公務(wù)員期刊網(wǎng) 精選范文 基因工程基本原理范文

基因工程基本原理精選(九篇)

前言:一篇好文章的誕生,需要你不斷地搜集資料、整理思路,本站小編為你收集了豐富的基因工程基本原理主題范文,僅供參考,歡迎閱讀并收藏。

基因工程基本原理

第1篇:基因工程基本原理范文

關(guān)鍵詞:電力工程;超概預(yù)算;原因;控制

中圖分類號:TM7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:2095-2945(2017)20-0112-02

在電力工程體系中,成本概預(yù)算問題十分重要,其直接影響著電力工程的實(shí)施價值與社會地位,且該項(xiàng)工程具有復(fù)雜性的特點(diǎn),其涉及的范圍也比較廣,任何因素的波動,都會對電力工程的經(jīng)濟(jì)效益構(gòu)成威脅,極易導(dǎo)致超概預(yù)算問題的發(fā)生,制約著企業(yè)在電力工程建設(shè)上的經(jīng)濟(jì)效益。在電力工程項(xiàng)目執(zhí)行過程中,導(dǎo)致成本超概預(yù)算問題發(fā)生的原因很多,為從本質(zhì)上緩解超概預(yù)算問題,必須從超概預(yù)算的原因著手,采取一系列的措施來應(yīng)對此項(xiàng)問題,以將工程成本控制在一定范圍內(nèi),繼而全面提高電力工程成本控制水平。

1 電力工程成本超概預(yù)算發(fā)生的主要原因

1.1 概預(yù)算編制問題

電力工程建設(shè)需要一定的材料支撐,材料是構(gòu)成整個電力工程系統(tǒng)的重要元素,且這些材料價格會跟隨市場環(huán)境產(chǎn)生波動,工程概算書與開支數(shù)額很難一致,特別是一些主打性材料發(fā)生價格波動,就會產(chǎn)生極大的價格差額,就容易滋生超概預(yù)算問題。

1.2 設(shè)計(jì)變更問題

對于電力工程而言,工程建設(shè)之前需要開展工程設(shè)計(jì)工作,但是由于設(shè)計(jì)師未深入到施工基地的環(huán)境中進(jìn)行探查與勘測,盲目的開展設(shè)計(jì)工作,制定設(shè)計(jì)方案,但是,在后期電力工程建設(shè)之中,由于受到多種因素的影響,不得不進(jìn)行設(shè)計(jì)變更,勢必會對工程成本形成威脅,進(jìn)而引發(fā)諸多的超概預(yù)算問題,成為當(dāng)前需要注意的重要問題。一旦發(fā)生設(shè)計(jì)變更問題,部分工程量則需要變更,在此過程中會耗費(fèi)一定的人力、物力、財(cái)力等,最終會產(chǎn)生額外的費(fèi)用,進(jìn)而超出前期的概預(yù)算額度[1]。

1.3 工程審計(jì)問題

在電力工程項(xiàng)目執(zhí)行過程中,若審計(jì)不到位,會對工程成本形成威脅,成為當(dāng)前需要注意的問題[2]。在審計(jì)時,若安排不科學(xué),審計(jì)的時間過于集中,會大大加重審計(jì)人員的審計(jì)任務(wù),審計(jì)工作無法定時、保質(zhì)保量的完成,嚴(yán)禁草草了事,這樣會嚴(yán)重威脅工程審計(jì)效果,進(jìn)而影響工程取費(fèi)的基本標(biāo)準(zhǔn)。在電力工程成本部分審計(jì)時,為了盡快完成審計(jì)工作,上級部門時常會從下級部門抽調(diào)非專業(yè)性的審計(jì)人員,運(yùn)用此種方式,會讓整個審計(jì)工作流于形式,進(jìn)而會對工程審計(jì)質(zhì)量構(gòu)成影響。在審計(jì)工程結(jié)算部分時,很難在控制質(zhì)量的條件下實(shí)現(xiàn)對工程概算、設(shè)計(jì)、施工階段等的全面審計(jì),會讓成本控制工作變得更為艱難。

2 電力工程成本超概預(yù)算問題的控制措施

2.1 優(yōu)化工程概預(yù)算編制體系

為降低電力工程成本超概預(yù)算問題的發(fā)生概率,前期必須要必須做好工程概預(yù)算編制工作,這成為工程造價控制的一項(xiàng)重要內(nèi)容[3]。為及時克服浪費(fèi)、保守等問題,設(shè)計(jì)者應(yīng)及時與概預(yù)算人員展開密切聯(lián)系,充分結(jié)合設(shè)計(jì)的相關(guān)任務(wù)書來進(jìn)行投資與估算,實(shí)施技術(shù)經(jīng)濟(jì)比較,在控制質(zhì)量的條件下實(shí)現(xiàn)對電力工程成本的合理化控制,實(shí)現(xiàn)對概預(yù)算人員的素質(zhì)教育。首先,應(yīng)加強(qiáng)對概預(yù)算人員的業(yè)務(wù)培訓(xùn),定期開展學(xué)習(xí)與進(jìn)修活動,以求在后續(xù)成本超概預(yù)算上獲取更高的經(jīng)濟(jì)價值;其次,應(yīng)及時拓寬概預(yù)算人員的知識面,設(shè)定更為規(guī)范性的管理辦法、編制策略、工程標(biāo)準(zhǔn)、材料價格區(qū)間等,且在機(jī)械設(shè)備、材料價格計(jì)算上都要充分符合國家政策與法律規(guī)定,要求工作人員還要具備足夠的建筑工程學(xué)知識、電氣工程知識、機(jī)電設(shè)備金屬結(jié)構(gòu)、材料交通運(yùn)輸知識等,以求達(dá)到更為理想、科學(xué)的超概預(yù)算控制效果。新時期,開展工程概預(yù)算編制工作時,應(yīng)充分結(jié)合工程概算定額問題,意識到材料價格、機(jī)械設(shè)備價格等與定額間所形成的影響與問題,為做好材料價格區(qū)間的預(yù)測,要及時把握當(dāng)前的宏觀調(diào)控政策,了解市場行情的實(shí)際變化趨勢等,進(jìn)而把握好市場的發(fā)展走勢,科學(xué)編制超概預(yù)算方案,這會對工程成本達(dá)到一定的控制效果。

2.2 完善電力工程設(shè)計(jì)工作

對于電力工程成本控制而言,設(shè)計(jì)工作很是關(guān)鍵,其是控制成本的重要前提。因此,為降低成本超概預(yù)算問題的發(fā)生概率,應(yīng)及時完善與優(yōu)化工程設(shè)計(jì)工作,降低工程設(shè)計(jì)風(fēng)險,防止發(fā)生設(shè)計(jì)變更問題,以避免產(chǎn)生額外的支出。為應(yīng)對當(dāng)前問題,應(yīng)加強(qiáng)對工程設(shè)計(jì)的管控,制定科學(xué)、有效的設(shè)計(jì)方案,及時處理好設(shè)計(jì)招投標(biāo)問題,將技術(shù)性因素與經(jīng)濟(jì)性因素考慮其中,以達(dá)到理想的超概預(yù)算效果。選擇設(shè)計(jì)方案時,應(yīng)貨比三家,畝喔黿嵌瘸齜⑹迪侄約際蹙濟(jì)的把握,優(yōu)化設(shè)計(jì)整個環(huán)節(jié),以求最大程度上降低工程造價,進(jìn)而防止超概預(yù)算問題的發(fā)生[4]。此外,為防止設(shè)計(jì)方案變更,前期應(yīng)加強(qiáng)對設(shè)計(jì)方案的價值評估與審核,實(shí)施設(shè)計(jì)方案會審工作,對設(shè)計(jì)方案中所存在的不足與缺陷進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),以求最大程度上控制成本。為強(qiáng)化對設(shè)計(jì)方案的控制,還應(yīng)全面推行整個限額設(shè)計(jì)方案,及時約束與規(guī)范設(shè)計(jì)人員的經(jīng)濟(jì)行為,在控制電力工程質(zhì)量的基礎(chǔ)上,將整個設(shè)計(jì)方案限定在一定范圍內(nèi)。在設(shè)計(jì)額度控制上,應(yīng)充分結(jié)合工程項(xiàng)目的實(shí)況來合理分配投資額。限額設(shè)計(jì)的實(shí)施,不可一味的節(jié)約投資資源,還要遵循科學(xué)、規(guī)范、實(shí)際的理念,對整個工程進(jìn)行科學(xué)而高效的設(shè)計(jì),以求最大程度上控制設(shè)計(jì)成本。

2.3 科學(xué)規(guī)范招標(biāo)過程

實(shí)施電力工程招投標(biāo)工作時,主要涉及到設(shè)備與材料采購招投標(biāo)、施工招投標(biāo)兩個部分,建設(shè)方運(yùn)用招投標(biāo)的方式來選擇合適的材料供應(yīng)商或施工方,進(jìn)而可滿足項(xiàng)目的投資需求,還可實(shí)現(xiàn)對項(xiàng)目質(zhì)量進(jìn)度的管控,利于促進(jìn)電力工程的高效運(yùn)行。實(shí)施招標(biāo)工作時,必須要遵循公平、公正的基本原則。招標(biāo)工作開展之前,必須要對施工方、材料供應(yīng)商等的資質(zhì)進(jìn)行嚴(yán)格審查[5],還要開展實(shí)地考察工作,以防止違規(guī)投標(biāo)、轉(zhuǎn)包等情況的發(fā)生,這會對項(xiàng)目成本控制構(gòu)成嚴(yán)重威脅。相較于一般建筑安裝工程,電網(wǎng)建設(shè)對施工人員的專業(yè)技術(shù)與技能要求很高,同時,對安裝精度的要求也十分高,若在施工時出現(xiàn)小的失誤或操作差錯,會引發(fā)電網(wǎng)安全事故。

2.4 加大審計(jì)力度

為實(shí)現(xiàn)對電力工程成本的科學(xué)性控制,降低超概預(yù)算問題的發(fā)生概率,應(yīng)加大對電力工程運(yùn)行的審計(jì)力度,對工程項(xiàng)目資源實(shí)施動態(tài)化跟蹤與管理,立足于工程項(xiàng)目的前期、中期與后期,這是處理超概預(yù)算問題的一種有效途徑。項(xiàng)目實(shí)施的初期階段,應(yīng)對設(shè)備類型、概算、投資估算與設(shè)計(jì)方案等進(jìn)行全方位的審查;項(xiàng)目實(shí)施中期,也就是施工階段,應(yīng)對材料采購、進(jìn)度款撥付情況與設(shè)備購置等過程進(jìn)行跟蹤式審查與管理,以求為后期工程成本審計(jì)提供重要依據(jù)與條件。審計(jì)電網(wǎng)工程時,應(yīng)強(qiáng)化對工程量的審核,結(jié)合前期的工程量清單、合同資料等對工程量施工情況進(jìn)行比對,保證工程量核算的精準(zhǔn)性與科學(xué)性。在結(jié)算審計(jì)工作實(shí)施時,要對審核分項(xiàng)、項(xiàng)目單價、取費(fèi)流程等的科學(xué)性進(jìn)行審查。為保證審計(jì)工作質(zhì)量,還要充分結(jié)合工程項(xiàng)目的實(shí)際情況、工作量等因素,來增設(shè)審計(jì)人員,還要加大對審計(jì)人員綜合素養(yǎng)的定期培訓(xùn),及時對工作人員的審計(jì)能力進(jìn)行全面考核與測試,通過考核者才可擔(dān)任審計(jì)職務(wù),以便提高審計(jì)質(zhì)量與審計(jì)效率,為電力工程成本控制工作提供條件。

