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現(xiàn)在,已經(jīng)有越來(lái)越多的學(xué)者在認(rèn)真反思科技帶給求職者的是便捷,還是無(wú)奈。專(zhuān)注于招聘科技和人事戰(zhàn)略的國(guó)際性咨詢(xún)顧問(wèn)機(jī)構(gòu)CareerXroads的合作創(chuàng)建者格里·克里斯賓認(rèn)為,從求職者角度來(lái)看,這40年來(lái)的招聘過(guò)程“是非常令人傷心的”。
在20世紀(jì)90年代以前,公司看完求職者的簡(jiǎn)歷后,一般還會(huì)告訴他們是否得到了機(jī)會(huì),他們應(yīng)聘的職位是否得到了填補(bǔ)。但現(xiàn)在,即使是每年排列在最佳雇主榜單上的公司,大部分也沒(méi)有成本和精力給求職者這樣的尊重了。
因?yàn)楣酒毡檎J(rèn)為,與求職者的交流毫無(wú)必要。在這個(gè)簡(jiǎn)歷堆積如山的時(shí)代,如果一個(gè)銷(xiāo)售職位只準(zhǔn)備聘用一個(gè)人,公司平均會(huì)收到100封簡(jiǎn)歷,企業(yè)從中選出4到5名參加面試,剩下的大部分人自然就會(huì)被忽略掉。
《華爾街日?qǐng)?bào)》在2012年調(diào)查顯示,當(dāng)年有760萬(wàn)人申請(qǐng)了星巴克的6.5萬(wàn)個(gè)職位;近100萬(wàn)人申請(qǐng)了寶潔公司的2000個(gè)職位,200萬(wàn)人申請(qǐng)了谷歌公司的7000個(gè)職位。這篇文章還指出,大約90%的大公司都會(huì)使用計(jì)算機(jī)招聘系統(tǒng)來(lái)篩選求職人員,并為他們排位。雖然只有大約35%的求職者符合他們所申請(qǐng)工作的基本要求,但在這35%里,被篩掉的幾率也仍然是極大的。
沃頓商學(xué)院管理學(xué)教授馬修·比德維爾談到,現(xiàn)在顯然是對(duì)雇主更有利的招聘環(huán)境。“如果你的每個(gè)職位都有數(shù)千個(gè)求職者,那么,你就可以利用粗糲的工具挑選人員,因?yàn)槟阌X(jué)得無(wú)論如何都能找到優(yōu)秀的求職者?!笨紤]到勞動(dòng)力市場(chǎng)人員過(guò)剩的現(xiàn)狀,雇主無(wú)需為采用不那么傳統(tǒng)的方法招聘人員感到擔(dān)心。雖然這么做的副作用是,“公式化的招聘過(guò)程”最終會(huì)形成創(chuàng)造力較低的員工隊(duì)伍。
輕率的招聘造就輕率的求職者
許多公司的簡(jiǎn)歷要求其實(shí)是宏大而空洞的:“我們需要智慧、富有創(chuàng)造性、能接受有挑戰(zhàn)工作的員工?!边@引來(lái)許多求職者不假思索地提交簡(jiǎn)歷,同時(shí)也不抱著能得到回復(fù)的希望。另一面,公司收到的簡(jiǎn)歷成災(zāi),這又進(jìn)一步催生了依靠“粗糲”的篩選系統(tǒng)來(lái)過(guò)濾簡(jiǎn)歷的需求。這確實(shí)是一個(gè)惡行循環(huán)。
公司在抱怨現(xiàn)在求職者海投簡(jiǎn)歷,全無(wú)職業(yè)規(guī)劃的概念,但這恰恰也是公司篩選簡(jiǎn)歷的輕率造成的。過(guò)程越自動(dòng)化,投遞越簡(jiǎn)單,求職者只要按一下鼠標(biāo)就可以寄出一份簡(jiǎn)歷,他們當(dāng)然也會(huì)越來(lái)越不愛(ài)花心思去研究公司的要求?!叭绻咀屵@個(gè)過(guò)程變得更困難,求職者需要思考的東西越多,他們也就會(huì)只申請(qǐng)自己認(rèn)為可以得到的職位?!?/p>
篩選正在機(jī)械地拉高標(biāo)準(zhǔn)
因?yàn)橐晃籋R愿意在每份工作簡(jiǎn)歷上花費(fèi)的時(shí)間是有限的,為了減輕他們的時(shí)間成本負(fù)擔(dān),更快地篩出合適人才,HR們自然會(huì)為簡(jiǎn)歷設(shè)定許多硬件標(biāo)準(zhǔn)。而名校畢業(yè)、專(zhuān)業(yè)背景、英文水平、資格證書(shū)恰恰是最容易被挑揀出來(lái)的。
歐盟商會(huì)的資深人力資源教練朱丹說(shuō),對(duì)企業(yè)而言,從人海中被動(dòng)接受投遞的簡(jiǎn)歷,然后進(jìn)行篩選,費(fèi)時(shí)費(fèi)力,很多時(shí)候也不能找到自己滿(mǎn)意的人,所以不少企業(yè)都會(huì)有自己相對(duì)穩(wěn)定的合作院校,基于管理層也可能出自這些學(xué)校原因,對(duì)學(xué)生的綜合素質(zhì)有較穩(wěn)定的預(yù)期,也比較了解這個(gè)教育體系下學(xué)生的特點(diǎn)。這當(dāng)然擠壓了許多二線(xiàn)學(xué)校畢業(yè)求職者的機(jī)會(huì)。公司或者干脆直接去幾所重點(diǎn)院校招聘,或者在網(wǎng)申時(shí)也以此為篩選標(biāo)準(zhǔn),所以如果你的教育背景不在他們考慮的范圍,很難進(jìn)入他們的視線(xiàn)。
所以,在寫(xiě)簡(jiǎn)歷之前,多花時(shí)間鎖定目標(biāo)行業(yè)中的幾家企業(yè),分別了解他們的基本信息也是必不可少的。但不能簡(jiǎn)單停留在根據(jù)招聘崗位的描述來(lái)臆斷,這里面往往說(shuō)的并不清晰,最好是通過(guò)多維度、內(nèi)部資源來(lái)了解。通過(guò)同學(xué)網(wǎng)絡(luò)打聽(tīng)內(nèi)部實(shí)際狀況,了解崗位的基本要求,然后通過(guò)實(shí)踐來(lái)親身體驗(yàn),最終為自己的目標(biāo)搭建某種橋梁。
就像申請(qǐng)國(guó)外的大學(xué)一樣,學(xué)校排名、對(duì)應(yīng)專(zhuān)業(yè)的地位、對(duì)申請(qǐng)人的要求、推薦人的意見(jiàn)等等,這個(gè)準(zhǔn)備不會(huì)從準(zhǔn)備素材這會(huì)兒開(kāi)始,在此前的學(xué)習(xí)和考試中就已經(jīng)播下了種子。
所以,簡(jiǎn)歷也一樣,不是制作設(shè)計(jì)簡(jiǎn)歷的這一刻,而是從選擇學(xué)校、專(zhuān)業(yè)就開(kāi)始要明確目標(biāo),從大一的生活開(kāi)始就需要用行動(dòng)來(lái)積累經(jīng)歷,通過(guò)能力的提升選擇最終完成簡(jiǎn)歷的準(zhǔn)備。簡(jiǎn)歷是次要的!
