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談醫(yī)藥院校高效液相色譜管理

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談醫(yī)藥院校高效液相色譜管理

摘要:本文從制度管理、規(guī)范化操作管理、維護(hù)管理等三個(gè)方面來(lái)闡述醫(yī)藥院校高效液相色譜管理,通過(guò)規(guī)范的管理,提高儀器的使用率,保障化相關(guān)教學(xué)科研工作的順利進(jìn)行。

關(guān)鍵詞:醫(yī)藥院校;高效液相色譜;管理

高效液相色譜法是儀器分析的一種重要方法[1],是醫(yī)藥院校中醫(yī)學(xué)類、藥學(xué)類及其相關(guān)專業(yè)必需的實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容,是實(shí)踐性操作性專業(yè)性很強(qiáng)的一種分析方法,在教學(xué)和科研方面為培養(yǎng)技能型醫(yī)藥專才發(fā)揮著重要作用。高效液相色譜適用于分析受熱不穩(wěn)定易分解的、高沸點(diǎn)、不易揮發(fā)的、分子量較大、不同極性的天然和合成有機(jī)化合物,應(yīng)用范圍十分廣泛,具有高效率、高分辨率、高靈敏度、高速度的特點(diǎn)。而且,儀器十分昂貴,并要經(jīng)常維護(hù),因而,對(duì)于高效液相的管理提出了很高的要求。

1制度管理

建立和完善高效液相色譜相關(guān)管理制度,使管理制度科學(xué)化合理化規(guī)范化,在學(xué)校和學(xué)院層面建立《高效液相色譜使用、維護(hù)管理制度》,加強(qiáng)管理。由于使用人員較多,要實(shí)行提前預(yù)約制度,按照預(yù)約時(shí)間排隊(duì)。儀器使用前要熟悉儀器操作規(guī)程,不得做與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的參數(shù)設(shè)置;不得拆卸儀器,有問(wèn)題要及時(shí)匯報(bào)。因?qū)嶒?yàn)人員使用不當(dāng)造成的儀器或軟件損壞由實(shí)驗(yàn)者或其負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)盡快維修。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)存放建立的文件夾,以實(shí)驗(yàn)者名字命名,數(shù)據(jù)拷貝用專用U盤,不得擅自在電腦里安裝軟件,確實(shí)需要安裝需經(jīng)過(guò)管理者同意。使用者要經(jīng)過(guò)專業(yè)的操作培訓(xùn),合格后方可單獨(dú)操作儀器。通過(guò)規(guī)范化的制度管理,不但能提高儀器的使用率,還能延長(zhǎng)儀器的壽命。

2規(guī)范化操作管理

進(jìn)行高效液相色譜實(shí)驗(yàn)時(shí),每個(gè)環(huán)節(jié)的操作,直接影響實(shí)驗(yàn)的成敗,有些失誤甚至?xí)斐蓛x器不同零部件的損壞,因而每個(gè)操作都要嚴(yán)謹(jǐn)和細(xì)致,因此有必要規(guī)范化操作,制定標(biāo)準(zhǔn)的操作流程。以普通的高效液相色譜儀為例,具體步驟要有嚴(yán)格的先后操作順序:(1)過(guò)濾流動(dòng)相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。(2)對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。(3)打開(kāi)HPLC工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),連接好流動(dòng)相管道,連接檢測(cè)系統(tǒng)。(4)進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單。(5)有一段時(shí)間沒(méi)用,或者換了新的流動(dòng)相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,再點(diǎn)擊start,沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10ml/min。(6)調(diào)節(jié)流量,初次使用新的流動(dòng)相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure,選用合適的流速,點(diǎn)擊on,走基線,觀察基線的情況。(7)設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file,選取selectusersandmethods,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法,點(diǎn)擊newmethod。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,泵,檢測(cè)器等,根據(jù)需要而不同。選完后,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,一般2~5分鐘;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換;d.走樣時(shí)間,隨不同的樣品而不同。(8)進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,所有的樣品均需過(guò)濾。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。(9)關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),再關(guān)液相色譜。只有規(guī)范具體的操作流程,才能更好地進(jìn)行分析實(shí)驗(yàn),獲得準(zhǔn)確真實(shí)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),才能更好地維護(hù)好高效液相色譜儀器。