3 結(jié)束語

綜上所述,為保證供電企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益,必須從起初的電力工程建設(shè)方面著手,采取一系列的手段來控制工程成本,實(shí)現(xiàn)對工程成本資源的高效利用,成為當(dāng)前需要注意的一項(xiàng)關(guān)鍵性問題。電力工程成本概預(yù)算控制工作具有系統(tǒng)性與復(fù)雜性,其存在于電力工程運(yùn)行的各個環(huán)節(jié),可見,加強(qiáng)對每個階段概預(yù)算的控制很是關(guān)鍵。新時期,為降低供電企業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失,將有限的資源發(fā)揮出更大的經(jīng)濟(jì)價值,應(yīng)強(qiáng)化對工程建設(shè)成本的科學(xué)性控制,優(yōu)化概預(yù)算編制體系,重視設(shè)計(jì)部分控制,科學(xué)控制招標(biāo)過程與審計(jì)工作,以求最大程度上提高企業(yè)經(jīng)濟(jì)效益水平。

參考文獻(xiàn):

[1]吳保恒.電力工程成本超概預(yù)算原因及控制措施[J].通訊世界,

2014,24:246-247.

[2]莎莎.淺談電力工程成本超概預(yù)算原因及控制措施[J].經(jīng)營管理者,2015,16:313.

[3]焦鋼.電力工程成本超概預(yù)算的原因及其控制措施[J].廣東科技,2014,16:48+47.

[4]洪苗.電力工程成本超概預(yù)算原因及解決措施[J].經(jīng)營管理者,

第2篇:基因工程基本原理范文

關(guān)鍵詞:基因工程;教學(xué)改革;探索

中圖分類號:G642.41 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1674-9324(2015)03-0119-02

基因工程又稱為基因拼接或者DNA重組技術(shù),是將一種生物體(供體)的基因與載體在體外進(jìn)行拼接重組,然后轉(zhuǎn)入另一種生物體(受體)內(nèi),使之按照人們的意愿穩(wěn)定遺傳并表達(dá)出新產(chǎn)物或新性狀的DNA體外操作程序。1972年美國人Berg在基因工程基礎(chǔ)研究方面做出了突出貢獻(xiàn),被公認(rèn)為“基因工程之父”。1973年美國人Cohen等用核酸限制性內(nèi)切酶EcoRI,首次基因重組成功。近些年來,基因工程的新概念、新理論及新技術(shù)不斷涌現(xiàn),內(nèi)容也在不斷豐富與充實(shí),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的各個領(lǐng)域[1,2]。21世紀(jì)以來,基因組學(xué)已進(jìn)入功能基因組學(xué)時代,對基因功能的研究是生物技術(shù)發(fā)展的新方向,體現(xiàn)了基因工程的重要價值所在?;蚬こ虒W(xué)作為當(dāng)代生命科學(xué)研究領(lǐng)域最具生命力、最引人關(guān)注的前沿學(xué)科之一,已經(jīng)發(fā)展成為現(xiàn)代分子生物學(xué)、技術(shù)學(xué)的核心內(nèi)容,其課程質(zhì)量的好壞直接關(guān)系學(xué)生的專業(yè)素質(zhì)和創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。作者所在學(xué)院(浙江海洋學(xué)院海洋科學(xué)與技術(shù)學(xué)院)于2007年新增了生物技術(shù)專業(yè),同時開設(shè)了基因工程課程。為了不斷提高該課程的教學(xué)水平,筆者結(jié)合這幾年的教學(xué)經(jīng)驗(yàn)以及兄弟院校相關(guān)課程的授課經(jīng)驗(yàn),努力充實(shí)教學(xué)內(nèi)容,不斷更新教學(xué)手段,對基因工程課程的教學(xué)體系進(jìn)行了探索式改革。

一、教學(xué)內(nèi)容

1.不斷更新教學(xué)內(nèi)容,突出實(shí)用性。基因工程理論作為一種專業(yè)性很強(qiáng)的課程,需在學(xué)生有一定生物學(xué)知識的基礎(chǔ)上教學(xué)。在浙江海洋學(xué)院本課程于大三下學(xué)期開課,在此之前學(xué)生已修完細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)等生物學(xué)基礎(chǔ)課程,具備了較完整的理論知識體系,在此基礎(chǔ)上開展教學(xué),有利于學(xué)生對知識的理解和掌握?;蚬こ套鳛橐环N技術(shù)性很強(qiáng)的課程,與上述生物學(xué)基礎(chǔ)課程關(guān)系密切,同時與酶工程、蛋白質(zhì)工程、細(xì)胞工程等學(xué)科緊密聯(lián)系,存在一定的內(nèi)容重復(fù)。在教學(xué)過程中,對于此類重復(fù),或一筆帶過,點(diǎn)到為主,或采用實(shí)例對重要知識加以鞏固,盡量避免重復(fù),突出課程特色。教材是提高教學(xué)質(zhì)量的重要環(huán)節(jié),浙江海洋學(xué)院第一次即2010年選用的《基因工程》教材由高等教育出版社出版,孫明教授主編。該教材內(nèi)容全面翔實(shí)、章節(jié)清晰,對基因工程的原理、策略和技術(shù)方法均有系統(tǒng)介紹,具有很強(qiáng)的理論性和前瞻性。但是其內(nèi)容較多,很多內(nèi)容對于二本院校本科生來講過于深奧、難以理解,學(xué)生也反映該教材較難,建議選其他較易理解的教材。結(jié)合該院校是二本院校的實(shí)際,筆者從2011年開始使用袁鶩洲主編,化學(xué)工業(yè)出版社出版的《基因工程》,屬普通高等教育規(guī)劃教材。本教材為國家精品課程教材,主要介紹了基因工程的基本概念、基本原理、常用基因工程操作技術(shù)以及基因工程與功能基因組學(xué)相結(jié)合的技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展。主要內(nèi)容包括三大塊。一是基因工程的基本原理與基本技術(shù),包括工具酶和克隆載體。表達(dá)載體及常用的基因表達(dá)系統(tǒng),目的基因獲取、制備、擴(kuò)增、導(dǎo)入與鑒定的各種方法。二是基因工程在功能基因組學(xué)研究中的應(yīng)用,包括基因表達(dá)譜的研究技術(shù),全基因組化學(xué)誘變、轉(zhuǎn)座子飽和誘變的技術(shù),基因敲除與基因敲減的技術(shù),GAL4/UAS過表達(dá)系統(tǒng),酵母雙雜交及免疫共沉淀等蛋白質(zhì)相互作用研究的技術(shù)等。三是基因工程在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用,包括轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因動物的制備與應(yīng)用,基因治療的原理與策略以及基因工程藥物的研制與現(xiàn)狀等。該教材內(nèi)容清晰易懂,實(shí)例舉證充分,且涉及基因工程在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用,在一定程度上可以提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。使用該教材3年來,目前感覺學(xué)生反映較好,適合該校學(xué)生使用。

2.引領(lǐng)學(xué)生了解前沿動態(tài)。基因工程作為一門前沿學(xué)科,發(fā)展速度快,內(nèi)容日新月異。我們常用教材多側(cè)重原理、基礎(chǔ)等理論知識,且更新速度始終落后于基因工程技術(shù)本身的發(fā)展速度?,F(xiàn)代學(xué)生思維活躍,求知欲強(qiáng)。為了充分滿足學(xué)生的求知欲和好奇心,在基因工程教學(xué)過程中,盡可能地添加一些新成果、新理論和新技術(shù)[3],如:生物能源,基因工程疫苗的開發(fā),基因治療等,并結(jié)合自己在國外實(shí)驗(yàn)室所學(xué)向同學(xué)們展示最新技術(shù)與相關(guān)研究進(jìn)展?;蚬こ痰男录夹g(shù)多發(fā)表于Science、Nature、Cell等頂尖雜志,在教學(xué)過程中,對于發(fā)表的經(jīng)典新成果,嘗試讓學(xué)生自己閱讀、分段翻譯、小組討論,增加對新知識的了解[3]。一些重要的生命科學(xué)論壇,如:生物谷、丁香園、小木蟲等是生命科學(xué)領(lǐng)域研究人員交流學(xué)習(xí)的地方,而知識的碰撞最容易產(chǎn)生科學(xué)的火花。因此,鼓勵學(xué)生瀏覽這些論壇,并參與討論,增強(qiáng)學(xué)習(xí)興趣。另外,也鼓勵他們加入相關(guān)的QQ群,比如轉(zhuǎn)基因群、生物信息群,增加同業(yè)交流,為自己拓寬理論知識和解決實(shí)際技術(shù)問題,同時也為今后從事的相關(guān)工作打下堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

二、教學(xué)手段和教學(xué)方法多元化

不像動物學(xué)、植物學(xué)可以直觀地看到實(shí)物,基因工程內(nèi)容抽象,多涉及細(xì)胞、分子等微觀內(nèi)容,且高新技術(shù)多,操作流程長,如果僅僅采用文字和語言表述,難以講授明白,學(xué)生學(xué)起來也比較晦澀難懂[4]。因此,需要運(yùn)用多種教學(xué)方法,使概念、原理講得通俗易懂,學(xué)生理解起來就更容易。

1.多媒體教學(xué)的應(yīng)用。目前,大部分高校已廣泛采用多媒體教學(xué)。在基因工程多媒體教學(xué)過程中,改變原來單純的文字、圖片等內(nèi)容,不斷嘗試加入一些聲音、錄像、動畫等信息,使課堂圖文并茂、有聲有色、栩栩如生,便于學(xué)生理解并強(qiáng)化記憶。如在講解“PCR反應(yīng)”一節(jié)中,自己錄取了PCR的準(zhǔn)備、操作以及電泳檢測等全套過程,老師講得省心,同學(xué)們聽得舒心,極大提高了基因工程課程的教學(xué)效果。