另外,從職業(yè)發(fā)展的角度來(lái)看,并非所有的人都應(yīng)該削尖腦袋準(zhǔn)備進(jìn)500強(qiáng)的大公司,還是需要基于對(duì)自己的了解,綜合實(shí)力和素質(zhì)的評(píng)價(jià)、目標(biāo)來(lái)判斷和尋找機(jī)會(huì)。第一份工作當(dāng)然很重要,但進(jìn)入大公司又有難度,我們也可以鎖定它相關(guān)產(chǎn)業(yè)、上下游的優(yōu)質(zhì)企業(yè)。
朱丹曾接觸到一個(gè)例子,一家500強(qiáng)的公司有了一個(gè)空缺崗位,有兩位主要的候選人:一位來(lái)自其他500強(qiáng)的公司,專(zhuān)業(yè)背景、學(xué)校、技能都不錯(cuò),但總體感覺(jué)循規(guī)蹈矩,專(zhuān)業(yè)性有余而開(kāi)拓性不足;另一位來(lái)自民營(yíng)企業(yè),經(jīng)過(guò)實(shí)踐的淬煉,專(zhuān)業(yè)技能也不錯(cuò),重要的是在民營(yíng)企業(yè)的生存壓力下練就了很強(qiáng)的開(kāi)拓能力。正是這個(gè)開(kāi)拓力,是此次崗位最需要的,所以來(lái)自民營(yíng)企業(yè)的這位候選人獲得了這個(gè)機(jī)會(huì)。
所以說(shuō),起點(diǎn)雖然重要,但如果事情都比較平順,職業(yè)生涯的瓶頸可能就不遠(yuǎn)了。凡事兩面觀(guān),第一步?jīng)]能實(shí)現(xiàn),只要目標(biāo)還在,只要還在努力,也能“曲線(xiàn)救國(guó)”。
簡(jiǎn)歷寫(xiě)作三步走
簡(jiǎn)歷就是為了獲得面試的機(jī)會(huì),為了讓HR對(duì)你感興趣??瓷先ズ鼙〉腁4紙,背后要做的功課其實(shí)很多。成功的職位招聘是實(shí)現(xiàn)職位與個(gè)人高度匹配,如何在簡(jiǎn)歷里更多體現(xiàn)與職位要求匹配,其實(shí)是有方法可循的。
安永培訓(xùn)經(jīng)理張熙介紹了一種專(zhuān)業(yè)HR人士普遍認(rèn)可的簡(jiǎn)歷寫(xiě)作三步走的方法:
首先是目標(biāo)分析。這是知己知彼的第一步,對(duì)所選職位企業(yè)所在的行業(yè)和企業(yè)本身多一些研究了解,并從職位說(shuō)明看如何讀懂企業(yè)的需求,剝離出職位要求的關(guān)鍵字。也就是在了解行業(yè)、企業(yè)的前提下,學(xué)會(huì)從崗位說(shuō)明看懂企業(yè)需求,剝離關(guān)鍵字,具體情況可能不盡相同,但歸根結(jié)底不外乎是對(duì)知識(shí)、能力和經(jīng)驗(yàn)三方面進(jìn)行分解剝離。
其次是自我分析。將自己以往在學(xué)習(xí)/工作中取得的所有成就,自己認(rèn)為滿(mǎn)意的成果,都羅列出來(lái),創(chuàng)建自己的成就列表。也按照簡(jiǎn)歷三叉戟的三方面進(jìn)行拆分,組建自己的成果倉(cāng)庫(kù),并隨和職業(yè)生涯的發(fā)展,不斷豐富這個(gè)倉(cāng)庫(kù)的成果和成就。
最后是對(duì)接匹配。某資深名企HR曾給出這樣建議:候選人可以將自己的成就列表寫(xiě)在一張紙的左面,把某企業(yè)的職位要求關(guān)鍵字列在右邊;然后對(duì)照右邊企業(yè)要求的關(guān)鍵字,從自己左邊的成就列表倉(cāng)庫(kù)中,挑選相匹配的因素羅列出來(lái);完成配比后,將篩選出來(lái)的知識(shí)、能力和經(jīng)歷按照一定邏輯整理、書(shū)寫(xiě)成簡(jiǎn)歷。
你的簡(jiǎn)歷中是否有“主動(dòng)性”和“計(jì)劃性”?
雖然簡(jiǎn)歷篩選的紅海給無(wú)數(shù)求職者帶來(lái)漫無(wú)邊際的迷茫,簡(jiǎn)歷歸根到底仍然是自我設(shè)計(jì)。機(jī)器篩選的也正是你背后的“用心之處”。朱丹說(shuō):“當(dāng)簡(jiǎn)歷內(nèi)容毫無(wú)特色時(shí),必然說(shuō)明我們之前的生活平淡無(wú)奇,毫無(wú)特色。所以,反觀(guān)之,為了最終呈現(xiàn)一份‘與眾不同’的簡(jiǎn)歷,意味我們?cè)诖酥熬托枰冻龈??!?/p>
北京松下電子有限公司
人事科長(zhǎng)張?jiān)2畔壬?/p>
篩選標(biāo)準(zhǔn):從簡(jiǎn)歷判斷求職者的思維特點(diǎn)
對(duì)于市面上蜂擁而現(xiàn)的大貼藝術(shù)照和寫(xiě)真照的簡(jiǎn)歷,北京松下電子有限公司并不贊成。企業(yè)用人是根據(jù)崗位需求和個(gè)人情況來(lái)選擇的,簡(jiǎn)歷再漂亮也起不到?jīng)Q定性的作用,尤其是應(yīng)屆畢業(yè)生更不該如此制作簡(jiǎn)歷。
至于篩選簡(jiǎn)歷的根據(jù),我們針對(duì)不同崗位的需求,會(huì)有不同的考察重點(diǎn)。比如招聘技術(shù)型人才時(shí),看應(yīng)屆畢業(yè)生的簡(jiǎn)歷會(huì)比較注重其專(zhuān)業(yè)成績(jī),在校是否有過(guò)相關(guān)作品;如果招聘的是管理型人才,除了看所學(xué)專(zhuān)業(yè)和學(xué)習(xí)成績(jī)外,還會(huì)注重他在校時(shí)擔(dān)任的學(xué)生會(huì)工作、參加的社會(huì)活動(dòng)等。看社會(huì)人員的簡(jiǎn)歷時(shí),除了硬件必須符合招聘崗位需求之外,主要看他的工作經(jīng)歷。
【摘要】 目的選育四倍體伊犁貝母Fritillaria pallidiflora Schrenk新種質(zhì),為高產(chǎn)、高生物堿含量的伊犁貝母育種打下基礎(chǔ)。方法以鱗莖誘導(dǎo)出的不定芽為材料,將其接入含有2%二甲基亞砜、不同濃度秋水仙素的液體MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)四倍體,利用處理后不定芽表型變化及染色體計(jì)數(shù)篩選鑒定四倍體伊犁貝母。結(jié)果成功獲得了染色體加倍的伊犁貝母新材料,其中以含秋水仙素400 mg/L浸泡24 h效果最佳,四倍體誘導(dǎo)率達(dá)到33.3%,四倍體植株與二倍體對(duì)照相比,二者在表型性狀、顯微結(jié)構(gòu)上有明顯區(qū)別。結(jié)論四倍體植株體型大、生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)明顯,離體條件下利用不定芽誘導(dǎo)多倍體是伊犁貝母倍性育種的一條有效途徑。
【關(guān)鍵詞】 伊犁貝母; 四倍體; 秋水仙素
Abstract:ObjectiveTo create new tetraploid resource of Fritillaria pallidiflora Schrenk in hope of potential cultivar with high bulb yield and high level of alkaloid.MethodsMultiple shoots induced from bulb pieces were used for tetraploid induction by immerging in colchicine solution of different concentrations.ResultsTetraploids were achieved successfully. The most efficient treatment for inducing tetraploid was soaking the shoot in 400 mg/L colchicine solution for 24 h, the inducing rate could be up to 33.3%.The induced tetraploids exhibited notable difference with control in morphology,physiology,and microscopic structure.ConclusionThe tetraploid fritillaria shows the advantages of gigantic size and vigorous growth.Thus, the established technical system to induce tetraploid from multiple shoots would provide an efficient alternative pathway for medicinal plants of Fritillaria pallidiflora Schrenk.
