談醫(yī)學(xué)院校流式細(xì)胞儀使用現(xiàn)狀

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摘要：目前，流式細(xì)胞儀在醫(yī)學(xué)相關(guān)教學(xué)及科研中廣泛應(yīng)用，以某醫(yī)學(xué)院校科研平臺(tái)流式細(xì)胞儀為分析對(duì)象，對(duì)其近3年來學(xué)生使用人次和測(cè)試樣品數(shù)加以統(tǒng)計(jì)，分析其使用現(xiàn)狀。

關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞儀；科研平臺(tái)；使用現(xiàn)狀

流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）是一門綜合了激光技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、半導(dǎo)體技術(shù)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)等多種學(xué)科知識(shí)的自動(dòng)分析技術(shù)[1]，即利用流式細(xì)胞儀結(jié)合定量熒光細(xì)胞化學(xué)方法、單克隆抗體和免疫熒光染色原理和技術(shù)，對(duì)處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的生物顆粒，比如各種細(xì)胞、微生物及人工合成微球等的多種參數(shù)（包括細(xì)胞大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA和RNA含量、細(xì)胞表面或胞內(nèi)蛋白質(zhì)分子的表達(dá)等）進(jìn)行測(cè)量和分析，是當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定性、定量分析以及細(xì)胞分選技術(shù)。近年來，隨著流式細(xì)胞術(shù)的不斷發(fā)展和完善，其應(yīng)用領(lǐng)域已經(jīng)從最初的細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)研究擴(kuò)大到現(xiàn)如今的腫瘤學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)、藥物學(xué)、臨床檢驗(yàn)等各個(gè)方面[1]。本研究以某醫(yī)學(xué)院?？蒲衅脚_(tái)流式細(xì)胞儀為分析對(duì)象，對(duì)其近3年來學(xué)生（包括本科生和研究生）使用人次和測(cè)試樣品數(shù)加以統(tǒng)計(jì)，分析其使用現(xiàn)狀，并對(duì)現(xiàn)存問題提出建議。

1流式細(xì)胞儀使用現(xiàn)狀

學(xué)?？蒲衅脚_(tái)于2013年購(gòu)入一臺(tái)BD公司的FACSVerse型流式細(xì)胞儀，是一臺(tái)分析型流式細(xì)胞儀，藍(lán)、紅、紫三激光配置，配套BDFACSuite軟件系統(tǒng)。對(duì)2017—2019年該臺(tái)流式細(xì)胞儀的學(xué)生使用人次和測(cè)試樣品數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，如表1—2所示。從表1中可以看出2017—2019年學(xué)生使用流式細(xì)胞儀的人次和測(cè)試樣品數(shù)逐年升高，從表2中可以看出使用人次增長(zhǎng)率從2018年的67.74%提高到2019年的107.69%，測(cè)試樣品數(shù)增長(zhǎng)率從2018年的81.48%提高到2019年的137.87%，增幅明顯。這些數(shù)據(jù)說明近年來流式細(xì)胞儀的利用率明顯提高，越來越多的學(xué)生（包括本科生和研究生）能夠?qū)W習(xí)、了解流式細(xì)胞術(shù)，并在日常科研活動(dòng)中使用流式細(xì)胞儀，有效促進(jìn)了學(xué)校的人才培養(yǎng)。