2.小組討論式教學(xué)。有價值的討論是促進(jìn)學(xué)生開動腦筋、舉一反三、加深認(rèn)識的有效手段。在遇到抽象內(nèi)容時,講解完畢后,鼓勵學(xué)生分組討論,并選出一名組長上講臺以PPT的形式匯報(bào)本小組的學(xué)習(xí)心得,組長實(shí)行輪換制。下面的同學(xué)給匯報(bào)的小組分別從以下幾方面打分:匯報(bào)PPT的表現(xiàn),制作PPT的質(zhì)量,所講內(nèi)容的條理性、創(chuàng)新性以及講解能力。通過此手段,極大調(diào)動了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。例如,可引導(dǎo)學(xué)生討論以下專題:①轉(zhuǎn)基因動物;②中國的轉(zhuǎn)基因水稻;③基因工程產(chǎn)品的安全性;④基因治療。

三、改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)、科研項(xiàng)目與課程教學(xué)相結(jié)合

本?;蚬こ虒?shí)驗(yàn)是在大三結(jié)束后的暑假短學(xué)期開展的,共16學(xué)時,這時學(xué)生已上完基因工程理論課,具備了實(shí)驗(yàn)操作的相關(guān)理論知識。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容至關(guān)重要,是理論知識的綜合運(yùn)用。那么如何選擇實(shí)驗(yàn)內(nèi)容呢?這一點(diǎn)比較關(guān)鍵。授課教師多具有博士學(xué)位,承擔(dān)著較高水平的科學(xué)研究工作。在基因工程教學(xué)過程中,嘗試將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和教師的科研項(xiàng)目相結(jié)合,讓學(xué)生自主參與到科研項(xiàng)目的研究中。學(xué)生可根據(jù)教師的科研項(xiàng)目自主確定實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容,從實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的選擇,到實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)、試劑的購置、實(shí)驗(yàn)步驟的進(jìn)行等都由學(xué)生自主完成,老師在此過程中起指導(dǎo)作用。筆者將課題“曼氏無針烏賊微衛(wèi)星富集文庫的構(gòu)建”分解成幾個小實(shí)驗(yàn),包括PCR擴(kuò)增、瓊脂糖凝膠電泳、限制性內(nèi)切酶酶切反應(yīng)、載體連接、感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化、藍(lán)白斑篩選與鑒定、測序、序列分析和引物設(shè)計(jì)等,指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行整個流程實(shí)驗(yàn),使其知識更具有系統(tǒng)性、完整性。此外,還可鼓勵學(xué)生申報(bào)省級或校級的大學(xué)生創(chuàng)新項(xiàng)目,由筆者指導(dǎo)的“轉(zhuǎn)基因綠色熒光觀賞魚開發(fā)技術(shù)探索”以及“青魚β-actin基因的啟動子功能初步檢驗(yàn)”分別獲得省級可喜獎項(xiàng),這個實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)新能力及今后獨(dú)立從事科研的能力。

四、試探采用雙語教學(xué)

現(xiàn)代高素質(zhì)專業(yè)人才不僅要具備高水平的專業(yè)知識,還應(yīng)具備高水平的專業(yè)外語閱讀與寫作能力。為適應(yīng)學(xué)科發(fā)展趨勢,并擴(kuò)充學(xué)生的英語專業(yè)詞匯,培養(yǎng)英語思維模式,在基因工程教學(xué)過程匯總嘗試進(jìn)行雙語教學(xué)[5]。在教學(xué)上,以中文課件為主,主要的專業(yè)詞匯用英文標(biāo)注,時而用英文講解,盡量創(chuàng)造雙語教學(xué)環(huán)境。并且鼓勵學(xué)生借閱相關(guān)的英文教材,例如,在國際上使用廣泛,權(quán)威性和時代感強(qiáng)的英文教材《Principles of gene manipulation and genomics》(7th ed)作為教學(xué)參考書。

簡而言之,經(jīng)過幾年的努力工作,浙江海洋學(xué)院在基因工程課程的教學(xué)內(nèi)容方面進(jìn)行了優(yōu)化,改進(jìn)了教學(xué)方法與手段,培養(yǎng)了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力和創(chuàng)新意識,拓展了他們的知識面,取得了不錯的效果。然而,課程教學(xué)改革是一項(xiàng)系統(tǒng)工程,目前還處于探索和實(shí)踐階段,必須堅(jiān)持不斷地探索、實(shí)踐、總結(jié),最好建立一支教學(xué)團(tuán)隊(duì),希望把基因工程課程教學(xué)改革工作開展得更有效果,為國家輸送更多高素質(zhì)的專業(yè)人才。

參考文獻(xiàn):

[1]孫明.基因工程[M].北京:高等教育出版社,2006:1-6.

[2]李立家,肖庚富.基因工程[M].北京:科學(xué)出版社,2004:1-8.

[3]張傳博,李莉,耿紅衛(wèi).基因工程課程教學(xué)改進(jìn)與實(shí)踐[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,(04).

第3篇:基因工程基本原理范文

關(guān)鍵詞: 花色;基因工程;花色苷;植物色素 

利用基因工程改良花色是花卉分子育種的重要手段,不再受植物親緣關(guān)系的限制,花色改良的效果通過目測和少量輔助手段即可判斷[1]?;ㄉ帐侵参锎紊x過程中產(chǎn)生的黃酮類物質(zhì),它是花色素與糖以糖苷鍵結(jié)合而成的一類化合物,廣泛存在于植物各組織細(xì)胞的細(xì)胞液中,使植物呈現(xiàn)從紅、紫到藍(lán)等的不同顏色[2]?;ㄉ盏纳锖铣赏緩绞潜蛔顬閺V泛而深入研究的植物次生代謝途徑,特別在主要模式植物中,已經(jīng)有了清楚的認(rèn)識[3]。許多花色苷生物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因和調(diào)節(jié)基因均已經(jīng)從不同植物中克隆到[3,4]。轉(zhuǎn)基因花卉主要用于觀賞,易被公眾接受,具有傳統(tǒng)育種手段難以比擬的優(yōu)越性,必將給花色改良帶來革命性的影響,已成為當(dāng)前花卉育種研究的熱點(diǎn)。 

 

1 花色苷生物合成基因的分離和克隆 

 

植物花色苷基因工程改良遵循一般植物基因工程規(guī)律,了解特定色素生物合成途徑、克隆關(guān)鍵酶的基因是植物花色基因工程改良理論依據(jù)和前提。首先是花色苷生物合成途徑基因的克隆,第1個被分離的花色苷合成酶基因是CHS基因,它是從歐芹(Petroselinum cnispum)懸浮細(xì)胞用差異雜交分離到的[5];以后利用轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽、PCR擴(kuò)增、異源雜交、差異cDNA克隆、電子克隆、蛋白質(zhì)純化與差異篩選等方法分離克隆到了多個花色苷生物合成相關(guān)基因?;ㄉ盏纳锖铣墒菑拿Р菟岽x途徑合成苯丙氨酸和脂肪酸合成代謝合成丙二酰CoA開始,經(jīng)苯丙烷類途徑合成[6]。根據(jù)基因?qū)ㄉ丈锖铣傻淖饔每煞譃榻Y(jié)構(gòu)基因和調(diào)節(jié)基因[7]。結(jié)構(gòu)基因直接編碼花色苷生物合成途徑中的生物合成酶類,如PAL、4CL、CHS、CHI、F3H、DFR、F3′H、F3′5′H、ANS、3GT等基因;另一類是調(diào)節(jié)基因,它們調(diào)控花色苷生物合成基因的表達(dá)強(qiáng)度和模式,同時控制花色苷在時空上的變化,如AN1、AN2、JAFl3和AN11等[8]。 

 

2 基因遺傳轉(zhuǎn)化的方法 

 

基因轉(zhuǎn)化的主要方法有農(nóng)桿菌介導(dǎo)法[9]、基因槍法 [10]、花粉管導(dǎo)入法[11]、化學(xué)試劑誘導(dǎo)法[12]和電穿孔法[13]等。 

農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)化方法是迄今最可靠、最有效的轉(zhuǎn)化方法。現(xiàn)在的轉(zhuǎn)基因再生植物中,80 %以上是用這種方法獲得的,主要有葉盤轉(zhuǎn)化法、整株感染法和原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法[14]。 

基因槍法又稱微彈轟擊法,是由康乃爾大學(xué)Sanford等[10]建立的基因?qū)敕椒?,其基本原理是利用亞精胺、聚乙二醇的粘附作用將外源DNA包被在微小的金?;蜴u粒表面,然后在高壓的作用下微粒被高速射入受體細(xì)胞或組織。 

花粉管通道法最早由周光宇提出[11],其基本原則是利用開花植物授粉后形成的花粉管通道使外源DNA 沿著花粉管進(jìn)入胚囊,轉(zhuǎn)化尚不具備正常細(xì)胞壁的卵、合子或早期胚胎細(xì)胞的方法。 

化學(xué)誘導(dǎo)法[12]的主要原理就是聚乙二醇、多聚-L-鳥氨酸、磷酸鈣在pH值較高的條件下誘導(dǎo)原生質(zhì)體攝取外源DNA分子。 

電穿孔法又稱電激法,首先由Neumann提出[13],是在高壓電脈沖作用下,在新鮮分離的原生質(zhì)體的質(zhì)膜上形成可逆性的瞬間通道,從而發(fā)生外源DNA 的攝取。 

此外,還有脂質(zhì)體轉(zhuǎn)化法、低能離子束法、病毒載體轉(zhuǎn)化法、轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)法和浸泡法等。 

 

3 花色苷基因工程改良的基本策略 

 

花色苷合成由多個代謝步驟、多基因決定,所以利用基因工程改造花色苷一個重要策略就是還原法,即欲修飾某個性狀時,先要明確決定該性狀的特異生化物質(zhì),然后對形成該生化物質(zhì)的代謝途徑進(jìn)行基因工程操作。具體就是分析催化各反應(yīng)步驟的酶、編碼這些酶的基因及其表達(dá)調(diào)控[15]。多步驟的代謝途徑有限速步驟,而限速步驟對整個代謝途徑起著決定性作用,所以對限速步驟的遺傳操作往往是還原法的重要突破口。增強(qiáng)某種關(guān)鍵酶的表達(dá),往往可使花色苷合成途徑朝生成其催化產(chǎn)物的方向進(jìn)行;而抑制該酶的表達(dá),則會使反應(yīng)朝合成途徑的另一分支進(jìn)行,導(dǎo)致另一種產(chǎn)物的積累[16]。 

3.1反義抑制法 

利用基因工程技術(shù)進(jìn)行花色苷修飾的常用方法是反義抑制法,首先明確決定花色苷的特異生化物質(zhì),然后分析該生化物質(zhì)代謝途徑中催化各反應(yīng)步驟的酶,克隆編碼這些酶的基因,反向轉(zhuǎn)入到目的植株中,外源DNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與內(nèi)源的互補(bǔ)mRNA結(jié)合,而抑制目的植株中這些生化物質(zhì)的合成[17]。利用該技術(shù)已在矮牽牛[17,18]、[19-21]等幾種觀賞植物中進(jìn)行成功了花色修飾。 