Key words:Fritillaria pallidiflora Schrenk; Tetraploid; Colchicine
伊犁貝母Fritillaria pallidiflora Schrenk,百合科多年生草本植物,一味常用中藥,以鱗莖入藥,具有清熱潤(rùn)肺、化痰止咳的功效,其有效成分主要是異甾體生物堿及其苷,尤以西貝素(imperialine)和西貝素苷(imperialine-3β-D-glucoside)為主要藥效成分[1]。由于人工栽培繁殖系數(shù)低、品系退化[2],野生伊犁貝母長(zhǎng)期以來(lái)被大量采挖,分布面積日益縮減,資源破壞嚴(yán)重,已成為國(guó)家三級(jí)瀕危保護(hù)植物,因此探求伊犁貝母新種質(zhì)是科研工作的當(dāng)務(wù)之急。
多倍體植物由于染色體加倍,往往具有根莖葉的巨大性,能較好地滿(mǎn)足藥材生產(chǎn)的要求。同時(shí)植物染色體倍性的改變,導(dǎo)致部分基因表達(dá)活性的變化從而引起代謝產(chǎn)物含量的變化[3,4]。孫靜賢等[5]綜述了多種多倍體植物次生代謝產(chǎn)物較二倍體增加,L.DeJesus-Gonzalez等[6]報(bào)道四倍體黃花蒿Artemisia annua L.產(chǎn)生青蒿素(artemisinin)的量為二倍體的6倍。伊犁貝母是二倍體(2n=2x=24),多倍體誘變育種方面未見(jiàn)報(bào)道,本研究通過(guò)秋水仙素處理鱗莖切塊誘導(dǎo)產(chǎn)生的不定芽,進(jìn)行多倍體育種研究,以提高伊犁貝母鱗莖產(chǎn)量及藥用成分的含量,克服栽培種品系退化問(wèn)題。
1 材料
伊犁貝母鱗莖由新疆中藥民族藥研究所提供、鑒定。
2 方法
2.1 不定芽誘導(dǎo)與增殖 將伊犁貝母新鮮鱗莖用水洗凈表面,大鱗莖于太陽(yáng)下晾曬12~24 h,小鱗莖晾曬8~12 h ,然后將鱗莖在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行消毒處理,75%酒精30 s,0.1%升汞6~10 min,15%雙氧水30~60 min,無(wú)菌水沖洗2~3次。處理后的鱗莖切成0.5 cm×0.5 cm大小,接入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+KT 0.5~1.0 mg/L + NAA 0.1~0.4 mg/L,(20±1) ℃,2 000 lx,18 h/d培養(yǎng)。
2.2 四倍體的誘導(dǎo) 將伊犁貝母不定芽切成單芽浸泡在2%二甲基亞砜、100~800 mg/L秋水仙素的液體MS培養(yǎng)基中,同時(shí)以單芽接入不加二甲基亞砜和秋水仙素的液體MS培養(yǎng)基作對(duì)照,均置于轉(zhuǎn)速為100 r/min的搖床上處理 12~36 h,隨后轉(zhuǎn)入不含秋水仙素的液體MS培養(yǎng)基中100 r/min搖床培養(yǎng)4 h,再用無(wú)菌水沖洗2~3次后,接入MS固體空白培養(yǎng)基,每隔10 d重復(fù)上述處理1次,共處理3次,最后于無(wú)菌濾紙上約20 min晾干后轉(zhuǎn)入:MS+KT 0.5~1.0 mg/L + NAA 0.1~0.4 mg/L固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
2.3 四倍體篩選與染色體鑒定四倍體伊犁貝母的篩選與鑒定根據(jù)四倍體與二倍體在形態(tài)學(xué)上差異,不定芽生長(zhǎng)勢(shì)、葉寬、葉色、葉厚,解剖學(xué)上上表皮氣孔大小及密度、保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體含量的差異篩選出疑似株。將疑似株轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基生根,待根尖長(zhǎng)至0.2~0.5 cm時(shí)取疑似株幼嫩根尖和莖尖,采用薛恒鋼等[7]常規(guī)壓片法統(tǒng)計(jì)染色體條數(shù):4 ℃下0.002 mol/L 8-羥基喹啉預(yù)處理4 h、卡諾固定液固定12~18 h,1 mol/L鹽酸60 ℃解離8~10 min,改良苯酚品紅染色液染色5~10 min,壓片統(tǒng)計(jì)染色體數(shù)目。每個(gè)生根的不定芽取4個(gè)根尖,每個(gè)根尖統(tǒng)計(jì)20個(gè)分裂相細(xì)胞,莖尖統(tǒng)計(jì)20個(gè)分裂相細(xì)胞,記錄染色體條數(shù),根據(jù)統(tǒng)計(jì)的染色體數(shù)目確定四倍體伊犁貝母。
3 結(jié)果
3.1 不定芽誘導(dǎo)與增殖 鱗莖切塊(圖1 a)接入培養(yǎng)基10 d左右開(kāi)始變綠,2~3周可觀(guān)察到分化出的不定芽芽點(diǎn)(圖1 b),40 d后不定芽可長(zhǎng)至1~3 cm(圖1 c)。KT:NAA≈3.5左右時(shí),每個(gè)鱗莖切塊可以分化出3~5個(gè)不定芽,根據(jù)不定芽生長(zhǎng)情況適當(dāng)提高KT濃度,兩者濃度比在5.0時(shí)每個(gè)鱗莖切塊可誘導(dǎo)產(chǎn)生5~7個(gè)不定芽(圖1 b)。不定芽生長(zhǎng)旺盛,保證了多倍體誘變的材料供應(yīng)。
圖1 不定芽的誘導(dǎo)與誘導(dǎo)多倍體的單芽(略)
3.2 四倍體誘導(dǎo) 經(jīng)過(guò)3次秋水仙素誘變處理后,不同濃度秋水仙素及處理時(shí)間對(duì)伊犁貝母染色體加倍的影響見(jiàn)表1。 1號(hào)處理沒(méi)能篩選到四倍體,7號(hào)處理誘導(dǎo)率最高,達(dá)到33.3%。低濃度秋水仙素對(duì)不定芽誘變作用不明顯,100 mg/L秋水仙素處理12 h沒(méi)有檢測(cè)到染色體加倍的植株,處理36 h時(shí)四倍體誘導(dǎo)率只有2.6%,而低濃度(100,200 mg/L)處理隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)四倍體誘變率提高幅度較大。高濃度的秋水仙素對(duì)不定芽的傷害大,致死作用強(qiáng),秋水仙素濃度為800 mg/L時(shí)處理12 h死亡率達(dá)到30%,處理超過(guò)36 h時(shí)有過(guò)半不定芽死亡,而四倍體誘導(dǎo)率只有15.8%。在四倍體誘變過(guò)程中由于秋水仙素對(duì)處理材料既有染色體誘變加倍作用又有較強(qiáng)的毒害作用,因此伊犁貝母四倍體誘變育種中,必須結(jié)合考慮秋水仙素誘變作用和毒害作用。本實(shí)驗(yàn)綜合考慮這兩個(gè)方面因素得出含有2%二甲基亞砜,秋水仙素濃度為400 mg/L的液體MS培養(yǎng)基中浸泡24 h為最佳處理方法。
轉(zhuǎn)貼于
表1 不同濃度及處理時(shí)間對(duì)伊犁貝母染色體加倍的影響(略)
誘變率:加倍植株數(shù)/(處理不定芽數(shù)-死亡芽數(shù))
3.3 四倍體篩選與鑒定 經(jīng)誘變處理3周后部分不定芽死亡,存活下來(lái)多倍體不定芽初期生長(zhǎng)緩慢,培養(yǎng)兩個(gè)月后產(chǎn)生的葉片在外觀(guān)形態(tài)上與對(duì)照組有較大的差別(圖2):四倍體不定芽葉片寬而厚、葉面顏色稍深;在組織解剖觀(guān)察上與二倍體相比氣孔大、密度小,在400倍顯微鏡下氣孔保衛(wèi)細(xì)胞所含葉綠體較對(duì)照多(圖3~4)等明顯的多倍體性狀。根據(jù)處理后與對(duì)照在表型上的差異及氣孔特性可以排除60%左右染色體未加倍的植株,篩選出疑似株。通過(guò)莖尖與根尖染色體分析,二倍體細(xì)胞染色體2n=2x=24,四倍體為2n=4x=48,共統(tǒng)計(jì)100個(gè)中期分裂細(xì)胞,確定四倍體植株。見(jiàn)圖5~6。
圖2 生長(zhǎng)兩個(gè)月的二倍體(a)與四倍體(b)表型差異(略)
圖3 二倍體氣孔(略)
圖4 四倍體氣孔(略)
圖5 二倍體染色體 2n=2x=24(略)
圖6 四倍體染色體 2n=4x=48(略)
4 討論
本研究確定了伊犁貝母四倍體誘變育種的可行方法。伊犁貝母種子萌發(fā)困難,籽苗生長(zhǎng)勢(shì)弱,人工栽培極少用種子繁殖,多數(shù)用鱗莖繁殖。植株每年生長(zhǎng)70~80 d,地面莖桿便枯萎死亡,地下鱗莖頂芽在夏末至中秋進(jìn)行分化活動(dòng),奠定翌年?duì)I養(yǎng)苗形態(tài)結(jié)構(gòu)的全部組分[8],因此在自然生長(zhǎng)條件下利用秋水仙素處理地上部分誘導(dǎo)四倍體伊犁貝母很難實(shí)現(xiàn)。本研究利用誘導(dǎo)鱗莖切塊產(chǎn)生的大量不定芽為處理材料,通過(guò)秋水仙素處理不定芽誘導(dǎo)四倍體伊犁貝母有效克服了自然出芽時(shí),地上部分形態(tài)結(jié)構(gòu)已經(jīng)確定,誘變處理很難使地下鱗莖染色體加倍的限制。同時(shí)由于伊犁貝母地上部分生長(zhǎng)期短,利用秋水仙素處理自然氣候下的材料季節(jié)限制無(wú)法避免,而利用秋水仙素處理離體條件下誘導(dǎo)產(chǎn)生的不定芽,避免了伊犁貝母多倍體育種的季節(jié)限制。