3維護(hù)管理

在使用高效液相色譜色譜儀器后一定要做好維護(hù)管理,一般來(lái)說(shuō)最好的維護(hù)就是經(jīng)常規(guī)范性使用,在操作使用時(shí)充分了解儀器的注意事項(xiàng),做到科學(xué)分析合理使用。流動(dòng)相需采用色譜純?nèi)軇?,水須為超純水,?zhǔn)備所需的流動(dòng)相,以滿足儀器要求,避免損壞色譜柱;超純水須當(dāng)天配當(dāng)天用;進(jìn)樣或溶劑進(jìn)入色譜柱前須經(jīng)徹底的排氣,嚴(yán)禁氣泡進(jìn)入色譜柱;流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱后要檢查流路有沒(méi)漏液,特別是色譜柱的接頭;嚴(yán)禁100%水進(jìn)入反相色譜柱,需有一定的有機(jī)溶劑比例;嚴(yán)禁使用沒(méi)經(jīng)濾膜過(guò)濾的溶劑沖洗色譜柱,避免將互不相溶的溶劑一同進(jìn)入泵內(nèi);流動(dòng)相需經(jīng)過(guò)濾、除氣后方可使用,用適合的0.45μm濾膜過(guò)濾,超聲脫氣20~30min;待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過(guò)濾,配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液,用合適的0.45μm濾膜過(guò)濾,以避免堵塞、損壞色譜柱,所有通過(guò)色譜柱的液體須經(jīng)嚴(yán)格過(guò)濾;流動(dòng)相的比例須逐步過(guò)渡,不能跨度太大;流速不論是由慢到快還是由快到慢也須逐步過(guò)渡,最大流速一般不超過(guò)10ml/min;分析完成后,須及時(shí)清洗色譜柱和檢測(cè)器的比色池,原則上先用流動(dòng)相沖洗30min,再逐步過(guò)渡到100%有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)沖洗30min,嚴(yán)禁由一種溶劑馬上變換另一種溶劑,酸堿鹽類須先由90%水:10%甲醇沖洗30~60min,再逐步過(guò)渡到100%甲醇沖洗。長(zhǎng)時(shí)間不用色譜柱,要沖洗好后,用純甲醇或乙腈封存普通;C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析,定期測(cè)柱效,有下降,可以用10%異丙醇甲醇沖洗色譜柱。每次實(shí)驗(yàn)后要做好登記使用記錄,長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),管理人員應(yīng)該定期檢查高效液相色譜各個(gè)部件的狀況,做好相關(guān)的維護(hù)措施。

4總結(jié)

高效液相色譜儀器在醫(yī)藥院校的教學(xué)和科研中使用率和利用率很高,本文通過(guò)儀器的制度化管理、操作規(guī)范化管理和維護(hù)管理,使其更好地服務(wù)于教學(xué)和科研,只有加強(qiáng)各方面的管理,提高使用率延長(zhǎng)使用壽命[2],才能更好地提高教學(xué)質(zhì)量和科研水平,為學(xué)校和社會(huì)培養(yǎng)創(chuàng)新型技能型高素質(zhì)醫(yī)藥人才,提高畢業(yè)生的就業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力。

參考文獻(xiàn)

[1]吳少敏,張雅芝,殷博昊.高效液相色譜的使用和維護(hù)[J].實(shí)驗(yàn)室科學(xué),2011,14(3):183-186.

[2]周陸怡,李琴.高等院校高效液相色譜的管理與維護(hù)[J].廣州化工,2019,47(4):149-150.

作者:何樹(shù)華 陳御珍 鄭明彬 陳銘祥 單位:廣東醫(yī)科大學(xué)