3.2共抑制法 

共抑制法,又稱正義抑制法,即正向?qū)?個或幾個內(nèi)源基因的額外拷貝,反而抑制該內(nèi)源基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA的積累, 進(jìn)而抑制該內(nèi)源基因的表達(dá)[22,23]。該技術(shù)在矮牽牛[24]、[19]、藍(lán)豬耳[25]等花卉的花色修飾方面已取得成功。 

3.3導(dǎo)入調(diào)節(jié)基因 

如果植物已具色素合成結(jié)構(gòu)基因,只是因?yàn)榻M織特異性或缺乏調(diào)節(jié)基因表達(dá)產(chǎn)物的激活而不表達(dá)時,導(dǎo)入調(diào)節(jié)基因并使之適當(dāng)表達(dá)可活化特定的結(jié)構(gòu)基因, 改變花色。如Quattrocchio 等[26]將系列花色苷合成的調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)入矮牽牛,獲得紅色的愈傷組織和粉紅色花色的轉(zhuǎn)化株。Kim[27]將玉米C1基因通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)入煙草,使株花瓣變狹長,顏色顯著變淺。 

3.4導(dǎo)入新的外源基因 

Meyer等[28]首次將源自玉米的編碼DQR的A1基因?qū)氚珷颗0谆ㄍ蛔凅w中,產(chǎn)生了開磚紅色花的矮牽牛。1992年澳大利亞Calgene Pacific公司與日本Sundory公司合作向薔薇中導(dǎo)入F3′5′H基因獲得成功,同年該公司在矮牽牛中導(dǎo)入該基因獲得藍(lán)色矮牽牛[29]。此外,在花色基因工程操作中,也可以導(dǎo)入調(diào)節(jié)基因以增強(qiáng)或減弱原有代謝產(chǎn)物表達(dá),或?qū)肫渌c花成色作用有關(guān)的基因,如pH基因、輔助色素基因、細(xì)胞形狀基因等,也可以同時導(dǎo)入與某種花色有關(guān)的多種基因。

4 植物花色苷基因工程改良的安全性 

第4篇:基因工程基本原理范文

關(guān)鍵詞:基因工程;課堂教學(xué);改進(jìn);課件設(shè)計(jì)

中圖分類號:G642.41 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1674-9324(2017)03-0178-02

我國高等學(xué)校本科教育的學(xué)科分類中,生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)工程、食品科學(xué)與工程、農(nóng)業(yè)工程等專業(yè)屬下的許多課程都與基因工程技術(shù)與應(yīng)用的迅速發(fā)展息息相關(guān)。因此,基因工程越來越多地進(jìn)入高校專業(yè)主干課程行列?;蚬こ痰膬?nèi)容繁雜難學(xué),實(shí)踐性強(qiáng)[1],而且迄今為止,很多大專院校由于條件所限,未能開設(shè)配套的實(shí)驗(yàn)課程。相關(guān)教材中,絕大部分內(nèi)容也集中于理論闡述。即使教學(xué)大綱是經(jīng)過反復(fù)推敲,依據(jù)基因工程教材重要知識點(diǎn)而制定的,授課內(nèi)容也嚴(yán)格按照教學(xué)大綱亦步亦趨,還有多媒體方法輔助講授,但是,傳統(tǒng)的“填鴨式”課堂教學(xué)方式仍然被普遍采用,難以達(dá)到教書育人的目的,也不符合現(xiàn)階段我國高等教育培養(yǎng)創(chuàng)新型人才的要求,這使得教學(xué)效果從根本上無法保證。課堂教學(xué)是高校最基本的教育活動,主要由教師和學(xué)生兩方面共同承擔(dān)完成[2]。首先,為人師者應(yīng)該從教師主體出發(fā),增加教學(xué)投入[3],努力探討和思索如何在現(xiàn)有條件下改進(jìn)和完善課堂教學(xué),提高教學(xué)質(zhì)量。其次,應(yīng)最大限度地調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性和主動性,讓學(xué)生在課堂教學(xué)中能聽得懂,聽得進(jìn)。這樣,才能夠在有限而寶貴的課堂時間內(nèi),啟發(fā)學(xué)生的創(chuàng)造性思維。本文作者在多年從事基因工程教學(xué)的基礎(chǔ)上,以基因工程中“大腸桿菌轉(zhuǎn)化”知識點(diǎn)為例,說明在基因工程教學(xué)中,尤其針對技術(shù)性、實(shí)驗(yàn)性教學(xué)內(nèi)容,結(jié)合相關(guān)科研經(jīng)驗(yàn),改進(jìn)課件設(shè)計(jì)的重要性。

基因工程基本操作是該課程重要的篇章之一。基因工程重組DNA操作主要由“切”、“接”、“轉(zhuǎn)”、“增”和“檢”構(gòu)成。其中“轉(zhuǎn)”是針對原核生物的轉(zhuǎn)化(Transformation)、真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)染(Transfection)和需病毒參與的轉(zhuǎn)導(dǎo)(Transduction)等活動的統(tǒng)稱。作為基因工程七大支撐技術(shù)之一的基因轉(zhuǎn)移技術(shù)也是指“轉(zhuǎn)”操作。由此可見,“轉(zhuǎn)”為基因工程教學(xué)中的重要知識點(diǎn)之一。其中,轉(zhuǎn)化是外源DNA進(jìn)入受體細(xì)菌而獲得相應(yīng)遺傳性狀的現(xiàn)象,亦即DNA導(dǎo)入受體菌再擴(kuò)增或表達(dá)的過程。在具體章節(jié)詳細(xì)介紹原核細(xì)胞代表性基因工程實(shí)例時,也離不開大腸桿菌的“轉(zhuǎn)化”,實(shí)驗(yàn)室常用的大腸桿菌轉(zhuǎn)化方法有氯化鈣(Calcium Chloride,CaCl2)和電穿孔(Eletroporation,也叫電擊)等。CaCl2法創(chuàng)立于1972年,是適用于革蘭氏陰性細(xì)菌(如大腸桿菌等)的經(jīng)典轉(zhuǎn)化技術(shù)。它是指在低溫下,Ca2+能夠與細(xì)菌外膜磷脂形成液晶結(jié)構(gòu),然后經(jīng)熱脈沖發(fā)生收縮作用,這樣細(xì)胞膜會出現(xiàn)空隙,從而使外源DNA進(jìn)入受體菌的過程,所以CaCl2法也被稱作熱激法或者熱脈沖法。此方法的關(guān)鍵影響因素是低溫和Ca2+,它不需要電轉(zhuǎn)化設(shè)備,在實(shí)際中最為廣泛使用。因此,常常在課堂教學(xué)中作為重點(diǎn)內(nèi)容來介紹。常用的教學(xué)方法在講授此章節(jié)內(nèi)容時,采用如圖1所示的PPT或者板書機(jī)械化流程來展示大腸桿菌的標(biāo)準(zhǔn)熱激法轉(zhuǎn)化過程。這樣的教學(xué)方式,備課簡單,授課輕松,數(shù)分鐘即可完成。但常常會因?yàn)檎n堂上,講解理論知識的枯燥而難以激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,從而導(dǎo)致在短短的課堂時間里,學(xué)生的思考能力得不到鍛煉,更不用說如何牢固掌握專業(yè)的基礎(chǔ)知識了。事實(shí)上,有很多大學(xué)生在中學(xué)生物學(xué)課程學(xué)習(xí)階段已經(jīng)接觸大腸桿菌熱激法轉(zhuǎn)化的基本知識了,但進(jìn)入大學(xué)階段的基因工程課程相同知識點(diǎn)學(xué)習(xí)時,已近徹底遺忘;甚至有學(xué)生,在大學(xué)其他課程如分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)或科研實(shí)踐活動中還進(jìn)行過相關(guān)實(shí)驗(yàn),但對轉(zhuǎn)化也只留下模糊印象。這些現(xiàn)象一方面可能受到學(xué)生個體學(xué)習(xí)主動性等的影響,但另一方面不能否認(rèn)與課堂教學(xué)質(zhì)量,尤其是主導(dǎo)課堂教學(xué)的教師采取的教學(xué)方法相關(guān)。因此,針對標(biāo)準(zhǔn)熱激轉(zhuǎn)化法流程的授學(xué),我們認(rèn)真思考后,在利用教材講授理論知識的同時,還從該知識點(diǎn)出發(fā),將理論知識與科研實(shí)際結(jié)合,即與科研中已運(yùn)用普遍的快速熱激轉(zhuǎn)化法聯(lián)系起來重新設(shè)計(jì)課件,如圖2所示。當(dāng)大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)熱激法轉(zhuǎn)化流程介紹完畢時,讓學(xué)生結(jié)合熱激法轉(zhuǎn)化的基本原理,思考教師提出的相關(guān)問題。經(jīng)過逐步的啟發(fā)和剖析,只有當(dāng)學(xué)生掌握了大腸桿菌轉(zhuǎn)化的知識要點(diǎn)時,才能認(rèn)識到標(biāo)準(zhǔn)熱激法的第3至第5的三個步驟均可以省略,快速熱激法在15分鐘內(nèi)即可完成。在這樣短暫的課堂授學(xué)過程中,創(chuàng)造出能發(fā)揮學(xué)生主觀能動性的課堂學(xué)習(xí)氛圍,不僅可以幫助學(xué)生理解知識要點(diǎn),還增加了課堂上教師與學(xué)生的互動,活躍了課堂氣氛,開啟了學(xué)生思考的閘門,拓展了學(xué)生思維的空間,鍛煉了學(xué)生思考、分析、解決問題的能力,從而取得良好的教學(xué)效果。

綜上所述,課堂教學(xué)設(shè)計(jì)對教學(xué)質(zhì)量有著非常重要的影響。近年來,盡管有文獻(xiàn)提倡對基因工程教學(xué)設(shè)置獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)課程或者讓學(xué)生提早進(jìn)入科研課題來加強(qiáng)對基因工程的學(xué)習(xí)。但現(xiàn)階段對大多數(shù)的高校而言,這恐怕不是一個容易實(shí)踐的提高教學(xué)質(zhì)量的方法。我們以上的改進(jìn),僅為進(jìn)一步完善基因工程課堂教學(xué)起到拋磚引玉之效果。將來,在基因工程課程教學(xué)研究過程中,作為主導(dǎo)課堂教學(xué)的一方,應(yīng)更好地結(jié)合本校的實(shí)際,并融合教師自身多年的科研經(jīng)驗(yàn),繼續(xù)努力探索,對更多的關(guān)鍵內(nèi)容、知識點(diǎn)進(jìn)行更好的課堂課件設(shè)計(jì),以化枯燥為有趣及深入淺出的啟發(fā)式授課方式等鍛煉學(xué)生的思維,培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造能力,提高課堂教學(xué)的質(zhì)量。

參考文獻(xiàn):

[1]王文鋒,武新勝等.醫(yī)學(xué)院?;蚬こ痰恼n程改革[J].中國高等醫(yī)學(xué)教育,2015,(5):68-69.