在多倍體誘導(dǎo)過(guò)程中,秋水仙素處理后的不定芽轉(zhuǎn)入不含秋水仙素的液體MS培養(yǎng)基中有利于秋水仙素的釋放,降低了幼嫩不定芽受到的毒害,因此在誘變效率33.3%時(shí),仍可以保證存活率達(dá)到75%(見(jiàn)表1)。利用低濃度的秋水仙素處理不定芽,對(duì)于染色體的加倍是有利的,但多倍體篩選鑒定的工作量大。高濃度的秋水仙素對(duì)不定芽毒害作用強(qiáng),死亡率高,但篩選鑒定多倍體的工作量較低。在倍性鑒定過(guò)程中通過(guò)染色體倍性檢測(cè),將根尖與幼嫩不定芽莖尖染色體統(tǒng)計(jì)相結(jié)合,有效避免了只利用根尖作為植株倍性參考指標(biāo)時(shí)嵌合體難排除的困難。四倍體伊犁貝母由于染色體加倍,鱗莖產(chǎn)量可能增加,同時(shí)染色體倍性的變化可能獲得生物堿含量高的伊犁貝母植株,從而緩解野生伊犁貝母破壞嚴(yán)重,人工栽培種品系退化問(wèn)題。通過(guò)對(duì)獲得的四倍體植株作進(jìn)一步篩選,獲得鱗莖產(chǎn)量高、有效成分含量高的伊犁貝母新品種,是今后還要進(jìn)行的研究課題。
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[關(guān)鍵詞]篩分機(jī) 安裝調(diào)試 故障 處理
中圖分類(lèi)號(hào):TD92 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1009-914X(2014)13-0040-01
振動(dòng)篩由帶偏心塊的激振器驅(qū)動(dòng),由激振器偏心塊的回轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的周期變化的離心力帶動(dòng)篩體與水平方向成一定角度振動(dòng)。物料由入料端輸入,通過(guò)篩體的振動(dòng)向出料端拋擲,細(xì)力透篩,粗力由出料端排出。振動(dòng)篩結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、重量較輕、金屬消耗量少、成本較低、能耗較低、安裝簡(jiǎn)單、維修方便。隨著機(jī)械科技的發(fā)展和選煤加工工藝的完善和改進(jìn),高能低效的設(shè)備如搖動(dòng)篩、滾軸篩等正在被逐漸淘汰,結(jié)構(gòu)更加合理的各類(lèi)振動(dòng)篩不斷創(chuàng)新,并得到廣泛應(yīng)用。
直線(xiàn)震動(dòng)篩是目前我國(guó)選煤廠(chǎng)使用廣泛的振動(dòng)篩。其激振器一般都安裝在激振梁上,用有聯(lián)軸器的驅(qū)動(dòng)軸連接電動(dòng)機(jī)驅(qū)動(dòng)。激振器的兩組擺塊通過(guò)齒輪的精確嚙合保證擺塊同步反向轉(zhuǎn)動(dòng),以使振動(dòng)篩沿振動(dòng)方向直線(xiàn)運(yùn)動(dòng),即直線(xiàn)振動(dòng)篩。另外還有一些直線(xiàn)振動(dòng)篩采用激振電機(jī)作為振動(dòng)源,它是使振動(dòng)電機(jī)保持相反方向同步轉(zhuǎn)動(dòng)產(chǎn)生定向激振力的。直線(xiàn)振動(dòng)篩有固定的拋擲角。與其它篩比較,直線(xiàn)振動(dòng)篩具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用可靠、篩分效果好等優(yōu)點(diǎn),目前,是我國(guó)選煤廠(chǎng)中使用最廣泛的一種篩分設(shè)備。它可以產(chǎn)生足夠大的加速度,適用于煤炭分級(jí)、脫水、脫介。
1、篩安裝調(diào)試
1.1、支撐結(jié)構(gòu)
支撐柱、梁和端部連接件要具有剛性并對(duì)橫向扭曲和傾倒起著限制作用,基礎(chǔ)必須牢固,在通常情況下,支撐構(gòu)件和整體結(jié)構(gòu)的固有振動(dòng)頻率都要與激振器不同,其差值至少為50%,不然,可能造成共振,導(dǎo)致對(duì)廠(chǎng)房損壞。
1.2、聚氨酯防護(hù)
對(duì)材質(zhì)為橡膠或聚氨酯覆層的部件,例如篩板,一定要予以防護(hù),防止遭受直接強(qiáng)烈光照、高溫、較大的晝夜溫度變化或機(jī)械性損壞。
1.3、底板的安裝
使用普通螺母,要把彈簧底板安裝在支撐結(jié)構(gòu)上并用墊片找平,確保底板上表面處在同一平面,此平面誤差一定要控制在5mm范圍內(nèi)。
1.4、彈簧的安裝
把彈簧橡膠墊圈安裝在底板突起的管上,再把彈簧安裝在底板上。利用吊索連接起重吊耳并吊起篩子,調(diào)整吊索以防止篩子扭歪,確保篩子處于預(yù)定的安裝角度。定位篩子,不得用手調(diào)整彈簧位置,應(yīng)使用適宜工具夾住彈簧,把篩子落到彈簧上。
1.5、彈簧高度的檢查
要檢查振動(dòng)篩各側(cè)的彈簧高度差要處在4mm范圍內(nèi),根據(jù)要求,運(yùn)用在彈簧底板下的墊片進(jìn)行調(diào)整并檢查確認(rèn)彈簧的垂直度是否在5mm范圍內(nèi)。
1.6、靜態(tài)間隙
檢查一切靜態(tài)工作間隙都要滿(mǎn)足安裝圖要求。篩子和可能與其接觸的所有物體的間隙為:上下和前后為75mm,左右為50mm。不然,在篩子運(yùn)行或停機(jī)時(shí)就可能出現(xiàn)碰撞,導(dǎo)致對(duì)篩子的損壞。
1.7、激振器的校準(zhǔn)
通過(guò)下方式實(shí)現(xiàn)兩個(gè)激振器裝置的校準(zhǔn),即固定一個(gè)激振器裝置的擺塊以避免轉(zhuǎn)動(dòng),然后,旋轉(zhuǎn)另一個(gè)激振器裝置,直到兩個(gè)激振器裝置的擺塊取向完全相同為止。
特別要主義的是:若激振器裝置在未校準(zhǔn)狀態(tài)下操作,振動(dòng)篩可能出現(xiàn)突發(fā)性故障。
(1)安裝激振器配重塊
一是清潔擺塊孔和配重塊(包括定位銷(xiāo)孔),做到無(wú)油漆、銹斑或污物。
二是檢查定位銷(xiāo)孔并保證該孔是空的(即該孔中無(wú)銷(xiāo)子)。
三是用二硫化鉬膏涂抹擺塊孔和配重塊。
四是把配重塊裝入擺塊孔,校準(zhǔn)定位銷(xiāo)孔與擺塊的固定銷(xiāo)孔處于一條直線(xiàn)上。
五是利用沖壓裝置把固定銷(xiāo)壓至擺塊表面之下的一點(diǎn)。不能把固定銷(xiāo)完全壓入配重塊。
警告:未經(jīng)制造常見(jiàn)書(shū)面同意,不可改變篩子的運(yùn)行速度或配重塊設(shè)定。篩子運(yùn)行速度不正確或配重塊設(shè)定不正確都可能造成設(shè)備的損壞。
(2)激振器
一是提供給用戶(hù)的激振器不帶有油,所以,使用前要添加不同型號(hào)的激振器添加的油量是不同的,每種型號(hào)的激振器添加的油量是不同的,每種型號(hào)的激振器配備了各自的油尺,添加油要按照手冊(cè)中規(guī)定的油牌號(hào)和油尺的測(cè)量值來(lái)添加。
二是本激振器采用飛濺,帶有內(nèi)部拋油環(huán)、油氈密封和外部迷宮式密封件,后者內(nèi)有原裝的脂。新的激振器可以從迷宮式密封件中脫出脂,而這不是故障,它無(wú)需重新注入脂。
1.8、安裝皮帶驅(qū)動(dòng)裝置
V型皮帶若受到過(guò)多油污影響,受到某些切削液或橡膠溶劑的影響,可能發(fā)生膨脹或軟化。正確地張緊“V”形皮帶非常重要,在調(diào)整皮帶張緊程度時(shí),要利用Fenner皮帶拉力計(jì),在皮帶中段施加65N的力時(shí)造成的偏斜為10mm。在現(xiàn)場(chǎng)通常用手施加5-6kg的力,引起10mm的偏移。
2、常見(jiàn)故障處理
2.1、新激振器在開(kāi)始使用時(shí)發(fā)生甩黃油的現(xiàn)象。新激振器在開(kāi)始使用時(shí)發(fā)生脫脂甩黃油現(xiàn)象是正常的,能夠正常使用,不可試圖給激振器重新補(bǔ)充黃油。
2.2、加油后發(fā)生漏油現(xiàn)象
這有兩種可能,一是密封損壞導(dǎo)致漏油;二是未按照制造廠(chǎng)家的規(guī)定加油,導(dǎo)致油位過(guò)高,發(fā)生漏油現(xiàn)象,通常通過(guò)底部排油塞放油,直到達(dá)到加油制度規(guī)定的油位標(biāo)準(zhǔn)。
2.3、激振器過(guò)熱或發(fā)生“抱死”現(xiàn)象。
(1)未按規(guī)定要求加油,油位過(guò)低,導(dǎo)致溫度升高,軸承的長(zhǎng)期缺油運(yùn)轉(zhuǎn)會(huì)損壞軸承甚至發(fā)生“抱死”現(xiàn)象。
(2)未按規(guī)定要求使用規(guī)定品牌和牌號(hào)的油造成的。
(3)未按規(guī)定要求按時(shí)更換油,只是補(bǔ)充油,造成油中的雜質(zhì)不能排出,損壞油膜,導(dǎo)致軸承損壞出現(xiàn)高溫。
(4)加油時(shí)未清理注油口,導(dǎo)致一些雜質(zhì)進(jìn)入激振器油中,長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行可能損壞軸承。
