生態(tài)學(xué)、環(huán)境科學(xué)及其他研究人與環(huán)境關(guān)系的學(xué)科的最重要的特征之一。
如果把兩個(gè)理論預(yù)設(shè)結(jié)合起來(lái)來(lái)看,我們會(huì)發(fā)現(xiàn)它們實(shí)際上講的都是人類(lèi)行為和認(rèn)知之間的關(guān)系。第―個(gè)預(yù)設(shè)說(shuō)的是人類(lèi)在自然環(huán)境中的行為會(huì)受到其認(rèn)知狀況的影響:如果某個(gè)群體的人們對(duì)某一類(lèi)型的自然環(huán)境認(rèn)知水平較高,那么他們就會(huì)在這種環(huán)境中運(yùn)用自如,如魚(yú)得水;反之亦然。第二個(gè)預(yù)設(shè)則講的是人類(lèi)所處的自然環(huán)境和他們延續(xù)下來(lái)的社會(huì)文化傳統(tǒng)會(huì)影響到其對(duì)外部世界的解釋(認(rèn)知)。如長(zhǎng)期生活在中國(guó)華北平原的人們,來(lái)到青藏高原以后,基本上都會(huì)不適應(yīng),因?yàn)樗麄冊(cè)瓉?lái)生活于海拔較低的地方,對(duì)應(yīng)的社會(huì)文化傳統(tǒng)難以應(yīng)付這樣的情形,因此會(huì)對(duì)這種類(lèi)型的自然環(huán)境持否定態(tài)度;而原來(lái)居住在高山地區(qū)的人們則不同,他們擁有相應(yīng)的文化適應(yīng)策略,長(zhǎng)期以來(lái)也形成了應(yīng)對(duì)的身體素質(zhì),因此對(duì)青藏高原的抵觸性情緒就不會(huì)那么強(qiáng),其解釋也就自然有所差異。
三、學(xué)科特征
作為生態(tài)人類(lèi)學(xué)發(fā)展中的獨(dú)特成果之一,民族生態(tài)學(xué)在歐美學(xué)術(shù)界理所當(dāng)然地被視為人類(lèi)學(xué)的。由于民族生態(tài)學(xué)十分關(guān)注“他者”,尤其那些仍實(shí)踐著傳統(tǒng)資源利用和管理方式的土著群體,因此它具備一些不同于所謂的科學(xué)“生態(tài)學(xué)”的學(xué)科特征。具體來(lái)說(shuō),我們認(rèn)為美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)具有以下學(xué)科特征:
1、本土人立場(chǎng)
本土人立場(chǎng),亦被稱(chēng)為“主位”立場(chǎng),是從被研究者本身出發(fā)看問(wèn)題的一種方法。它的出現(xiàn)與文化相對(duì)論關(guān)系密切。在民族學(xué)人類(lèi)學(xué)研究中,文化相對(duì)論是必須秉持的觀念之一。在這一理念的指導(dǎo)下,人類(lèi)學(xué)者常常把自己置于被研究者的立場(chǎng),從被研究者的時(shí)空?qǐng)鼍爸锌紤]自己研究的課題,然后再跳出來(lái),結(jié)合客位的立場(chǎng),對(duì)文化現(xiàn)象做出正確的解釋。作為生態(tài)人類(lèi)學(xué)中的一種獨(dú)特方法,民族生態(tài)學(xué)必然也要堅(jiān)持文化相對(duì)論,堅(jiān)持本土人的立場(chǎng)。從學(xué)科名稱(chēng)來(lái)看,民族生態(tài)學(xué)(ethnoecology)是一個(gè)復(fù)合詞,它由ethno加ecology構(gòu)成,這本身就說(shuō)明了它的屬性,即ethno的生態(tài)學(xué)。ethno在英語(yǔ)中是“民族的”意思。如前所述,它與“folk!”的意思差不多。以此而言,民族生態(tài)學(xué)就是從本土人立場(chǎng)出發(fā)的生態(tài)學(xué),其中的“本土人立場(chǎng)”是民族生態(tài)學(xué)區(qū)別于生態(tài)學(xué)的根本標(biāo)志。如果在研究中未能采納本土人立場(chǎng),而僅僅對(duì)土著人的植物、動(dòng)物、醫(yī)藥進(jìn)行研究,充其量只是“土著人的生態(tài)學(xué)研究”,而不能稱(chēng)之為“民族生態(tài)學(xué)”。當(dāng)然,如果從“蘇/俄式民族生態(tài)學(xué)”的眼光來(lái)看,仍然可以稱(chēng)之為“民族生態(tài)學(xué)”的。
2、民族志方法