[2]王志鵬,郭小玉.高校課堂教學(xué)質(zhì)量問題思辨[J].當(dāng)代教育理論與實(shí)踐,2014,(10):79-80.

[3]何旭明.教師教學(xué)投入影響學(xué)生學(xué)習(xí)投入的個案研究[J].教育學(xué)術(shù)月刊,2014,(7)93-99.

A Preliminary Study on the Improvement of the Classroom Teaching Design for Gene Engineering

in China's Colleges and Universities

―The Courseware Design for "Heat Shock Transformation of Escherichia Coli"

LU Shan,LIU ping,LI Tong-hui,GAO Yan-hong

(Life Science College of Nanjing Normal University,Nanjing,Jiangsu 210023,China)

第5篇:基因工程基本原理范文

【關(guān)鍵詞】《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》課程;教材;多媒體;實(shí)踐教學(xué)

生物技術(shù)已成為當(dāng)今高科技領(lǐng)域發(fā)展最具生命力、最引人注目的前沿學(xué)科之一。當(dāng)前以及未來數(shù)十年,利用現(xiàn)代生物技術(shù)對食品生產(chǎn)進(jìn)行技術(shù)改造升級,生產(chǎn)出新型的食品添加劑、保健食品甚至是全新的食品原料,將成為食品產(chǎn)業(yè)克服產(chǎn)品成本逐年增加、增強(qiáng)核心競爭力和轉(zhuǎn)變經(jīng)濟(jì)增長方式的必由之路。因此,要培養(yǎng)二十一世紀(jì)新型食品專業(yè)人才,學(xué)習(xí)和掌握生物技術(shù)的基本原理和技術(shù)是非常有必要的。我校于2009年對生命科學(xué)學(xué)院食品科學(xué)與工程系開設(shè)了《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》這門課程,立足于培養(yǎng)出不僅能夠?qū)⑹称房茖W(xué)與工程的理論和技術(shù)應(yīng)用于食品生產(chǎn)、食品安全與檢測,也能夠結(jié)合現(xiàn)代生物技術(shù)的理論和技術(shù),尤其是分子生物學(xué)的理論和技術(shù)應(yīng)用于實(shí)際的學(xué)習(xí)和工作中的名副其實(shí)的“復(fù)合型”人才。本人根據(jù)近幾年《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》教學(xué)經(jīng)驗(yàn),提出《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》理論教學(xué)和教材建設(shè)綜合優(yōu)化方案,從多媒體、教材以及實(shí)踐教學(xué)的角度優(yōu)化《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》教學(xué)。

一、教材編寫更貼近食品科學(xué)與工程專業(yè)學(xué)生的知識水平

目前我國高校絕大多數(shù)的食品科學(xué)與工程專業(yè)都開設(shè)了《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》這門課程,也陸續(xù)有一些《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》教材的出版。但是作為一門比較新的課程,教材內(nèi)容上有許多需要改進(jìn)的地方。目前的《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》教材內(nèi)容大多都是從以往的《生物技術(shù)》該門課程的教材照搬而來,只是額外加入了一些生物技術(shù)在食品工業(yè)中具體應(yīng)用的實(shí)例,并沒有從頭到尾的針對食品行業(yè)來介紹生物技術(shù)的各種原理和技術(shù)。同時,食品科學(xué)與工程專業(yè)的學(xué)生在學(xué)習(xí)《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》課程前,僅僅有必修的《生物化學(xué)》課程作為基礎(chǔ),最重要的基礎(chǔ)課《分子生物學(xué)》僅為選修課。因此食品科學(xué)與工程專業(yè)的學(xué)生在學(xué)習(xí)《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》這門課程,尤其是課程中的基因工程部分內(nèi)容的時候會顯得很吃力。

因此,對《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》課程教材進(jìn)行整理和修改顯得尤為必要。例如,現(xiàn)在已出版的《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》教材中都分別設(shè)有“酶工程及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用”和“發(fā)酵工程在食品工業(yè)中的應(yīng)用”這兩個章節(jié),這兩章內(nèi)容與本專業(yè)的《酶工程》、《發(fā)酵工程》以及《發(fā)酵食品工藝學(xué)》三門內(nèi)容基本重復(fù),可以考慮刪掉。針對食品科學(xué)與工程專業(yè)學(xué)生分子生物學(xué)基礎(chǔ)薄弱出發(fā),在基因工程與食品工業(yè)章節(jié)中,多講授一些分子生物學(xué)的基礎(chǔ)知識,以利于學(xué)生理解。同時,教材還應(yīng)在講授生物技術(shù)基本原理和技術(shù)的時候,多以食品工業(yè)中的具體應(yīng)用舉例,而不是在章節(jié)的末尾集中舉例,這樣能夠更利于加深學(xué)生的理解。

二、多媒體教學(xué)作為輔助,讓枯燥的課程鮮活起來

《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》大部分屬于理論講解,如果采用傳統(tǒng)的板書方式教學(xué),學(xué)生對于課程中復(fù)雜的原理、繞口的概念和抽象的方法難免覺得枯燥乏味。在教學(xué)課程中采用計(jì)算機(jī)多媒體教學(xué),讓學(xué)生以更直觀、生動的方式了解食品生物技術(shù)的各項(xiàng)內(nèi)容。利用計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)(CAI,Computer Aided Instruction),在教學(xué)課件中添加生動的圖片、動畫、視頻,把傳統(tǒng)教學(xué)手段下很難表達(dá)的教學(xué)內(nèi)容、知識重點(diǎn)、難點(diǎn)直觀的表達(dá)出來,從而使學(xué)習(xí)內(nèi)容變得容易理解和掌握。

例如,在第二章基因工程的內(nèi)容,通過多媒體課件以動畫的形式輕松的理解轉(zhuǎn)錄、翻譯、PCR等原理,讓學(xué)生快速的理解并掌握。此外,定期給學(xué)生播放最近與視頻生物技術(shù)有關(guān)的國際論壇視頻(如TED),了解最新最尖端的生物技術(shù)、開闊學(xué)生們的眼界、激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。但如果單純采用多媒體教學(xué)又容易產(chǎn)生學(xué)生過于依賴多媒體課件從而不積極思考和記錄課堂筆記,教師和學(xué)生之間互動減少以及課件放映速度快內(nèi)容多學(xué)生來不及思考等問題。因此在《食品生物技術(shù)導(dǎo)論》中將多媒體教學(xué)和傳統(tǒng)的板書教學(xué)相結(jié)合,既能夠抓住學(xué)生的注意力,也能夠以生動的形勢促進(jìn)學(xué)生理解課程內(nèi)容。

三、增加實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容

食品生物技術(shù)是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科,無論多么晦澀的概念或是多么復(fù)雜的原理最終都要以實(shí)驗(yàn)實(shí)踐的形式進(jìn)行應(yīng)用。然而目前我?!妒称飞锛夹g(shù)導(dǎo)論》課程并未開展任何的實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容。因此,作為主講教師可以通過讓學(xué)生親自參與到教師的科學(xué)研究試驗(yàn)中,讓學(xué)生進(jìn)一步的了解基因工程以及免疫檢測技術(shù)等等原理。并且在教學(xué)過程中將科研課題研究與學(xué)生的教學(xué)實(shí)踐相結(jié)合,開展我校獨(dú)具特色的開放實(shí)驗(yàn)室、創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)室等實(shí)踐活動。同時,可以帶領(lǐng)學(xué)生參觀本院國家級、省級重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室以及我校的呼蘭校區(qū)的博士后工作站,讓學(xué)生了解與課程相關(guān)的超凈工作臺、PCR擴(kuò)增儀、電泳儀、凝膠成像儀、流式細(xì)胞儀、超低溫冰箱等高尖端儀器設(shè)備,或到一些食品企業(yè)(如哈肉聯(lián))、藥品企業(yè)(如哈藥集團(tuán))進(jìn)行實(shí)地參觀,使學(xué)生對食品生物技術(shù)這門學(xué)科產(chǎn)生更濃厚的興趣。這種以科研、實(shí)踐促進(jìn)教學(xué),不僅能使學(xué)生接觸到本學(xué)科最前沿的內(nèi)容,而且能提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,并引領(lǐng)學(xué)生參與教師的科研項(xiàng)目之中,使學(xué)生參加課外科研活動形成風(fēng)氣,為進(jìn)一步提高學(xué)生畢業(yè)論文質(zhì)量也起到積極的推動作用。

參考文獻(xiàn):

[1]陸兆新.現(xiàn)代食品生物技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002.

第6篇:基因工程基本原理范文

1 “基因工程制藥”實(shí)行雙語教學(xué)的必要性

“雙語教學(xué)( bilingual teaching)”的定義就是在教學(xué)過程中,用兩種語言作為教學(xué)媒介語,學(xué)習(xí)和掌握學(xué)科專業(yè)知識。雙語教學(xué)一方面可以提高學(xué)生的英語水平,另外一方面可以培養(yǎng)學(xué)生利用英語學(xué)習(xí)專業(yè)知識和提高解決專業(yè)問題的能力。如今的生物技術(shù)正迅速地改變著我們的生產(chǎn)和生活方式?!盎蚬こ讨扑帯焙w了研發(fā)基因工程藥物的基本理論和相關(guān)研制技術(shù)比如免疫球蛋白,細(xì)胞因子和干擾素等新藥的原理、方法、技術(shù)路線。近年來,隨著人們健康觀念的變化,尤其國家先后出臺了《國家中長期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要》和《促進(jìn)生物產(chǎn)業(yè)加快發(fā)展的若干政策》,加大了對生物技術(shù)創(chuàng)新和生物產(chǎn)業(yè)發(fā)展的支持力度,我國的生物制藥行業(yè)發(fā)展保持快速增長,但大多依靠國外進(jìn)口,缺乏自主產(chǎn)品。隨著分子生物學(xué)突飛猛進(jìn)的發(fā)展,基因治療正在快速發(fā)展,在2011年,美國醫(yī)學(xué)界就首次提出了“精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)”的概念,2012年10月,?W盟批準(zhǔn)了西方發(fā)達(dá)國家第一個基因治療藥物uniQure公司的Glybera,2015年年初,奧巴馬提出了“精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)計(jì)劃”,引領(lǐng)了一個醫(yī)學(xué)新時代,促進(jìn)了基因工程制藥研究新藥的迅猛發(fā)展。作為醫(yī)藥行業(yè)的技術(shù)人員,只有與時俱進(jìn),不斷創(chuàng)新,跟上國際同行的步伐,相互切磋,才能更好地掌握基因工程藥物理論和新技術(shù),為醫(yī)學(xué)新時代的生物藥的研究和發(fā)展做出貢獻(xiàn),創(chuàng)新出自己的產(chǎn)品?;谝陨?,開展“基因工程制藥”雙語教學(xué)是必要的,有助于學(xué)生及時了解學(xué)科國際發(fā)展趨勢,更好地為醫(yī)藥行業(yè)服務(wù)。