2.4、在運(yùn)行期間的V型皮帶發(fā)生抖動(dòng)現(xiàn)象。
通常是由于皮帶張緊不正確造成的,主要出現(xiàn)在長(zhǎng)中心距驅(qū)動(dòng)條件下,通過(guò)調(diào)整電機(jī)皮帶輪與副軸皮帶輪之間的距離張緊皮帶。
2.5、皮帶使用壽命短
在安裝時(shí)要校準(zhǔn)皮帶輪,確保兩個(gè)皮帶輪的端面在一個(gè)水平面內(nèi),不然皮帶側(cè)邊磨損較快,大大縮短皮帶使用壽命,同時(shí)若皮帶過(guò)緊會(huì)使皮帶過(guò)熱,減少皮帶的使用壽命。
2.6、激振器的轉(zhuǎn)速降低
激振器的轉(zhuǎn)速降低可能是由于皮帶過(guò)松,出現(xiàn)丟轉(zhuǎn)的結(jié)果。
2.7、篩子運(yùn)行中有側(cè)擺現(xiàn)象
導(dǎo)致篩子側(cè)擺現(xiàn)象的原因一般是由于激振器的相位不同步。要重新檢查兩邊激振器的相位,使它們保持一致。
2.8、篩子入料端有異常聲音。
檢查篩子的大料端后背板是否有裂紋,主要是由于后背出現(xiàn)長(zhǎng)裂縫產(chǎn)生的。激振器的聲音是否變大或異常。
若激振器在正常使用中聲音越來(lái)越大或發(fā)生異常的聲音,可能是由于激振器的軸承出現(xiàn)了問(wèn)題,則要停止運(yùn)行,更換激振器。
2.9、更換彈簧
若發(fā)生一組彈簧中有一根發(fā)生斷裂現(xiàn)象,則需要更換這一組彈簧,而不應(yīng)單單更換此根折的彈簧?,F(xiàn)場(chǎng)出現(xiàn)物料在某處運(yùn)行緩慢或不走料,或發(fā)生掉篩板的情況。發(fā)生以上情況后,應(yīng)注意及時(shí)檢查附近的橫梁,查看是否在某處出現(xiàn)了斷裂。
P鍵詞:富有機(jī)硒菌;菌種鑒定;枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)
中圖分類(lèi)號(hào):Q939.99 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2016)24-6389-06
DOI:10.14088/ki.issn0439-8114.2016.24.018
硒是人體必需的微量元素之一,必須通過(guò)飲食獲取,硒廣泛分布于機(jī)體的各組織器官、體液中,在腎中濃度最高。硒在人體內(nèi)總量為14~20 mg,具有抗氧化作用(抗輻射、抗炎、抗衰老)、提高免疫功能(抗病毒)、抗癌、維持甲狀腺正常功能、促進(jìn)生殖作用、拮抗重金屬、抗糖尿病、抗高血壓、保護(hù)肝臟、參與蛋白質(zhì)和酶及輔酶的合成等功效,可預(yù)防克山病、大骨節(jié)病、心血管病、癌癥、糖尿病等40多種疾病[1-5],與人體健康息息相關(guān),。
由于硒不能在人體長(zhǎng)期儲(chǔ)存,面對(duì)人體內(nèi)硒的不斷流失和攝入不足,機(jī)體必須不斷從飲食中獲得足量的硒,才能維持硒在身體內(nèi)的平衡。硒濃度的平衡對(duì)許多器官、組織的生理功能有著重要的保護(hù)和促進(jìn)作用。目前許多對(duì)疾病的化學(xué)干預(yù)試驗(yàn)已證明硒蛋白在一些重大疾病防治中具有重要作用[6]。
全世界有40多個(gè)國(guó)家和地區(qū)屬于缺硒地區(qū)。中國(guó)存在一條從東北三省斜穿至云貴高原的低硒帶,導(dǎo)致占國(guó)土面積72%的地區(qū)屬低硒地區(qū),其中缺硒區(qū)占43%,嚴(yán)重缺硒地區(qū)占29%,糧食等天然食物硒含量較低,通過(guò)使用這些食物不能滿(mǎn)足人體對(duì)硒的需求[7]。中國(guó)近2/3的人缺硒或處于缺硒邊緣[8]。中國(guó)營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦硒的日攝入量不能低于60 μg,正常成人日攝入硒的安全和合適范圍為60~250 μg,且膳食硒日最高安全攝入量為400 μg[9-11]。
自然界中存在的硒元素分為無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒兩種。無(wú)機(jī)硒一般指亞硒酸鈉和硒酸鈉等;有機(jī)硒是通過(guò)生物轉(zhuǎn)化使硒與生物體內(nèi)有機(jī)物質(zhì)結(jié)合而成,一般以硒蛋白、硒氨基酸、硒多糖、硒核酸[12-14]等形式存在。二者都可以被動(dòng)物吸收利用,但與無(wú)機(jī)硒相比,有機(jī)硒具有使用較安全、吸收利用率高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等優(yōu)點(diǎn)。微生物富硒發(fā)酵是利用生物資源對(duì)硒開(kāi)發(fā)的一項(xiàng)重要課題,具有廣闊的前景。硒多糖、硒蛋白、硒核酸都是易于被動(dòng)植物吸收的優(yōu)良補(bǔ)硒劑,具有良好的藥理及保健作用。
目前有機(jī)硒的獲得包括微生物轉(zhuǎn)化法、植物轉(zhuǎn)化法和動(dòng)物轉(zhuǎn)化法等[15],微生物轉(zhuǎn)化法中較多的是利用酵母[16]和乳酸菌[17]。在富硒區(qū),僅僅依靠土壤中的硒很難使農(nóng)產(chǎn)品的硒含量達(dá)到標(biāo)準(zhǔn),必須依靠外源補(bǔ)硒,即通過(guò)生物轉(zhuǎn)化來(lái)獲得有機(jī)硒含量較高的農(nóng)產(chǎn)品,但目前生產(chǎn)上多用亞硒酸鈉根外噴施來(lái)獲得富硒農(nóng)產(chǎn)品,硒的利用率不高,且轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒的效率不高,使富硒農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)硒的含量很低。因此,本研究致力于通過(guò)微生物提高有機(jī)硒轉(zhuǎn)化率,進(jìn)而為提高農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)硒含量提供參考。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 儀器與設(shè)備 智能發(fā)酵罐(鎮(zhèn)江東方生物工程設(shè)備技術(shù)公司)、超凈工作臺(tái)(蘇州隆意達(dá)凈化科技有限公司)、恒溫?fù)u床(武漢科學(xué)儀器廠(chǎng))、試管、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、酒精燈、250和500 mL三角瓶、光學(xué)顯微鏡。
1.1.2 菌種 分離得到具有高無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒能力的Ⅲ號(hào)菌種。
1.1.3 培養(yǎng)基 葡萄糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、瓊脂15~20 g、NaCl 5 g、去離子水1 000 mL,pH 7.2~7.4;明膠培養(yǎng)基:NaCl 5 g、蛋白胨10 g、牛肉膏3 g、明膠120 g,加去離子水至1 000 mL,調(diào)節(jié)pH 7.2~7.4;糖代謝檢測(cè)培養(yǎng)基:(NH4)2HPO4 1.0 g、KCl 0.2 g、MgSO4?7H2O 0.2 g、酵母膏0.2 g、瓊脂15 g、溴甲酚紫0.008 g、葡萄糖5 g(可用核糖、果糖、阿拉伯糖、木糖、甘露醇代替),加去離子水1 000 mL。
1.2 方法
1.2.1 菌種的分離篩選 采樣與樣品處理:采集湖北恩施市白楊坪的富硒煙草廢棄物,稱(chēng)取1 g樣品置于盛有99 mL無(wú)菌水的三角瓶中,充分振蕩。
分離:采用梯度稀釋分離法稀釋10-2~10-8倍,從10-6~10-8稀釋液中各取0.1 mL均勻涂抹于葡萄糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上,每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)重復(fù),30 ℃恒溫培養(yǎng)24 h后進(jìn)行觀(guān)察,挑取不同形態(tài)的單一菌落,轉(zhuǎn)接至葡萄糖牛肉膏蛋白胨平板培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),挑取分離到的菌落形態(tài)不同的5個(gè)菌株,并編號(hào)為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ,進(jìn)一步純化。
篩選:將進(jìn)一步純化得到的5個(gè)菌株進(jìn)行耐硒性檢測(cè),在葡萄糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入Na2SeO3(以Se計(jì),下同)300~700 mg/L進(jìn)行培養(yǎng),其中Ⅲ號(hào)菌株長(zhǎng)勢(shì)良好。