在長(zhǎng)期的學(xué)科發(fā)展歷程中,人類(lèi)學(xué)中的觀察、參與觀察、結(jié)構(gòu)性訪談、半結(jié)構(gòu)訪談、無(wú)結(jié)構(gòu)訪談、譜系法等等都民族志方法都得到了極大發(fā)展。民族生態(tài)學(xué)作為一種生態(tài)人類(lèi)學(xué)方法,因此不可避免地受到人類(lèi)學(xué)的影響,吸收了民族志方法作為學(xué)科的方法論支柱。從20世紀(jì)50年代學(xué)科誕生之初,到如今蓬勃發(fā)展,民族生態(tài)學(xué)始終堅(jiān)持民族志方法。事實(shí)上,迄今為止,最為杰出的民族生態(tài)學(xué)研究都是由人類(lèi)學(xué)家來(lái)完成的。民族生態(tài)學(xué)的創(chuàng)始人康克林對(duì)菲律賓哈努努人顏色分類(lèi)和刀耕火種的研究至今仍然是人類(lèi)學(xué)中的經(jīng)典。為了進(jìn)行博士論文的研究,康克林從1952年至1954年初一直在菲律賓的哈努努人中進(jìn)行田野工作。后來(lái),他的研究興趣轉(zhuǎn)移到菲律賓呂宋島北部的伊富高人身上去,并為此6次到田野點(diǎn)進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)數(shù)年的實(shí)地調(diào)查。正如民族生態(tài)學(xué)家諾蘭(Justin M.Nolan)所言,民族志方法是民族生態(tài)學(xué)的附贈(zèng)方法,民族生態(tài)學(xué)家通過(guò)使用參與觀察和其他的定性資料收集技術(shù),可以觀察到相關(guān)生態(tài)可能性背景下的不同決策促生的行為模式。這一方法對(duì)決定和估測(cè)人類(lèi)行為的影響是不可限量的。民族志方法是民族生態(tài)學(xué)區(qū)別于所謂的科學(xué)“生態(tài)學(xué)”的重要方法論,因此,民族生態(tài)學(xué)一定要堅(jiān)持田野調(diào)查、堅(jiān)持參與觀察,否則就難以實(shí)現(xiàn)其研究目標(biāo)。
3、認(rèn)知的視角
作為認(rèn)知人類(lèi)學(xué)的一個(gè)分析領(lǐng)域,民族生態(tài)學(xué)始終堅(jiān)持認(rèn)知的視角,而且長(zhǎng)于從認(rèn)知的角度來(lái)分析一個(gè)族群與其周?chē)匀簧鷳B(tài)環(huán)境的復(fù)雜互動(dòng)關(guān)系。隨著認(rèn)知人類(lèi)學(xué)的發(fā)展,對(duì)人群概念世界描述本身成了目的,這樣正規(guī)的采集資料技術(shù)就推廣到民族生態(tài)學(xué)中。比如,一位對(duì)收集人們?cè)鯓訉?duì)他們的自然環(huán)境分類(lèi)感興趣的生態(tài)人類(lèi)學(xué)者,他會(huì)設(shè)計(jì)出幾個(gè)層次的問(wèn)題,從包含事物較廣泛的范疇到較小的范疇。剛開(kāi)始時(shí),他可以問(wèn)世界上存在著什么事物,然后再依次問(wèn)有什么植物,有什么樹(shù)木,有什么藥用樹(shù),如此逐步縮小范圍之最低層次為止。分析者通過(guò)向許多提供情況的人按照同樣的順序提出同樣的問(wèn)題,就能得到當(dāng)?shù)鼐用駥?duì)他們自己所處環(huán)境的共同認(rèn)識(shí)的總圖。這種方法雖然有效,但人類(lèi)學(xué)者逐漸認(rèn)識(shí)到使用這種方法存在很大問(wèn)題。因?yàn)榭赡茉诋?dāng)?shù)厝说奈幕Z(yǔ)境中并不存在這樣的分類(lèi),或者根本沒(méi)有分類(lèi),被調(diào)查者就會(huì)強(qiáng)行按照自己的邏輯設(shè)計(jì)出一種分類(lèi)方法來(lái)。這樣一來(lái),民族生態(tài)學(xué)家不得不恢復(fù)使用傳統(tǒng)的參與觀察法。由此可知,民族生態(tài)學(xué)始終堅(jiān)持認(rèn)知的視角,力爭(zhēng)從“他者”自身的文化傳統(tǒng)去分析其對(duì)外部環(huán)境的認(rèn)知,從而為民族生態(tài)學(xué)的存續(xù)提供跨學(xué)科的動(dòng)力。因此,不少認(rèn)知語(yǔ)言學(xué)家、植物學(xué)家參與到民族生態(tài)學(xué)研究中來(lái),運(yùn)用其語(yǔ)言分析工具和植物學(xué)知識(shí),從而更為準(zhǔn)確地揭示出“他者”的民族生態(tài)學(xué)特征。
4、關(guān)注傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)
民族生態(tài)學(xué)自誕生之初,就把傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)(traditional ecological knowledge)作為重要的研究對(duì)象。除“傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)”外,生態(tài)人類(lèi)學(xué)界內(nèi)部還有本土生態(tài)知識(shí)、農(nóng)村人的知識(shí)、本土技術(shù)知識(shí)、傳統(tǒng)環(huán)境知識(shí)、地方性生態(tài)知識(shí)以及本土農(nóng)業(yè)知識(shí)等類(lèi)似的術(shù)語(yǔ)。