2使用現(xiàn)狀分析

近年來，高等學(xué)校越來越重視本科生的科研能力培養(yǎng)。除了研究生參與科研活動(dòng)，隨著本科生課題申請(qǐng)量的增多，比如可以申請(qǐng)國(guó)家級(jí)、省級(jí)和校級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目等，越來越多的本科生也參與到科研活動(dòng)中。此外，學(xué)校還會(huì)成立科研興趣小組，在老師的帶領(lǐng)下，本科生在完成基礎(chǔ)課程學(xué)習(xí)之余，加入到老師所在實(shí)驗(yàn)室的科研工作中，參與科學(xué)研究的熱情高漲，大大提高了自身的基礎(chǔ)科研能力和科研實(shí)踐水平。一方面，可以使本科生增強(qiáng)對(duì)課題學(xué)習(xí)的理解，使其受到早期科研訓(xùn)練，另一方面，可以增強(qiáng)其接受研究生教育的能力和信心，有助于本科生順利進(jìn)入研究生階段的學(xué)習(xí)[2]。目前，流式細(xì)胞術(shù)作為細(xì)胞分析和分選的重要技術(shù)，在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床診斷及相關(guān)科學(xué)研究中廣泛應(yīng)用[3]，已進(jìn)入科研及臨床工作的各個(gè)方面，貫穿于基礎(chǔ)研究及臨床檢驗(yàn)等多方面。在醫(yī)學(xué)院校，培養(yǎng)一名醫(yī)學(xué)生，不僅要使其掌握醫(yī)學(xué)基本知識(shí)與臨床技能，還要使其掌握醫(yī)學(xué)發(fā)展最新動(dòng)態(tài)，了解醫(yī)學(xué)相關(guān)的最新技術(shù)手段，不斷增加知識(shí)儲(chǔ)備量。但在目前的醫(yī)學(xué)生培養(yǎng)過程中，還沒有系統(tǒng)地開設(shè)流式細(xì)胞術(shù)相關(guān)課程，學(xué)生在科研及臨床檢驗(yàn)中對(duì)流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)原理、應(yīng)用范圍及數(shù)據(jù)分析等并不了解，限制了流式細(xì)胞術(shù)在科研及臨床工作中的應(yīng)用及普及[4]。近年來，皖南醫(yī)學(xué)院每年開展大型儀器實(shí)驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)，培訓(xùn)對(duì)象為本科生、研究生及教師，旨在進(jìn)一步加強(qiáng)廣大師生對(duì)學(xué)校大型儀器設(shè)備的了解，提高校內(nèi)科研人員的儀器設(shè)備使用水平，為更好地開展科學(xué)研究工作打下良好的基礎(chǔ)。培訓(xùn)本著以教促學(xué)、示范促用的基本原則，以學(xué)校常用大型科研儀器的操作與應(yīng)用為主要內(nèi)容，通過理論講座對(duì)每臺(tái)儀器的原理、構(gòu)成、應(yīng)用范圍等方面進(jìn)行詳細(xì)介紹，并結(jié)合現(xiàn)場(chǎng)講解、全流程操作演示等環(huán)節(jié)，加深對(duì)儀器的認(rèn)識(shí)，了解操作規(guī)范。通過此類培訓(xùn)，廣大師生能夠進(jìn)一步了解學(xué)校大型儀器設(shè)備資源，有更多機(jī)會(huì)與實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員進(jìn)行直接、積極的溝通，共同促進(jìn)了師生與實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員自身技術(shù)水平的提高，進(jìn)一步提升了學(xué)?？蒲许?xiàng)目的承載能力和實(shí)驗(yàn)室的服務(wù)水平，促進(jìn)了學(xué)校的人才培養(yǎng)。在培訓(xùn)中以BDFACSVerse型流式細(xì)胞儀為例，首先，以PPT理論形式向師生介紹流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu)、工作原理、儀器操作等內(nèi)容，并結(jié)合皖南醫(yī)學(xué)院流式細(xì)胞儀應(yīng)用實(shí)際舉例，介紹其在細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、線粒體膜電位、細(xì)胞內(nèi)活性氧、細(xì)胞表面分子標(biāo)記等檢測(cè)中的應(yīng)用，使師生對(duì)其有初步了解。其次，理論培訓(xùn)結(jié)束后，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行上機(jī)操作，向師生演示如何進(jìn)行開關(guān)機(jī)、儀器質(zhì)控、方案建立、電壓調(diào)節(jié)、熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)、樣品收集、數(shù)據(jù)獲取與分析、儀器保養(yǎng)與維護(hù)等。將流式細(xì)胞術(shù)相關(guān)知識(shí)融入到大型儀器實(shí)驗(yàn)技術(shù)系列的培訓(xùn)中，使學(xué)生對(duì)流式細(xì)胞術(shù)的原理、操作步驟和應(yīng)用范圍有了基本了解，激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，啟發(fā)其帶著自己研究課題中或參加的科研活動(dòng)中實(shí)際遇到的問題或可能會(huì)遇到的問題來學(xué)習(xí)和運(yùn)用這門技術(shù)，為今后的相關(guān)課程學(xué)習(xí)和實(shí)際應(yīng)用奠定良好的基礎(chǔ)[5]。由于皖南醫(yī)學(xué)院是一所醫(yī)學(xué)院校，在培訓(xùn)中著重介紹流式細(xì)胞術(shù)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)相關(guān)領(lǐng)域和臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用，使學(xué)生有了更直觀的了解，大大調(diào)動(dòng)了其鉆研科研的熱情，使其能夠更好地理解和掌握先進(jìn)科學(xué)技術(shù)的原理及應(yīng)用，積極主動(dòng)地參與到科研活動(dòng)中，不僅最大限度地發(fā)揮了現(xiàn)有儀器設(shè)備的資源優(yōu)勢(shì)和師資特長(zhǎng)，還使學(xué)生接受了最好的專業(yè)訓(xùn)練[6]，使學(xué)生在畢業(yè)后走上工作崗位時(shí)能夠更快、更好地適應(yīng)工作需要。

3結(jié)語

由于流式細(xì)胞儀單價(jià)較高，學(xué)校擁有流式細(xì)胞儀的教研室較少，并且無專人操作，導(dǎo)致儀器使用率偏低。學(xué)?？蒲衅脚_(tái)自購(gòu)入流式細(xì)胞儀以來，專人專管該儀器，與其他教研室相比，流式細(xì)胞儀使用頻率相對(duì)較高；隨著后期儀器實(shí)現(xiàn)資源優(yōu)化，開放共享力度加大，會(huì)有更多的學(xué)生參與到科研中，可以進(jìn)一步提高流式細(xì)胞儀的使用率，更大限度地發(fā)揮儀器自身的價(jià)值。目前，該科研平臺(tái)流式細(xì)胞儀主要應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、活性氧、線粒體膜電位、細(xì)胞表面標(biāo)志等方面的檢測(cè)，今后隨著師生科研水平的提高以及承擔(dān)的科研項(xiàng)目數(shù)量的增多，儀器使用率會(huì)進(jìn)一步提高，儀器應(yīng)用范圍會(huì)得到進(jìn)一步擴(kuò)大，而不局限于以上檢測(cè)范圍。此外，目前學(xué)校流式細(xì)胞儀主要應(yīng)用于科研方面，在教學(xué)方面使用得較少，今后如何有效地將流式細(xì)胞儀與教學(xué)聯(lián)系起來，在教學(xué)中涉及流式細(xì)胞術(shù)的知識(shí)，激發(fā)學(xué)生對(duì)相關(guān)課程的學(xué)習(xí)興趣，提高流式細(xì)胞儀在教學(xué)中的利用率，是下一步要探討的問題。

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[5]賈永蕊.流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式的探索與實(shí)踐[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2012，31（7）：153-154，157.

[6]張英，黎宏宇，李莉，等.流式細(xì)胞術(shù)在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的開發(fā)與應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2013，32（7）：206-208，219.

作者：竇德宇 呂夢(mèng)娟 單位：皖南醫(yī)學(xué)院