純化:將Ⅲ號(hào)菌株采用平板劃線(xiàn)法分離純化,涂葡萄糖牛肉膏蛋白胨平板檢驗(yàn)直至不出現(xiàn)雜菌為止。
1.2.2 菌種的擴(kuò)大培養(yǎng) 在無(wú)菌環(huán)境中,挑取兩環(huán)Ⅲ號(hào)菌株的純化菌種于葡萄糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng),30 ℃ 150 r/min培養(yǎng)6~9 h。
1.2.3 發(fā)酵培養(yǎng) 于10 L不銹鋼自控發(fā)酵罐中進(jìn)行,葡萄糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基裝料體積為發(fā)酵罐容積的70%,0.12 MPa滅菌25 min,待培養(yǎng)基溫度下降至35 ℃,接入10% Ⅲ號(hào)菌株擴(kuò)大培養(yǎng)的種子液中,并加入Na2SeO3 300~700 mg/L。
培養(yǎng)條件:設(shè)定罐壓0.04~0.05 MPa,罐溫(30±5) ℃,pH 6.0,溶氧60%~100%,攪拌速度190 r/min,發(fā)酵18~24 min得發(fā)酵培養(yǎng)液6.5 L。
1.2.4 無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒效果研究 將發(fā)酵液樣品送至湖北航天化學(xué)技術(shù)研究所分析檢測(cè)中心依據(jù)GB/T 5009.93-2003、GB/T 5009.11-2003進(jìn)行硒、總砷和無(wú)機(jī)砷的測(cè)定,依據(jù)GB/T23942-2009化學(xué)試劑 電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法通則,采用等離子體原子發(fā)射光譜儀檢測(cè)分析發(fā)酵液有機(jī)硒含量,參照杭州市農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范DB3301消解無(wú)機(jī)硒的方法處理樣品,測(cè)定無(wú)機(jī)硒??偽蜔o(wú)機(jī)硒的差值為有機(jī)硒含量,若未檢出無(wú)機(jī)硒,則總硒即為有機(jī)硒。
1.2.5 Ⅲ號(hào)菌株的初步鑒定 以《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》為指導(dǎo),參考《一般細(xì)菌常用鑒定方法》、《中華人民共和國(guó)藥典》2015版四部9204微生物鑒定指導(dǎo)原則,對(duì)微生物的生理生化性質(zhì)進(jìn)行分析,判定出該微生物的種屬關(guān)系。
1)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀(guān)察:取純化的試管斜面,用10 mL無(wú)菌水沖洗斜面,獲得菌種懸液。吸取稀釋后的菌液,進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢,觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)。
2)菌落觀(guān)察:取純化的試管斜面,用10 mL無(wú)菌水沖洗斜面,獲得菌種懸液。用濃度梯度稀釋法,將菌懸液稀釋后涂布到平板培養(yǎng)基上,30 ℃培養(yǎng)24 h形成單菌落,對(duì)菌落進(jìn)行觀(guān)察。
3)硝酸鹽還原性檢測(cè):將分離純化的Ⅲ號(hào)菌株接種于硝酸鹽培養(yǎng)基中,30 ℃培養(yǎng)1~4 d。將甲(氨基苯磺酸0.8 g,5 mol/L醋酸100 mL)、乙(α-萘胺0.5 g,5 mol/L醋酸100 mL)等量混合液(用時(shí)混合)0.1 mL加于試管內(nèi),以一支未接種細(xì)菌的培養(yǎng)基作為對(duì)照。出現(xiàn)紅色反應(yīng)則為陽(yáng)性,否則為陰性;若對(duì)照管為陰性,試驗(yàn)管為陽(yáng)性,則檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性;若對(duì)照管和試驗(yàn)管均為陽(yáng)性,則檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性。
4)運(yùn)動(dòng)性檢查:用解剖針穿刺接種分離純化得到的微生物于葡萄糖牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基內(nèi)。30 ℃,恒溫培養(yǎng)48 h,將培養(yǎng)后的培養(yǎng)皿對(duì)透射光目測(cè)。微生物只生長(zhǎng)在穿刺線(xiàn)上,邊緣十分清晰,則表示該菌種無(wú)運(yùn)動(dòng)性;若生長(zhǎng)物不僅生長(zhǎng)在穿刺線(xiàn)上且向四周呈云霧狀擴(kuò)散,或穿刺線(xiàn)上生長(zhǎng)物很少,從穿刺線(xiàn)表面向下滲入有生長(zhǎng)物,則表示該菌種有運(yùn)動(dòng)性。
5)接觸酶檢測(cè):用解剖針挑取培養(yǎng)好的單菌落,涂抹于滴有一滴3%過(guò)氧化氫的載玻片上,如果氣泡產(chǎn)生則為陽(yáng)性,若沒(méi)有氣泡產(chǎn)生則為陰性。
6)明膠液化檢測(cè):挑取生長(zhǎng)良好、大小適中的菌落針刺接種于明膠培養(yǎng)基,另取兩支空白培養(yǎng)基試管斜面,用無(wú)菌解剖針穿刺。22 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔1 d觀(guān)察試管斜面菌落生長(zhǎng)狀況和明膠液化程度。若有明顯菌落生長(zhǎng)且培養(yǎng)基無(wú)明顯凹陷或液化,則為陰性;若無(wú)菌落生長(zhǎng),明膠凝塊部分或全部變?yōu)榭闪鲃?dòng)的液體,則為假陽(yáng)性;若有菌落生長(zhǎng),且明膠有明顯液化或凹陷,則為陽(yáng)性。
7)糖代謝檢測(cè)和產(chǎn)酸檢測(cè):將分離純化的試管菌種分別接種到加有不同糖類(lèi)的糖代謝培養(yǎng)基中,觀(guān)察微生物生長(zhǎng)狀況和指示劑顏色反應(yīng)。若微生物正常生長(zhǎng)且指示劑變色,則可以判定該微生物顆粒利用此種糖類(lèi),且該微生物產(chǎn)酸。
8)Ⅲ號(hào)菌種的16S rRNA序列同源性及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析:將Ⅲ號(hào)純化試管菌種送往中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)測(cè)序,并將核酸序列檢測(cè)結(jié)果通過(guò)NCBI進(jìn)行BLAST-nucleotide分析,并進(jìn)行16S rRNA序列同源性比對(duì),選取與其同源性較高的基因序列,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),確定其種屬關(guān)系。
1.2.6 水稻中有機(jī)硒含量的測(cè)定 將富硒發(fā)酵液梯度稀釋后對(duì)水稻根外噴施,對(duì)水稻植株及大米中硒含量進(jìn)行檢測(cè),分析水稻植株對(duì)硒的利用率及大米中的有機(jī)硒含量。
2 結(jié)果與分析
2.1 菌株SE201412形態(tài)學(xué)特征
通過(guò)觀(guān)察,革蘭氏染色為紫色,即陽(yáng)性菌,菌株形態(tài)特征為桿狀,芽孢直徑小于1 μm,且菌體不膨大,鞭毛側(cè)生,符合芽孢桿菌形態(tài)特征(圖1)。通過(guò)菌株平板菌落形態(tài)觀(guān)察,該菌落表面粗糙不透明,污白色(圖2)。
2.2 生理生化特征
Ⅲ號(hào)菌生理生化特征的檢測(cè)項(xiàng)目及結(jié)果如表1所示,具體分析如下。
2.2.1 硝酸鹽還原性檢測(cè) 在試驗(yàn)管中加入混合液3 min后顏色開(kāi)始變化,8 min后紅色變化明顯為陽(yáng)性,對(duì)照管顏色始K無(wú)變化,為陰性,故檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。即該菌種可以將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽。表明該微生物具有硝酸鹽代謝途徑,符合枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)生化特點(diǎn)。
2.2.2 運(yùn)動(dòng)性檢查 培養(yǎng)48 h后對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行透射光目測(cè)。發(fā)現(xiàn)微生物不僅生長(zhǎng)在穿刺線(xiàn)上,穿刺線(xiàn)邊緣不清晰,穿刺線(xiàn)四周也有明顯菌落生長(zhǎng)。部分穿刺線(xiàn)周?chē)霈F(xiàn)霧狀菌落,有沿著穿刺線(xiàn)表面向下生長(zhǎng)的狀況。表明該菌種有運(yùn)動(dòng)性,符合枯草芽孢桿菌特性。