2 “基因工程制藥”雙語教學(xué)實(shí)施方法和思路

2.1 提高雙語教學(xué)教師素質(zhì)的必要性和應(yīng)對措施

雙語教學(xué)除了要求學(xué)生掌握本專業(yè)相關(guān)的基礎(chǔ)知識之外,同時學(xué)生的外語水平和用外語學(xué)習(xí)專業(yè)知識的能力也要在雙語教學(xué)的教學(xué)過程中得到提高,這對任課教師有一定的要求。教師是雙語教學(xué)的主要實(shí)施者,實(shí)施雙語教學(xué)的教師要有深厚的專業(yè)知識,外語水平高,具有用外語解析專業(yè)知識的能力。目前,高職院校能進(jìn)行雙語教學(xué)的師資仍然有限,高職院校教師從總體上大致分為兩類,一是專業(yè)英語水平不錯,能查閱國外專業(yè)文獻(xiàn)、科研能力較強(qiáng),但利用英語交流表達(dá)上有所欠缺;二是英語專業(yè)的教師聽說讀寫能力水平較強(qiáng),但專業(yè)知識不夠。教師的英語水平和學(xué)科知識等直接影響教學(xué)質(zhì)量,因此,提高高職院校雙語教學(xué)教師素質(zhì)是很有必要的。目前,提高雙語教學(xué)教師的主要措施就是學(xué)校選派有能力的教師參加國內(nèi)雙語教學(xué)研修班和赴國外求學(xué)。教師通過研修班的培訓(xùn)學(xué)習(xí)和國外相關(guān)課程學(xué)習(xí),有助于提高教師的外語口頭表達(dá)能力、專業(yè)水平以及寫作能力,拓寬了教師的視野,提高了教師參與雙語教學(xué)改革的積極性,提高了雙語教學(xué)教師團(tuán)隊(duì)的師資水平,為培養(yǎng)國際性的人才提供了基本保證。

2.2 確立適度的教學(xué)模式

“基因工程制藥”課程目標(biāo)是使學(xué)生能夠掌握基因工程制藥研究體系的基本原理,掌握基因工程制藥操作的基本技能,了解基因工程制藥研究方向的熱點(diǎn)問題和發(fā)展趨勢。雙語教學(xué)的有效實(shí)施可以提高學(xué)生的外語水平,引導(dǎo)學(xué)生自己動手查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)及國外相關(guān)網(wǎng)站了解醫(yī)藥行業(yè)知識的最新進(jìn)展,成為與時俱進(jìn)的人才。在教學(xué)過程中,教師應(yīng)貫徹本課程知識目標(biāo),以制備基因工程藥物產(chǎn)品為主線,圍繞基因工程制藥的一般流程、基因工程制藥常用的載體、基因工程制藥常用的酶;基因工程制藥常用的技術(shù)五大模塊為體系進(jìn)行課程的整合與設(shè)計(jì)。國內(nèi)常見的雙語教學(xué)模式一般有3種,分別是沉浸式教學(xué)、保持型教學(xué)和過渡型教學(xué)。針對我國高職學(xué)生英語基礎(chǔ)相對薄弱,對英語授課的接受能力普遍偏低的特點(diǎn),高職院校一般采用過渡型雙語教學(xué)。課堂上合理安排兩種語言的教學(xué)比例是很重要的。教學(xué)資料PPT是英文,授課全部用中文這種形式化教學(xué)是不可取的。提倡比如基因治療、免疫球蛋白和干擾素等重點(diǎn)概念用英語講,配以中文解釋。知識簡單的緒論和實(shí)驗(yàn)過程中簡單的技術(shù)路線等章節(jié)用英語講,而在知識較難的基因工程藥物研發(fā)多用漢語教學(xué)。不論用英語還是漢語,都應(yīng)圍繞將語言作為載體傳授學(xué)科知識的基本點(diǎn)來開展雙語教學(xué)。

2.3 選擇合理的教材

合適的英語原版教材和參考書是雙語教學(xué)正常開展的前提。國外原版教材具有原汁原味,內(nèi)容豐富,圖文并茂,結(jié)構(gòu)鮮明,權(quán)威性強(qiáng)等特點(diǎn)。一些本科院校中文教材選定的是李元的《基因工程藥物》,原版教材選用的是Gene Cloning and DNA analysis(T.A.Brown),中文教材與原版教材內(nèi)容相符的章節(jié)用來作為雙語教學(xué)的內(nèi)容。但是國外原版教材費(fèi)用價格偏高、書中內(nèi)容信息量大、專業(yè)理論知識深和高職學(xué)生英語基礎(chǔ)偏弱,接受能力不強(qiáng)等都是實(shí)際情況。高職課程教學(xué)大綱重在培養(yǎng)學(xué)生技術(shù)應(yīng)用能力,高職院校選用國外原版教材顯然是不合適的。目前,完全適合高職院校的雙語教材還比較少。因此,高職院校相關(guān)學(xué)科教師可根據(jù)人才培養(yǎng)方案課程大綱和學(xué)生的外語水平和接受能力對國外原版教材進(jìn)行改編、整合,整合成體現(xiàn)高職教育特色和雙語教學(xué)目標(biāo)的教材。教師也可根據(jù)學(xué)生實(shí)際情況編寫教材配套中文講義,方便學(xué)生理解,以期保證高職院校雙語教學(xué)的順利進(jìn)行。

2.4 運(yùn)用靈活恰當(dāng)?shù)慕虒W(xué)方法

有學(xué)習(xí)興趣就有學(xué)習(xí)動力,培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣是教師的首要任務(wù)。“基因工程制藥”課程理論性強(qiáng)、專業(yè)性強(qiáng),枯燥乏味。因此,教師要想辦法提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,讓學(xué)生以積極的心態(tài)對待雙語教學(xué)。比如在授課過程中,教師可以多介紹比如基因治療,精準(zhǔn)醫(yī)療這些前沿技術(shù)在醫(yī)藥領(lǐng)域的實(shí)際應(yīng)用,讓學(xué)生意識到生命科學(xué)知識和新技術(shù)在不斷變更,喚起學(xué)生探索未知領(lǐng)域的欲望。在理論課授課中,開展雙語教學(xué)可以穿插“漢中有英,英中帶漢”的方式進(jìn)行,應(yīng)以漢語為主(70%)、英語為輔(30%),以此來緩解聽課疲勞。將重點(diǎn)概念比如基因治療,免疫球蛋白等用英語表述,漢語注釋,把握?y易深度,有層次性,在介紹治療腫瘤的基因藥物等這些新技術(shù)時,準(zhǔn)備豐富的多媒體課件和微課內(nèi)容(具有英文背景的),讓學(xué)生建立感性認(rèn)識。同時,教師應(yīng)積極地改進(jìn)教學(xué)方法,采用研討式、啟發(fā)式和辯論式等創(chuàng)造性教學(xué)法激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣?!盎蚬こ讨扑帯币彩且婚T實(shí)驗(yàn)課程,在實(shí)驗(yàn)課程中可采用小組教學(xué),在PCR克隆技術(shù)、質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化等簡單實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)步驟可以用英文講授,實(shí)驗(yàn)結(jié)果用中文論述,學(xué)生在實(shí)踐操作過程中遇到問題可以及時與教師溝通,提高雙語教學(xué)質(zhì)量。

2.5 教學(xué)考核

雙語教學(xué)效果考核方式一般是平時成績和課程期末考試二者結(jié)合到一起進(jìn)行考核。平時成績可以結(jié)合課程進(jìn)度來布置作業(yè),可以選取一個專題如Gene therapy、Insulin secreting gene engineering等,課后分組討論后查閱文獻(xiàn),制作成PPT,鼓勵用英文演講,教師和同學(xué)共同進(jìn)行評分。學(xué)生在完成專題作業(yè)過程中通過NCBI、EMBL、中國生命科學(xué)論壇、生物秀等網(wǎng)站,了解生物技術(shù)在生物醫(yī)藥行業(yè)的最新進(jìn)展,同時,通過查閱外文文獻(xiàn)和國外網(wǎng)站,提高了學(xué)生的英語閱讀能力和增加了詞匯量,也提高了用英語解析專業(yè)知識的能力。同時,通過討論也能訓(xùn)練他們用英語思考問題的能力。課程期末考試,試卷題型一般包括名詞解釋、選擇題、判斷題、簡答題,論述題這幾種題型。由于高職院校學(xué)生英語基礎(chǔ)薄弱,出題形式全部用英文命題和用英文作答顯然是不合適的。應(yīng)采取中英文混合形式出題,名詞解釋和簡答題用英文命題,選擇題、判斷題和論述題用中文出題。期末考試名詞解釋用英文作答,其它題型用中文作答,也可增加英譯漢和漢譯英題型。這種形式既能考核專業(yè)知識的掌握程度也能考核英語水平的閱讀和寫作能力,保證雙語教學(xué)學(xué)習(xí)和教學(xué)效果。

第7篇:基因工程基本原理范文

在新課標(biāo)教材《選修3?現(xiàn)代生物科技專題》的“基因工程”一章中,不同版本的教材都設(shè)計(jì)了一個模擬操作。人教版為“重組DNA分子的模擬操作”,蘇教版為“模擬限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用過程”。筆者整合了不同版本的教材內(nèi)容,指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行了一次有意義的教學(xué)實(shí)踐。

1 教學(xué)分析

在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的基因工程技術(shù)是由“分子工具”的突破開始的,因此基因工程專題根據(jù)學(xué)生的認(rèn)知規(guī)律首先介紹了DNA重組技術(shù)的基本工具,涉及準(zhǔn)確切割DNA的“手術(shù)刀”、將DN段連接起來的“縫合線”、將體外重組的DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞的“運(yùn)輸工具”。但由于這三種“分子工具”非常微觀、抽象、復(fù)雜,所以成為教學(xué)的難點(diǎn),而理解它們的結(jié)構(gòu)與功能基礎(chǔ)基因工程基本操作程序的學(xué)習(xí)是后續(xù),因此這也是本專題的教學(xué)重點(diǎn)之一。為突破這個難點(diǎn),并及時反饋學(xué)生對重點(diǎn)知識的掌握情況,教師組織學(xué)生進(jìn)行“重組DNA分子的模擬操作”實(shí)驗(yàn)就具有重要的意義。