這方面的代表作有英格利斯(J.T.Inglis)編輯的《傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí):概念與案例》、貝爾克斯(Fikret Berkes)的《神圣的生態(tài)學(xué):傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)與資源管理》等。當(dāng)然,也有一些學(xué)者稱(chēng)之為“本土環(huán)境知識(shí)”,如埃倫(Roy Ellen)等3位學(xué)者編撰的《本土環(huán)境知識(shí)及其轉(zhuǎn)型》一書(shū)就是如此。通過(guò)對(duì)傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)的挖掘和深描,民族生態(tài)學(xué)家可以得知當(dāng)?shù)厝嗽鯓永斫馑麄兊沫h(huán)境和人與環(huán)境相互作用的認(rèn)識(shí),能夠糾正和補(bǔ)充某些膚淺的人類(lèi)生態(tài)學(xué)的研究。事實(shí)上,傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn),一些個(gè)人在各樣植物、動(dòng)物以及其他自然資源上要比其他人知道得多,而這是文化內(nèi)部因素(如年齡、性別、地位、興趣、教育以及經(jīng)驗(yàn))導(dǎo)致的結(jié)果。例如,在女性操控耕作和谷物食品管理的社會(huì),女性很可能要擁有耕作方面的更精細(xì)的知識(shí)。相反,在男性參與的地方生計(jì)的狩獵者中,男性通常
操控和交流著野生動(dòng)物方面的信息。民族生態(tài)學(xué)家已經(jīng)從這些發(fā)現(xiàn)中獲益,可以從中確認(rèn)哪些個(gè)體在具體資源上是最具備與地方生境的物種差異。這對(duì)解決環(huán)境問(wèn)題和促進(jìn)生物多樣性保護(hù)都具有相當(dāng)大的理論指導(dǎo)意義。
5、跨學(xué)科色彩濃厚
如馬丁和托萊多所述,民族生態(tài)學(xué)如今已經(jīng)成為一個(gè)龐大的跨學(xué)科領(lǐng)域,它包含著民族植物學(xué)、民族動(dòng)物學(xué)、民族生物學(xué)、民族醫(yī)藥學(xué)等多個(gè)亞領(lǐng)域。為了學(xué)科的發(fā)展,民族生態(tài)學(xué)持續(xù)地從生態(tài)學(xué)、人類(lèi)學(xué)、生物學(xué)、語(yǔ)言學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)以及其他學(xué)科吸取營(yíng)養(yǎng)。事實(shí)上,前輩民族生態(tài)學(xué)家已經(jīng)在跨學(xué)科上給我們做出了示范:美國(guó)學(xué)者伯林(Brent Berlin)早就認(rèn)識(shí)到自己學(xué)科專(zhuān)業(yè)的局限性,因此他長(zhǎng)期與兩位生物學(xué)家合作組成了跨學(xué)科團(tuán)隊(duì),最終在民族生態(tài)學(xué)研究上取得了學(xué)術(shù)界公認(rèn)的成就。民族植物學(xué)家馬丁也提倡這種跨學(xué)科團(tuán)隊(duì)的合作,生物學(xué)家收集和辨認(rèn)植物物種,語(yǔ)言學(xué)家研究地方命名,人類(lèi)學(xué)家記錄生態(tài)知識(shí),醫(yī)藥學(xué)家分析植物的醫(yī)藥價(jià)值,動(dòng)物學(xué)家觀測(cè)動(dòng)物種群,資源經(jīng)濟(jì)學(xué)家證實(shí)森林產(chǎn)品的價(jià)值。不過(guò),他認(rèn)為,民族生態(tài)學(xué)家為了獲得對(duì)傳統(tǒng)生態(tài)知識(shí)的全面認(rèn)識(shí),一定會(huì)經(jīng)常孤獨(dú)地工作,因此必然要時(shí)??缭奖姸鄬W(xué)科的邊界??梢灶A(yù)見(jiàn)的是。在不久的將來(lái),由不同學(xué)科的學(xué)者組成的民族生態(tài)學(xué)研究團(tuán)隊(duì)將會(huì)越來(lái)越多。
結(jié)語(yǔ)
在前文中,我們討論了美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)的概念界定、理論預(yù)設(shè)和學(xué)科特征。從中我們可以發(fā)現(xiàn),美國(guó)式民族生態(tài)學(xué)更像是一種觀察視角或一種研究策略。在民族生態(tài)學(xué)內(nèi)部分化出民族植物學(xué)、民族動(dòng)物學(xué)、民族醫(yī)藥學(xué)等更為專(zhuān)門(mén)化的領(lǐng)域后,民族生態(tài)學(xué)一躍成為一門(mén)統(tǒng)領(lǐng)性的學(xué)科,與所謂的西方科學(xué)的“生態(tài)學(xué)”遙相呼應(yīng)。
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