2.2.3 接觸酶檢測(cè) 用解剖針挑取培養(yǎng)24 h的單菌落,涂抹于滴有一滴3%過(guò)氧化氫的載玻片上,有少許氣泡產(chǎn)生,接觸酶檢測(cè)呈陽(yáng)性。
2.2.4 明膠液化檢測(cè) 該菌株在22 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天開(kāi)始出現(xiàn)明顯菌落。第三天菌落處出現(xiàn)培養(yǎng)基凹陷。培養(yǎng)觀(guān)察7 d后,培養(yǎng)基液化達(dá)到1 cm,明膠液化呈陽(yáng)性。表明該微生物具有蛋白酶活性,具有枯草芽孢桿菌明膠液化代謝特點(diǎn)。
關(guān)鍵詞 尿沉渣自動(dòng)分析儀 干化學(xué)分析 顯微鏡檢查 篩選標(biāo)準(zhǔn)
尿沉渣分析儀和干化學(xué)檢測(cè)的使用明顯提高了工作效率,但作為過(guò)篩工具,其結(jié)果有一定的假陽(yáng)性和假陰性。為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,科學(xué)的篩選標(biāo)準(zhǔn)顯得尤為重要。筆者通過(guò)對(duì)2358例標(biāo)本的檢測(cè)及結(jié)果分析,制定了合理的UF-1000i和BW-500聯(lián)合檢測(cè)的鏡檢篩選標(biāo)準(zhǔn),并在工作中加以驗(yàn)證,現(xiàn)報(bào)告如下。
資料與方法
儀器和試劑:Sysmex公司UF-1000i尿沉渣自動(dòng)分析儀和配套原裝試劑及高、低兩種質(zhì)控品。煙臺(tái)寶威BW-500尿干化學(xué)分析儀及其配套尿11A檢測(cè)試條及標(biāo)準(zhǔn)條。Olympic雙目顯微鏡,臺(tái)式離心機(jī)。
標(biāo)本來(lái)源:我院2010年10月11~31日門(mén)診病人1239例,住院病人1119例,要求留取新鮮中段尿立即送檢。
方法:將尿液充分混勻后取尿液8ml左右于尿沉渣分析儀配套試管內(nèi)采用UF-1000i自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)先行尿沉渣自動(dòng)分析,然后使用BW500進(jìn)行尿干化學(xué)測(cè)試。另取10ml尿液于底部呈錐形的刻度離心管內(nèi)用水平離心機(jī)1200~1300轉(zhuǎn)/分離心5分鐘后棄去上清液,保留0.2ml沉渣,輕輕混勻后取0.02ml置載玻片上,用18mm×18mm蓋玻片覆蓋后鏡檢[1]。所有標(biāo)本均在2小時(shí)內(nèi)檢查完畢。UF-1000i與BW500連接于同一臺(tái)計(jì)算機(jī)進(jìn)行管理。顯微鏡檢查尿液主要有形成分正常參考值[2]為RBC:0~3個(gè)/HPF;WBC:0~5個(gè)/HPF;管型:0~偶見(jiàn)/LPF;真菌:陰性。顯微鏡鏡檢結(jié)果超出此范圍者為鏡檢陽(yáng)性。尿沉渣自動(dòng)分析正常值[3]為:紅細(xì)胞:0~27/μl,白細(xì)胞0~36/μl,管型0~1/μl,真菌:陰性,超出此范圍者為陽(yáng)性。
篩選標(biāo)準(zhǔn)的制定:根據(jù)尿沉渣關(guān)鍵參數(shù)RBC(紅細(xì)胞)、WBC(白細(xì)胞)、CAST(管型)、類(lèi)酵母菌和干化學(xué)分析的ERY(隱血)、LEU(白細(xì)胞)、Pr(蛋白)的結(jié)果,按項(xiàng)目匹配原則對(duì)結(jié)果進(jìn)行排列組合形成11種組合。以顯微鏡檢查為標(biāo)準(zhǔn),對(duì)11種組合進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,根據(jù)每種組合的符合率判斷該組合是否被采納為篩選標(biāo)準(zhǔn)。
結(jié) 果
2358例標(biāo)本經(jīng)UF-1000i和BW-500聯(lián)合檢測(cè),陽(yáng)性1391例,其中沉渣分析儀結(jié)果陽(yáng)性1082例,干化學(xué)陽(yáng)性834例,二者均陰性967例。
11個(gè)組合與顯微鏡檢查結(jié)果比較,見(jiàn)表1。表1顯示,組合1、2、5、7的符合率比較理想,故將組合3、4、6、8、9、10、11定為篩選標(biāo)準(zhǔn)。在此7條篩選標(biāo)準(zhǔn)下,2358例標(biāo)本的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果,見(jiàn)表2。
經(jīng)過(guò)后期500例標(biāo)本驗(yàn)證,鏡檢率為17.20%,假陰性為2.40%。
討 論
從尿液分析質(zhì)量要求來(lái)講,每一份標(biāo)本均應(yīng)進(jìn)行顯微鏡檢查,但工作人員的不足和標(biāo)本的大量集中導(dǎo)致此項(xiàng)工作難以完成,此時(shí)高質(zhì)量高效率的顯微鏡檢查篩選標(biāo)準(zhǔn)便顯得尤為重要。中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)1995年會(huì)議認(rèn)為尿液干化學(xué)檢查結(jié)果為白細(xì)胞、紅細(xì)胞、亞硝酸鹽、蛋白四項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)為陰性時(shí),可視為尿內(nèi)有形成分大致在正常范圍內(nèi),可免除鏡檢,直接報(bào)告尿液內(nèi)有形成分大致在正常范圍內(nèi)。此方法在臨床工作中起到了一定的作用,但干化學(xué)反應(yīng)易受氧化還原物質(zhì)、藥物等諸多因素的影響而出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性現(xiàn)象[4]臨床導(dǎo)致誤診漏診,實(shí)驗(yàn)室的鏡檢率也較高。以此為標(biāo)準(zhǔn),本實(shí)驗(yàn)室鏡檢率為35.37%。
UF-1000i采用流式細(xì)胞儀的原理并使用2種含多次甲基熒光染料的染色試劑分別染色尿液顆粒和細(xì)菌,通過(guò)檢測(cè)各成分的散射光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度對(duì)尿內(nèi)有形成分進(jìn)行分析。中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)分會(huì)2009年滿(mǎn)洲里會(huì)議就尿液有形成分檢查方法達(dá)成共識(shí)認(rèn)為流式細(xì)胞術(shù)法作為篩選手段,假陽(yáng)(陰)性較低,較干化學(xué)有明顯的優(yōu)勢(shì)。但由于尿中有形成分大小形態(tài)多變導(dǎo)致各成分的散射光強(qiáng)度和熒光強(qiáng)度互相交叉而產(chǎn)生一定的假陽(yáng)性。同時(shí)UF系列每次檢測(cè)標(biāo)本量相當(dāng)于50個(gè)高倍視野,其結(jié)果較顯微鏡檢查更為敏感[5],曲明亮等亦報(bào)道UF-1000i檢測(cè)尿紅細(xì)胞敏感性高于顯微鏡檢查[6]。本文表1顯示UF-1000i檢測(cè)尿有形成分的假陽(yáng)性由高到低分別為管型(256/359)、類(lèi)酵母菌(53/86)和紅細(xì)胞(73/490),且作者發(fā)現(xiàn)細(xì)菌、結(jié)晶、紅細(xì)胞、類(lèi)酵母菌、可互相干擾導(dǎo)致結(jié)果假陽(yáng)性。若以該儀器的陽(yáng)性結(jié)果作為顯微鏡檢查篩選標(biāo)準(zhǔn),本實(shí)驗(yàn)室的鏡檢率高達(dá)45.89%。因此,根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室特點(diǎn),作者將干化學(xué)和尿沉渣自動(dòng)分析結(jié)合起來(lái)制定適合于本實(shí)驗(yàn)室的顯微鏡檢查篩選標(biāo)準(zhǔn),最大限度的降低假陽(yáng)性和假陰性,減少了鏡檢率,并經(jīng)驗(yàn)證假陰性率
參考文獻(xiàn)
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表1 2358例標(biāo)本統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果[例(%)]