在模擬實(shí)驗(yàn)中,教師引導(dǎo)學(xué)生借助模型化方法,將DNA和“分子工具”放大,親自動手對DNA分子進(jìn)行“剪切”和“拼接”,模擬制備重組DNA的過程。在體驗(yàn)建模的過程中,教師注重激發(fā)學(xué)生的學(xué)科興趣。模擬活動之后,教師組織學(xué)生討論,引導(dǎo)分析建模過程,從而提升學(xué)生的建模思維和建模能力。同時教師將重難點(diǎn)知識設(shè)計(jì)為相關(guān)的問題,引發(fā)學(xué)生的思考,讓其嘗試應(yīng)用所學(xué)知識解決問題,從而突出重點(diǎn)、突破難點(diǎn),并及時反饋信息,為基因工程基本操作程序的教學(xué)設(shè)計(jì)提供依據(jù)。這樣的建模活動將實(shí)現(xiàn)學(xué)生知識、能力、情感、態(tài)度與價值觀的進(jìn)一步提升。

2 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

(1) 模擬制備重組DNA分子的操作過程;

(2) 分析制備重組DNA分子的模型,理解基因工程的基本原理;

(3) 體驗(yàn)制備重組DNA分子的過程,激發(fā)熱愛生物科學(xué)技術(shù)的情感。

3 實(shí)驗(yàn)原理

基因工程是指在體外通過人工“剪切”和“拼接”等方法,對生物的基因進(jìn)行改造和重新組合,然后導(dǎo)入受體細(xì)胞,并使重組基因在受體細(xì)胞中表達(dá),產(chǎn)生人類需要的基因產(chǎn)物的技術(shù)。因而,基因工程又稱為重組DNA技術(shù)。在體外重組DNA分子,至少需要三種工具,即“分子手術(shù)刀”――限制性核酸內(nèi)切酶、“分子縫合針”――DNA連接酶和“分子運(yùn)輸車”――基因載體。

4 材料用具

白色紙條(3 cm×30 cm)、紅色紙條(3 cm×10 cm)、剪刀、透明膠帶、深色膠帶(藍(lán)色或綠色)等。

5 實(shí)驗(yàn)步驟

將紅色紙條用透明膠帶首尾相連,粘成圓環(huán)形,代表細(xì)菌的質(zhì)粒(圖1)。白色紙條代表含有目的基因的DN段。

假設(shè)每組學(xué)生只有一種限制酶(EcoRI限制酶或AluⅠ限制酶)和一種DNA連接酶(E?coliDNA連接酶或T4DNA連接酶)。

(注:EcoRI限制酶能識別GAATTC序列,并在G-A之間切割產(chǎn)生黏性末端;AluⅠ限制酶能識別AGCT序列并在G-C之間切割產(chǎn)生平口末端。E?coliDNA連接酶只能將雙鏈DN段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來,不能連接平末端,T4DNA連接酶既可以連接黏性末端,又可以連接平末端,但連接平末端的效率較低。)

從白色紙條的2條DNA鏈上分別找出所選的限制酶所識別的核苷酸序列,畫虛線表示中心軸線的位置,畫箭頭(“”和“”)標(biāo)注酶切位點(diǎn),用剪刀正確地“切割”DNA,從而獲得目的基因。

用同樣的方法剪切質(zhì)粒(圖2和圖3)。

把白色紙條和紅色紙條上配對的黏性末端或平末端用深色膠帶粘在一起,使目的基因插入質(zhì)粒中,獲得重組DNA(圖4和圖5)。

6 注意事項(xiàng)

選擇一種限制性核酸內(nèi)切酶,一定要正確識別其特定序列,并且在識別的位點(diǎn)“切割”DNA分子。

選擇恰當(dāng)?shù)腄NA連接酶連接DNA分子形成重組DNA分子。圖4所示為先用EcoRI限制酶切割,再用E?coliDNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒。圖5為先用AluⅠ限制酶切割后,再用T4DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒。

注意安全使用剪刀。

7 討論與體會

本模擬操作是一次非常有益的教學(xué)嘗試,它將微觀的過程直觀呈現(xiàn)出來,有利于學(xué)生深入理解基因工程的原理。

7.1 教學(xué)材料的改進(jìn)與準(zhǔn)備

不少教材選用的是兩種顏色(如綠色和粉紅色)的等寬硬紙板,然后讓學(xué)生在硬紙板上依次等距離寫上字母(字母要清晰、工整)。由于學(xué)生用筆所寫的字母根本不可能大小一致,所以堿基要實(shí)現(xiàn)互補(bǔ)配對就比較難。因此,做出的紙帶也就缺乏科學(xué)性和可行性。為此做如下改進(jìn):

將“硬紙板”改為“A4紙”,同時將“綠色和粉紅色”改為“白色和紅色”。因?yàn)橛布埌灞容^難打印,而A4紙打印非常方便。為了節(jié)約起見,含有目的基因的片段采用白色紙油印的方式,質(zhì)粒采用紅色紙打印。

重新設(shè)計(jì)DN段。不少教材中設(shè)計(jì)的DN段只有1個酶切位點(diǎn),不能切割出兩端具有黏性末端的DN段,也不能被多種限制酶所識別切割,為此作如下改進(jìn)。教師需要預(yù)先將模擬的DN段放大成小二字號,另外在字母的外側(cè)各加上一條黑線代表DNA分子的基本骨架。用白色A4紙一頁(橫向)打印4條帶有目的基因的DNA分子,用紅色A4紙一頁(縱向)打印6條質(zhì)粒DNA分子(圖6),然后裁成等寬的紙條即可。這樣既可降低實(shí)驗(yàn)操作的難度,也減輕了學(xué)生的負(fù)擔(dān)。

改進(jìn)工具,將教材中的“透明膠帶”改為“深色的膠帶”,如“藍(lán)色或綠色膠帶”。當(dāng)教師把學(xué)生所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果用實(shí)物投影儀進(jìn)行投影時,若學(xué)生用“透明膠帶”,所粘貼的位置顯示不出來,學(xué)生所粘貼的位置是否正確也就很難看清楚,教學(xué)效果比較差。改用“藍(lán)色或綠色膠帶”后,投影效果就非常明顯了。

7.2 組織教學(xué)策略

教師可根據(jù)學(xué)生的情況,采用不同的方式實(shí)施上述實(shí)驗(yàn)。如果學(xué)生自學(xué)能力比較強(qiáng),教師可將該實(shí)驗(yàn)任務(wù)課前交給學(xué)生,然后指導(dǎo)學(xué)生閱讀教材和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)后,課后合作完成;課上學(xué)生交流匯報(bào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,分析模擬操作。如果學(xué)生主動學(xué)習(xí)能力不是很強(qiáng),實(shí)驗(yàn)可在學(xué)習(xí)基因工程操作的基本工具時同時進(jìn)行,學(xué)生邊做邊學(xué)。

教師依據(jù)模擬實(shí)驗(yàn)的操作情況,可以提出以下問題供學(xué)生思考與討論:

解釋模型,把制備重組DNA分子的實(shí)際步驟和模擬實(shí)驗(yàn)中的各個步驟聯(lián)系起來,思考模型中各個術(shù)語所對應(yīng)的步驟或物體,完成表1。

用剪刀剪切目的基因和用限制性核酸內(nèi)切酶剪切有什么區(qū)別?(限制性核酸內(nèi)切酶能自己識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每條鏈定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。而模擬實(shí)驗(yàn)中的剪刀除了模擬剪切磷酸二酯鍵外,還剪切了DNA雙鏈堿基之間的氫鍵。)

在實(shí)驗(yàn)中,你所用的限制酶和DNA連接酶分別是什么?切割兩種DNA分子你使用了同一種限制性核酸內(nèi)切酶嗎?為什么?(學(xué)生根據(jù)所選擇的限制酶和DNA連接酶的實(shí)際情況填寫。切割兩種DNA分子需要使用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,因?yàn)槭褂猛环N限制性內(nèi)切酶產(chǎn)生同樣的黏性末端,才能連接成重組DNA分子。)

DNA連接酶的作用是什么?檢查你所制作的重組DNA,DNA連接酶的作用是否表示正確?(DNA連接酶的作用是恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。檢查模型中DNA連接酶的作用是否表示正確,主要是要看膠帶粘貼的位置。)

7.3 實(shí)驗(yàn)評價

本實(shí)驗(yàn)注重實(shí)驗(yàn)操作過程的評價,小組之間可以相互比較,也可利用投影展示各組實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,從以下幾方面進(jìn)行評價。

7.3.1 是否正確“識別”特定的核苷酸序列

根據(jù)所選的限制性核酸內(nèi)切酶的特點(diǎn),在含有目的基因的片段和質(zhì)粒上找出其特定的核苷酸序列,畫虛線表示中心軸線的位置,畫箭頭(“”和“”)標(biāo)注酶切位點(diǎn)。

7.3.2 是否完成對目的基因和質(zhì)粒的“切割”

用剪刀正確地“切割”DNA,從而獲得目的基因和質(zhì)粒片段。

7.3.3 是否進(jìn)行正確的“拼接”

檢查實(shí)驗(yàn)結(jié)果,主要看膠帶粘貼的位置,判斷DNA連接酶的作用是否表示正確。

為了檢驗(yàn)這一模擬實(shí)驗(yàn)的效果,可用兩個同等程度的班級進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn),然后用同樣的習(xí)題進(jìn)行后測,比較實(shí)驗(yàn)班與對照班的正確率。

實(shí)踐證明,采用模擬實(shí)驗(yàn)的班級,對基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的作用理解得更為深入,學(xué)習(xí)效果更好。

參考文獻(xiàn):

第8篇:基因工程基本原理范文

1 分子生物技術(shù)概述

分子生物技術(shù)也稱之為生物工程,是現(xiàn)代生物技術(shù)的主要標(biāo)志,它是以基因重組技術(shù)和細(xì)胞融合技術(shù)為基礎(chǔ),利用生物體(或者生物組織、細(xì)胞及其組分)的特性和功能,設(shè)計(jì)構(gòu)建具有預(yù)期性狀的新物種或新品系,以及與工程原理相結(jié)合進(jìn)行生產(chǎn)加工,為社會提供商品和服務(wù)的一個綜合性技術(shù)體系,其內(nèi)容包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、DNA測序技術(shù)、DNA芯片技術(shù)、酶工程技術(shù)等。現(xiàn)代分子生物技術(shù)的誕生以70年代DNA重組技術(shù)和淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)的發(fā)明和應(yīng)用為標(biāo)志,迄今已走過了30多年的發(fā)展歷程。實(shí)踐證明在解決人類面臨的糧食、健康、環(huán)境和能源等重大問題方面開辟了無限廣闊的前景,受到了各國政府和企業(yè)界的廣泛關(guān)注,是21世紀(jì)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)的先導(dǎo)。醫(yī)學(xué)領(lǐng)域是分子生物技術(shù)最先登上的舞臺,也是目前現(xiàn)代分子生物技術(shù)應(yīng)用最廣泛、成效最顯著、發(fā)展最迅速、潛力也最大的一個領(lǐng)域。據(jù)統(tǒng)計(jì),國際上分子生物技術(shù)領(lǐng)域所取得研究成果的60%以上集中在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

2 分子生物技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要應(yīng)用

2.1 分子生物傳感器在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用

分子生物傳感器是利用一定的生物或化學(xué)固定技術(shù),將生物識別元件(如酶、抗體、抗原、蛋白、核酸、受體、細(xì)胞、微生物、動植物組織)固定在換能器上,當(dāng)待測物與生物識別元件發(fā)生特異性反應(yīng)后,通過換能器將所產(chǎn)生的反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢暂敵?、檢測的電信號和光信號等,以此對待測物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,從而達(dá)到檢測分析的目的。分子生物傳感器可以廣泛地應(yīng)用于對體液中的微量蛋白、小分子有機(jī)物、核酸等多種物質(zhì)的檢測。在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中,這些項(xiàng)目是臨床診斷和病情分析的重要依據(jù)。能夠在體內(nèi)實(shí)時監(jiān)控的生物傳感器對于手術(shù)中或重癥監(jiān)護(hù)的病人都很有幫助。

2.2 分子生物納米技術(shù)在基因診斷中的應(yīng)用

基因診斷是利用分子雜交及熒光技術(shù)檢測DN段,已經(jīng)為基因診斷在臨床上的應(yīng)用帶來了巨大的發(fā)展前景。研究表明,利用納米技術(shù),如利用金納米微粒結(jié)合雜交DN段,很容易進(jìn)入機(jī)體細(xì)胞核,并與核內(nèi)染色體組合,具有較高的特異性,可以克服目前基因診斷所面臨的一些困難和問題,進(jìn)一步提高了基因診斷在實(shí)驗(yàn)室中的地位??茖W(xué)家通過超順磁性氧化鐵納米粒脂質(zhì)體對肝癌的研究,提高了直徑3 mm以下的腫瘤檢測率。結(jié)論表明,納米微粒對腫

瘤早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷具有重要意義。

2.3 分子生物技術(shù)在醫(yī)學(xué)制藥中的應(yīng)用

分子生物技術(shù)發(fā)展的一個重要方向是醫(yī)學(xué)制藥的研究與開發(fā)。與傳統(tǒng)的化學(xué)合成制藥相比,它不僅具有針對性強(qiáng)、療效好、副作用較小的優(yōu)點(diǎn),同時對蛋白質(zhì)藥物改造、提高療效、降低毒性、提高穩(wěn)定性具有重要作用,并且能夠利用生物系統(tǒng),將自然界中存在的含量極低的有效生物活性物質(zhì)進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)以及建立起高效、快速、準(zhǔn)確、簡便的分子診斷技術(shù)和開發(fā)出新藥,更重要的是可以預(yù)防和治療一些應(yīng)用傳統(tǒng)治療方法無法克服的疾病。目前這一領(lǐng)域的應(yīng)用主要包括以下幾個方面:生產(chǎn)基因工程藥物;生產(chǎn)發(fā)酵工程藥物;生產(chǎn)核酸類藥物;利用生物系統(tǒng)加工天然藥物;從海洋生物中純化提取藥物。

2.4 分子納米技術(shù)在基因療法中的應(yīng)用

基因治療是臨床治療學(xué)上的重大發(fā)展,其基本原理是:質(zhì)粒DNA進(jìn)入目的細(xì)胞后,可以修復(fù)遺傳錯誤,或可產(chǎn)生治療因子,如多肽、蛋白質(zhì)、抗原等,納米技術(shù)能使DNA通過主動靶向作用定位于細(xì)胞。將質(zhì)粒DNA縮小到50~200nm,帶上負(fù)電荷進(jìn)入到細(xì)胞核,插入到細(xì)胞核DNA的確切部位,起到對癥治療效果。同時分子納米技術(shù)能夠快速有效地確定基因序列、基因和藥物的體內(nèi)走向、傳送和定位傳遞,使臨床診斷和治療過程效率得以提高。同時無機(jī)納米顆粒體積小,可在血管中隨血液循環(huán),透過血管壁進(jìn)入各個臟器的細(xì)胞中,作為新型非病毒型基因載體能有效介導(dǎo)DNA的轉(zhuǎn)導(dǎo),并使其在細(xì)胞內(nèi)高水平的表達(dá),從而為基因表達(dá)、功能研究及基因治療提供了新的技術(shù)和手段。

2.5 分子生物芯片技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

第9篇:基因工程基本原理范文

關(guān)鍵詞:  HCV  抗–HCV  RNA  ELISA  RT-PCR

        HCV檢測目前存在的主要問題有:1.由于HCV抗原結(jié)構(gòu)的特殊性,直接檢測血清中HCV抗原的技術(shù)問題還未徹底解決。2.抗體(抗-HCV)出現(xiàn)時間晚,從HCV感染后到抗體轉(zhuǎn)陽的時間平均為50~70天,有的患者可延長至6~9個月,檢測的“窗口期”較長。3.病毒基因型復(fù)雜而且容易變異,使基因水平的檢測質(zhì)量不夠穩(wěn)定。隨著有關(guān)人員近年來的不斷努力和相關(guān)科學(xué)的迅猛發(fā)展,已經(jīng)在HCV檢測技術(shù)方面有了重要進(jìn)展。

        1  第三代抗-HCV試劑的應(yīng)用

        檢測丙型肝炎病毒抗體(抗HCV)仍是目前常用手段,這方面的檢測方法主要是第三代酶免疫測定法(EIA)或間接酶免疫法(ELISA),我國大多采用ELISA方法。

        ELISA方法中包被抗原的組成和質(zhì)量是關(guān)鍵因素。第三代ELISA試劑比第一、第二代試劑有明顯的改進(jìn),其包被的抗原為HCV核心抗原NS3、NS4和NS5。由于第一、第二代試劑的重組基因多肽抗原中仍有SOD多肽,所以都存在抗-SOD造成的假陽性。而第三代HCV試劑,用中國北方地區(qū)HCV全基因序列,根據(jù)文獻(xiàn)開發(fā)的預(yù)測蛋白理化性質(zhì)及三級結(jié)構(gòu)和抗原決定簇的位點(diǎn)的序列軟件,完成了HCV全基因序列的親水性﹑親近性﹑移動性分析,已預(yù)測到HCV抗原決定簇的位點(diǎn)。第三代試劑的特異性達(dá)到99%[4]??梗璈CV檢測可成為丙型肝炎病毒早期感染的檢測指標(biāo)[5]。

        HCV感染通常是持續(xù)的終生感染。雖然第三代HCV抗體ELISA試劑增加了HCV Ns5區(qū)表達(dá)的蛋白作為抗原,提高了試劑敏感性,HCV感染的“窗口期”通常還需要平均40多天。因此,第三代ELISA試劑仍需要提高和改進(jìn),例如在篩查試驗(yàn)的特異性方面,仍存在假陽性結(jié)果。對強(qiáng)陽性或弱陽性樣本的檢測,國產(chǎn)試劑(主要廠家)的s/co值高于進(jìn)口試劑,但是無論對陽性及陰性樣本檢測,國產(chǎn)試劑的CV值及特異性均明顯低于進(jìn)口試劑,以致出現(xiàn)更多的假陽性結(jié)果。此外,丙肝抗體酶免試劑皆沒有灰區(qū)的設(shè)定,s/co比值較低(但大于1)的結(jié)果也報(bào)告陽性,亦是假陽性比較多的原因。[6]

        2  丙型肝炎病毒抗原檢測方法的建立

        多年來,專業(yè)人員一直探索能夠直接檢測HCV抗原,以達(dá)到縮短窗口期的目的。但是由于HCV抗原的特殊性和相關(guān)抗體制備中存在的困難,使這方面的進(jìn)展受到阻礙。

        2.1 HCV核心抗原檢測

        HCV核心抗原是HCV感染者體內(nèi)出現(xiàn)的早期感染指標(biāo),幾乎與HCV  RNA同時出現(xiàn),核心抗原和HCV RNA的動力學(xué)變化密切相關(guān)。

        HCV核心抗原檢測用雙抗體夾心法定性或定量檢測血清樣品中的HCV核心抗原,其基本原理是:以基因工程核心抗原免疫小鼠后獲得的純抗HCV核心抗原單克隆抗體作為固相包被物,用與固相包被物有不同抗原決定簇的抗-HCV核心抗原單克隆抗體作為辣根過氧化物酶標(biāo)記物,與血清中的HCV核心抗原反應(yīng),OPD顯色后進(jìn)行定性或定量測定。該方法不受被檢測樣品中抗-HCV的干擾,檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠??捎糜贖CV早期急性丙型肝炎診斷,抗-HCV陽性感染者的病毒血癥分析以及HCV感染者治療前后病毒血癥追蹤分析[7]。

        有報(bào)道,HCV-CAg檢測可以較HCV抗體檢出時間提早23~46d[8],且EIA法較PCR法簡便、快速,現(xiàn)有能力開展ELISA檢測的實(shí)驗(yàn)室無需增加特殊設(shè)備,均可檢測。其結(jié)果與RT-PCR方法的復(fù)合率為85.71%。因此,在不具備RNA檢測條件的實(shí)驗(yàn)室開展HCV-CAg檢測時很好的篩查方法。有報(bào)道,在對180例抗-HCV陰性患者的篩查中,檢出HCV-CAg陽性2例,表明僅用抗-HCV檢測將有可能存在0.55%感染者漏診的風(fēng)險,尤其是對手術(shù)前丙肝病毒篩查的病例,它涉及到術(shù)中感染責(zé)任和用血安全等問題。丙肝核心抗原檢測在一定程度上降低了這些風(fēng)險。因此,丙肝核心抗原檢測可作為HCV抗體檢測的補(bǔ)充試劑。

        2.2 HCV抗原檢測

        十幾年來,一些學(xué)者曾經(jīng)試圖建立血清中各種HCV抗原的檢測方法,但由于血液中HCV抗原含量太低,用常規(guī)方法無法檢測出。近年來,由于HCV單克隆抗體的研究成功,已有國內(nèi)外學(xué)者發(fā)表了肝組織及人體分泌物中HCV抗原檢測成功的報(bào)導(dǎo)。如果能加強(qiáng)對HCV中和抗體Wv、抗-HCV-IgM、抗-HCV核心抗體的研究[9],進(jìn)一步開發(fā)對血清及肝組織內(nèi)HCV抗原的測定,可能會在丙肝的實(shí)驗(yàn)診斷方面取得更大進(jìn)展。