輪到網(wǎng)申時(shí),他們聽(tīng)往屆的師兄師姐說(shuō),即使是經(jīng)濟(jì)學(xué)這樣的關(guān)鍵詞也不受知名銀行看好,要填寫(xiě)金融學(xué)這樣的關(guān)鍵字段才行。后來(lái),楊欣靈機(jī)一動(dòng),將專(zhuān)業(yè)一欄填寫(xiě)為公共經(jīng)濟(jì)學(xué)(非金融專(zhuān)業(yè)),結(jié)果成功通過(guò)了網(wǎng)申的電子簡(jiǎn)歷篩選。由于綜合素質(zhì)很好,又成功通過(guò)了面試,順利進(jìn)入一家知名跨國(guó)銀行的投行部工作。而楊欣的8個(gè)同門(mén)師兄弟則沒(méi)有一個(gè)經(jīng)過(guò)銀行的簡(jiǎn)歷關(guān)。后來(lái),在一次和公司HR同事的面談中,HR告訴楊欣,其實(shí)財(cái)政學(xué)跟金融學(xué)是觸類(lèi)旁通的,但由于競(jìng)爭(zhēng)者眾多,銀行通常不會(huì)將財(cái)政學(xué)專(zhuān)業(yè)作為考慮對(duì)象。
近年來(lái),求職網(wǎng)絡(luò)申請(qǐng)逐漸普及。一些公司雖然也接收紙質(zhì)簡(jiǎn)歷,但還是要求求職者也同時(shí)提供電子簡(jiǎn)歷。電子簡(jiǎn)歷作為求職的第一關(guān),事關(guān)能否取得筆試和面試機(jī)會(huì),顯得相當(dāng)重要。為此,本報(bào)專(zhuān)訪(fǎng)了某大型跨國(guó)銀行集團(tuán)人力資源經(jīng)理Alan,為廣大求職者提供一些網(wǎng)申建議。
填出關(guān)鍵字段才能成功突圍
Alan認(rèn)為整個(gè)網(wǎng)申過(guò)程中,最重要的就是填寫(xiě)關(guān)鍵字段。如果申請(qǐng)人不能填寫(xiě)出申請(qǐng)企業(yè)HR設(shè)置的那幾個(gè)備選關(guān)鍵字段,簡(jiǎn)歷進(jìn)入人工篩選環(huán)節(jié)的機(jī)會(huì)就非常小。其中,學(xué)校、專(zhuān)業(yè)、學(xué)位、英語(yǔ)水平這幾欄的關(guān)鍵字段填寫(xiě)最關(guān)鍵。一般而言,大企業(yè)不會(huì)考慮國(guó)家211項(xiàng)目以外的學(xué)校,也不會(huì)考慮與職位不相關(guān)的專(zhuān)業(yè)。英語(yǔ)水平一般都是填寫(xiě)考過(guò)哪些證,比如CET6、大學(xué)英語(yǔ)六級(jí)、托福、GRE這些字段才能被電腦系統(tǒng)識(shí)別,填寫(xiě)口語(yǔ)流利、寫(xiě)作快速流暢這些字段是無(wú)用的。
網(wǎng)申時(shí)很多關(guān)于求職者資質(zhì)的問(wèn)題是以選項(xiàng)的形式給出的,大多數(shù)選項(xiàng)都是以是或否的形式給出,考生必須集中注意力選擇。每次網(wǎng)申過(guò)后,HR都能從失敗的簡(jiǎn)歷中發(fā)現(xiàn)大量由于求職者粗心點(diǎn)錯(cuò)選項(xiàng)而被淘汰的例子,但是HR并不會(huì)因?yàn)榍舐氄叩膬?yōu)秀而網(wǎng)開(kāi)一面,因?yàn)榻鹑跈C(jī)構(gòu)是不允許粗心的。
時(shí)間有限可用萬(wàn)能簡(jiǎn)歷剪貼
外企的網(wǎng)申問(wèn)題大多是類(lèi)似的,比如,What are your great strengths?和 What are your salary expectations? 等等,所以準(zhǔn)備一個(gè)萬(wàn)能簡(jiǎn)歷是很有必要的,針對(duì)具體企業(yè)的申請(qǐng),只需要稍加修改萬(wàn)能模板就可以應(yīng)付。而且,現(xiàn)在不少公司的網(wǎng)絡(luò)申請(qǐng)都是限時(shí)的,如果不能在規(guī)定時(shí)間答完問(wèn)題,留給HR的印象會(huì)減分。
Alan提醒,在開(kāi)放式問(wèn)題中,電腦會(huì)計(jì)算該欄的英文字段數(shù)量,填寫(xiě)越多的英文,網(wǎng)申成功率越高。所以預(yù)先針對(duì)這些常見(jiàn)問(wèn)題做好標(biāo)準(zhǔn)答案,用剪貼板剪貼就非常必要。一邊答題要一邊保存,還要開(kāi)啟拼寫(xiě)檢查功能,避免出現(xiàn)任何拼寫(xiě)錯(cuò)誤。
孫女士介紹說(shuō),在篩選簡(jiǎn)歷的時(shí)候,通常在一個(gè)簡(jiǎn)歷上最多用30秒鐘時(shí)間,如果沒(méi)有一個(gè)脈絡(luò)清晰、信息準(zhǔn)確的簡(jiǎn)歷,要脫穎而出,確實(shí)是很難的。
按照她的經(jīng)驗(yàn),那種“一目了然”、“用一張紙就能把自己的特點(diǎn)描述清楚”的簡(jiǎn)歷是最受歡迎的。而那些把簡(jiǎn)歷寫(xiě)成“我的前半生”式的淘汰的幾率也最大。那究竟什么才算做是一份“一目了然”的簡(jiǎn)歷呢?孫女士表示,這樣的簡(jiǎn)歷要滿(mǎn)足一個(gè)最基本的要求——目標(biāo)明確、有的放矢。
1.在申請(qǐng)大公司的職位時(shí),一定要在簡(jiǎn)歷最醒目處,明確表述清楚自己希望工作的“目標(biāo)城市”、“目標(biāo)部門(mén)”以及“目標(biāo)崗位”。
2.在分析了招聘職位的要求后,明確分析自己是否具備該職位所必須的各項(xiàng)能力。并緊緊依據(jù)職位的要求,來(lái)給出你認(rèn)為自己稱(chēng)職的幾點(diǎn)理由。
3.你所參加的實(shí)踐、項(xiàng)目以及自己寫(xiě)的論文等不要全部寫(xiě)出來(lái),只需描述與應(yīng)聘職位要求所相關(guān)的經(jīng)驗(yàn)、經(jīng)歷就可以了。
4.如果用人單位收非電子版本簡(jiǎn)歷的話(huà),應(yīng)聘者最好提供中文、英文簡(jiǎn)歷各一份。如果是在線(xiàn)給用人單位發(fā)送簡(jiǎn)歷的話(huà),一般無(wú)法提供完整的英文簡(jiǎn)歷。遇到這種情況,應(yīng)聘者也不要急,只需要按照在線(xiàn)要求一一填寫(xiě)就行了。因?yàn)?,大的外資公司,初步的簡(jiǎn)歷篩選一般只由中方員工完成,當(dāng)通知面試時(shí)再帶去一份英文的簡(jiǎn)歷就可以了,而且一般公司的外方管理者從第一輪面試時(shí)才參與人才的選拔工作。
5.一份“一目了然”的簡(jiǎn)歷,一定是把應(yīng)聘者的最大特點(diǎn)放在簡(jiǎn)歷的前面突出的位置,千萬(wàn)不要讓篩選簡(jiǎn)歷的人,從你的簡(jiǎn)歷里挑選、尋找。這樣的簡(jiǎn)歷也是被淘汰的對(duì)象。
6.填寫(xiě)學(xué)歷時(shí),切記要把最高學(xué)歷放在最前面,用倒敘的手法來(lái)寫(xiě)。
面試時(shí)再提供證書(shū)
談到很多學(xué)生在第一輪遞簡(jiǎn)歷時(shí)就附加很多證書(shū)的現(xiàn)象,孫女士提醒說(shuō),千萬(wàn)不要這樣做。也無(wú)須這樣做。一份厚重的簡(jiǎn)歷只會(huì)讓簡(jiǎn)歷篩選者生厭。所以,最好不要在第一份簡(jiǎn)歷后,附加各種證書(shū)。孫女士分析說(shuō),其實(shí)公司人力資源部門(mén),以及招聘部門(mén)負(fù)責(zé)人,在第一輪篩選簡(jiǎn)歷時(shí),幾乎不會(huì)花時(shí)間去看簡(jiǎn)歷后附的內(nèi)容。
最好的做法是:在用人單位通知你參加筆試、面試時(shí),才提交你那些與申請(qǐng)職位相關(guān)聯(lián)的證書(shū),而且必須是如實(shí)提供相關(guān)證書(shū)。
以下是小編收集整理的《簡(jiǎn)歷的制作原則》全部?jī)?nèi)容,希望對(duì)大家有所幫助。如果您喜歡小編的推薦,請(qǐng)繼續(xù)關(guān)注。,給你不一樣的人生。
求職是現(xiàn)在所有待業(yè)者非常在意的一個(gè)問(wèn)題,而求職是一個(gè)過(guò)程,求職者要能在每一個(gè)環(huán)節(jié)中做好,才能順利的求職成功。比如說(shuō)個(gè)人簡(jiǎn)歷就是其中一個(gè)非常重要的環(huán)節(jié),它是求職的敲門(mén)磚,在求職中個(gè)人簡(jiǎn)歷要經(jīng)常替換,有針對(duì)的來(lái)寫(xiě)。此外,在個(gè)人簡(jiǎn)歷中就還有一些求職者必須要知道的一些寫(xiě)作原則。
1,清晰原則個(gè)人簡(jiǎn)歷的清晰原則主要體現(xiàn)在兩個(gè)方面,一方面是的寫(xiě)作的條理性要清晰,用人單位在篩選個(gè)人簡(jiǎn)歷的時(shí)候,一般都會(huì)跟隨著你寫(xiě)的條理來(lái)看。條理越是清晰則就也是便利對(duì)方的閱讀,進(jìn)而也可以給對(duì)方 留下一個(gè)好的印象。另一方面就是排版于印刷上,個(gè)人簡(jiǎn)歷要有閱讀性,不僅僅是體現(xiàn)在內(nèi)容上,其個(gè)人簡(jiǎn)歷本身也非常重要。
2,十秒原則什么是個(gè)人簡(jiǎn)歷的十秒原則?這個(gè)主要是針對(duì)HR閱讀個(gè)人簡(jiǎn)歷而來(lái),眾所周知的HR在篩選個(gè)人簡(jiǎn)歷的時(shí)候,一般都是快速的瀏覽,一般來(lái)說(shuō)其流連的時(shí)間也就在十秒左右。因此,當(dāng)你在寫(xiě)個(gè)人簡(jiǎn)歷之后,也要試著瀏覽一下,要保證你的個(gè)人簡(jiǎn)歷在十秒內(nèi)可以看完。